Ποιοτική ανάλυση για την ηπατίτιδα C

Share Tweet Pin it

Αφήστε μια απάντηση

Η ποιοτική ανάλυση της αλυσιδωτής αντίδρασης πολυμεράσης - η PCR για την ηπατίτιδα C καθορίζει την παρουσία ή την απουσία HCV στο σώμα. Στο εργαστήριο, μελετάται η δομή του RNA, στον οποίο βρίσκεται ο ιός. Εάν ανιχνευθεί ένας ιός C, είναι απαραίτητο να υποβληθεί σε μια πορεία θεραπείας, καθώς η παραμελημένη κατάσταση του ήπατος έχει σοβαρές συνέπειες. Πραγματική PCR διεξάγεται μετά από ανάκτηση για να επιβεβαιωθεί η απουσία αντισωμάτων. Διορίζεται και για προληπτική εξέταση. Με χαμηλή συγκέντρωση του παθογόνου στο αίμα, η PCR (ποιοτική) δεν μπορεί να ανιχνεύσει τίποτα, επειδή το διαγνωστικό σύστημα έχει τα όρια ευαισθησίας του. Στην περίπτωση ενός αρχικού σταδίου της νόσου ή μιας ήπιας μορφής, η PCR τελικά διαγνωσθεί με υπερευαίσθητο εξοπλισμό.

Τι είναι ένας ιός RNA;

Ο όρος RNA του ιού της ηπατίτιδας C (ή RNA του ιού της ηπατίτιδας C) ονομάζεται η ίδια ηπατική νόσος. Ο ιός C δεσμεύεται σε ένα υγιές κύτταρο σώματος, διεισδύοντας μέσα του. Με την πάροδο του χρόνου, εξαπλωθεί σε όλο το σώμα, είναι μόνο για να μπει στο αίμα. Ως αποτέλεσμα, ο παθογόνος παράγοντας διαπερνά το συκώτι, ασφαλίζει με τα κύτταρα του και εργάζεται σκληρά. Τα ηπατικά κύτταρα (ηπατοκύτταρα) λειτουργούν υπό την επιρροή τους, υφίστανται αλλαγές και από αυτό ξεχνούν. Όσο μεγαλύτερος είναι ο ιός C στο ήπαρ, τόσο περισσότερα κύτταρα πεθαίνουν. Με την πάροδο του χρόνου αναπτύσσονται επικίνδυνες ασθένειες που οδηγούν σε κακοήθη εκφυλισμό και θάνατο.

Η μόλυνση του ήπατος με αυτόν τον τύπο ιού δεν μπορεί να εκδηλωθεί με κανέναν τρόπο εξωτερικά. Για πολλά χρόνια ή δεκάδες χρόνια, ο μολυσμένος άνθρωπος αισθάνεται εντελώς υγιής και μόνο μια τυχαία εξέταση συχνά αποκαλύπτει μια παθολογία. Όταν χορηγείται αίμα για ηπατίτιδα, εξετάζεται τμήμα της αλυσίδας RNA (ριβονουκλεϊνικού οξέος) που είναι μέρος του ανθρώπινου γονιδίου (DNA). Τα αποτελέσματα της εργαστηριακής έρευνας δεν πρέπει να χρησιμοποιούνται για αυτοθεραπεία, διότι αυτό αποτελεί μόνο δείκτη. Ο γιατρός θα καθορίσει την ακριβή εικόνα και την περαιτέρω διάγνωση.

Όταν γίνει: μαρτυρία της μελέτης

Για να επιβεβαιωθεί η HCV, ανατίθεται ανάλυση PCR (αλυσιδωτή αντίδραση πολυμεράσης). Οι μελέτες PCR συμβάλλουν στην εύρεση του υλικού παθογόνου στη δομή του RNA και στη συνταγογράφηση αποτελεσματικής θεραπείας. Διορίζεται στις ακόλουθες περιπτώσεις:

  • ταυτοποίηση σημείων φλεγμονής του ήπατος,
  • μελέτες για την πρόληψη.
  • εξέταση των ατόμων που έρχονται σε επαφή ·
  • διάγνωση ηπατίτιδας μικτής προέλευσης (ορισμός του κύριου παθογόνου) ·
  • Προσδιορισμός του επιπέδου δραστηριότητας της αναπαραγωγής του ιού σε χρόνια μορφή.
  • κίρρωση του ήπατος.
  • για να προσδιοριστεί η αποτελεσματικότητα της προβλεπόμενης θεραπείας.
Οι μελέτες PCR αποδίδονται από γιατρό για να προσδιοριστεί η αποτελεσματικότητα της πορείας της θεραπείας για την ηπατίτιδα.

Υπάρχει ποιοτική και ποσοτική ανάλυση της PCR. Η ποσοτική PCR δείχνει το ποσοστό του RNA με τους φορείς του ιού στο αίμα και η ποιοτική PCR δείχνει παρουσία ή απουσία ιού. Ένας θετικός δείκτης ποιότητας (παρουσία RNA ηπατίτιδας C) απαιτεί επίσης μια ποσοτική μελέτη. Ένα υψηλό επίπεδο συγκέντρωσης του παθογόνου της ηπατίτιδας C συνδέεται με τον κίνδυνο μετάδοσης, δηλαδή με μόλυνση άλλων. Οι χαμηλές ποσότητες αντιμετωπίζονται καλύτερα. Η ποσότητα των ιών RNA στο αίμα δεν σχετίζεται με την ένταση της νόσου. Η ανάλυση PCR γίνεται επίσης στην περίπτωση της θεραπείας με ιντερφερόνη, προκειμένου να συνταγογραφηθεί η διάρκεια και η πολυπλοκότητα της πορείας θεραπείας.

Χαρακτηριστικά ποιοτικής ανάλυσης PCR για ηπατίτιδα C

Μια ποιοτική ανάλυση με έναν δείκτη αλυσιδωτής αντίδρασης πολυμεράσης αποδίδεται σε όλους τους ασθενείς που έχουν αντισώματα στην ηπατίτιδα C στο αίμα τους. Όποιος ανακτάται και ανακτάται, πρέπει να επανεξεταστεί. Συνιστάται να περάσει μια ανάλυση για την ηπατίτιδα Β, στη συνέχεια, σε περίπτωση θετικού συμπεράσματος, και για την ηπατίτιδα D. Επίσης, η ποιοτική ανάλυση της αντίδρασης θα πρέπει να πραγματοποιείται σε συνδυασμό με άλλες εξετάσεις αίματος. Οι αναλύσεις θα παρουσιάσουν μια πλήρη εικόνα της εξάπλωσης του ιού.

Από τα αποτελέσματα των δοκιμών, θα παρατηρηθεί μόνο μια θετική δοκιμασία για ηπατίτιδα C ή αρνητική, δηλαδή η παρουσία ή απουσία του ιού. Εάν το συμπέρασμα είναι "ανιχνευμένο", τότε ο ιός είναι και εξακολουθεί να ενεργεί ενεργά. Η ονομασία "δεν βρέθηκε" υποδηλώνει την απουσία του ιού ή το μικρό του ποσό. Με αυτόν τον δείκτη, θα πρέπει να ληφθεί υπόψη το γεγονός ότι η αναλυτική ευαισθησία των διαγνωστικών συστημάτων είναι διαφορετική και η ηπατίτιδα C του RNA μπορεί να παραμείνει στο αίμα, αλλά δεν εμφανίζεται στην ανάλυση.

Μια ιδιαίτερα ευαίσθητη μέθοδος της υπερευαισθησίας C της PCR αποκαλύπτεται ακόμη και σε ελάχιστες ποσότητες. Χρησιμοποιείται μια μελέτη φθορισμού υβριδισμού που είναι πολλές φορές υψηλότερη από τα πρότυπα συστήματα PCR. Η μέθοδος χρησιμοποιείται σε πολλές περιπτώσεις:

  • υποψίες για κρυφές μορφές ηπατίτιδας C ·
  • Η διάγνωση της PCR δεν επιβεβαιώθηκε από το παθογόνο, αλλά υπάρχουν αντισώματα.
  • σε περίπτωση ανάκτησης.
  • για τον εντοπισμό του πρώιμου σταδίου μόλυνσης.
Επιστροφή στα περιεχόμενα

Επεξήγηση της ανάλυσης

Η τελική απόφαση στη διάγνωση επηρεάζεται από την αποκωδικοποίηση PCR του HCV, ειδικότερα με την υπερμετρωπία. Το κύριο μειονέκτημα αυτής της έρευνας είναι η αυστηρή τήρηση των στείρων συνθηκών για το δείγμα και τα υλικά. Μια μικρή απόκλιση δείχνει μερικές φορές ανακριβή συμπεράσματα του αναλυτή, περιπλέκει τη διάγνωση και την επακόλουθη θεραπεία. Η ανάλυση της PCR για τον προσδιορισμό του RNA του ιού της ηπατίτιδας δεν δείχνει πάντα την εικόνα της νόσου με σιγουριά, μερικές φορές οι ανακρίβειες γίνονται δεκτές και με τους δύο τρόπους.

Διαγνωρίζοντας τον ιό της ηπατίτιδας, συνιστάται να κάνετε μια συνολική εξέταση.

Πρότυπο των δεικτών

Η απουσία αντισωμάτων JgM στο RNA σε ιική ηπατίτιδα C θεωρείται ο κανόνας στην ανάλυση της αλυσιδωτής αντίδρασης πολυμεράσης. Ταυτόχρονα, τα ευρήματα της ορολογικής ανάλυσης δείχνουν την παρουσία αντισωμάτων στον ιό C και αυτό είναι επίσης εντός των ορίων του κανόνα. Ο ποιοτικός ορισμός δεν δείχνει την ένταση της ασθένειας, αλλά αποκαλύπτει μόνο τον αιτιολογικό παράγοντα της ηπατίτιδας C στο RNA. Μια τέτοια ανάλυση επαναλαμβάνεται μετά τη θεραπεία για να επιβεβαιωθεί η πραγματική ανάκτηση.

Αποκλίσεις

Αν υπάρχουν αντισώματα JgM στο HCV RNA, αυτό δείχνει μια αναπτυσσόμενη μόλυνση. Η ασθένεια είναι οξεία ή χρόνια, εκδηλώνεται σε διαφορετικά στάδια. Εάν καταγραφεί μείωση του αριθμού των αντισωμάτων, η ανάλυση θα δείξει την επίτευξη των αποτελεσμάτων της θεραπείας κατά τη διάρκεια της ανάρρωσης. Υπάρχουν εξαιρετικά σπάνιες περιπτώσεις ψευδώς θετικών ευρημάτων στη διάγνωση. Βρίσκονται σε γυναίκες κατά τη διάρκεια της εγκυμοσύνης και σε άτομα με άλλες μολυσματικές ασθένειες.

Τι είναι το RNA του ιού της ηπατίτιδας C;

Η μελέτη του RNA του ιού της ηπατίτιδας C είναι η πιο σημαντική διαδικασία, η οποία επιτρέπει τον καθορισμό της διάρκειας και των μεθόδων θεραπείας των ασθενών με μεγάλη ακρίβεια. Η διάγνωση της νόσου αποτελείται από πολλές διαφορετικές εξετάσεις αίματος, όπως:

  • δείκτες ηπατίτιδας C (αντι-ΗΟν).
  • την ανίχνευση του RNA του ιού της ηπατίτιδας C (HCV RNA).

Η πρώτη μελέτη γίνεται με την πρώτη υποψία ηπατίτιδας. Η δεύτερη επιλογή είναι πιο σημαντική στη θεραπεία του HCV RNA, επομένως το εξετάστε λεπτομερέστερα.

Τι είναι η ιογενής ηπατίτιδα C;

Η ιογενής ηπατίτιδα C, ή HCV, είναι μολυσματική ασθένεια που επηρεάζει το ήπαρ. Η μόλυνση από τον ιό γίνεται μέσω του αίματος. Μπορείτε να μολυνθείτε με μια μετάγγιση αίματος, όταν δεν τηρούνται οι κανόνες αποστείρωσης ιατρικών οργάνων. Υπάρχουν λιγότερες περιπτώσεις όταν η ασθένεια επιτυγχάνεται σεξουαλικά ή από έγκυο μητέρα σε έμβρυο. Η ηπατίτιδα C είναι 2 τύπων.

Η χρόνια ηπατίτιδα C είναι η πιο επικίνδυνη. Είναι μια μορφή ασθένειας που μπορεί να διαρκέσει για μια ζωή. Αυτό οδηγεί σε σοβαρά προβλήματα στη λειτουργία του ήπατος, όπως η κίρρωση ή ο καρκίνος. Σε 70-90% των μολυσμένων ανθρώπων, η ασθένεια περνά σε ένα χρόνιο στάδιο.

Ο σημαντικότερος κίνδυνος της ηπατίτιδας C είναι ότι προχωράει κρυφά, χωρίς παρωχημένα σημάδια. Σε αυτή την περίπτωση, συχνά διαμαρτύρονται για πυρετό, ναυτία και έμετο, σωματική αδυναμία, αυξημένη κόπωση, απώλεια όρεξης και βάρος. Σε αυτή την περίπτωση, στο πλαίσιο μιας μικρής συμπίεσης των ιστών του ήπατος, ο κακοήθης εκφυλισμός συχνά λαμβάνει χώρα. Για το λόγο αυτό, η ιογενής ηπατίτιδα C ονομάζεται συχνά «ωρολογιακή βόμβα» ή «φονικός δολοφόνος».

Μια άλλη ιδιαιτερότητα της νόσου έγκειται στην πολύ αργή ανάπτυξή της, που εκτιμάται σε δεκάδες χρόνια.

Κατά κανόνα, τα μολυσμένα δεν αισθάνονται συμπτώματα και δεν υποπτεύονται την πραγματική τους κατάσταση. Συχνά, η ασθένεια μπορεί να εντοπιστεί μόνο όταν αναφέρεται σε γιατρό σε άλλο θέμα.

Η ομάδα κινδύνου περιλαμβάνει:

  • τα παιδιά που έλαβαν τον ιό της ηπατίτιδας C από τις μητέρες ·
  • οι τοξικομανείς ·
  • οι άνθρωποι που τρυπημένα μέρη του σώματος ή τα τατουάζ μη στείρα εργαλεία?
  • έλαβε αίμα ή όργανα δότη (μέχρι το 1992, όταν δεν πραγματοποιήθηκε αιμοκάθαρση) ·
  • άτομα που έχουν μολυνθεί από τον ιό HIV.
  • Ιατροί που έρχονται σε επαφή με μολυσμένους ασθενείς.

Προσδιορισμός RNA ηπατίτιδας C

Προσδιορισμός του RNA του ιού της ηπατίτιδας C, επίσης ονομάζεται ηπατίτιδα C PCR, αυτή τη μελέτη του βιολογικού υλικού (αίμα), με το οποίο μπορείτε να διαπιστώσετε στο σώμα από την άμεση διαθεσιμότητα των genomateriala ιού της ηπατίτιδας Β (οποιοδήποτε δεδομένο ιός είναι ένα ενιαίο σωματίδιο του RNA).

Η κύρια μέθοδος δοκιμής είναι η PCR, ή η μέθοδος αλυσιδωτής αντίδρασης πολυμεράσης.

Υπάρχουν δύο τύποι εξετάσεων αίματος για τον προσδιορισμό του HCV RNA:

Δοκιμή ποιότητας

Η διεξαγωγή ποιοτικής ανάλυσης καθιστά δυνατό τον προσδιορισμό του εάν ο ιός βρίσκεται στο αίμα. Όλοι οι ασθενείς που έχουν αντισώματα C-ηπατίτιδας πρέπει να υποβληθούν σε αυτή τη δοκιμασία. Με τα αποτελέσματά του, μπορείτε να πάρετε 2 απαντήσεις: "να υπάρχει" ή "να λείπει" ο ιός. Από το θετικό αποτέλεσμα της δοκιμής (βρέθηκε), είναι δυνατόν να κρίνουμε τον ενεργό πολλαπλασιασμό ενός ιού που μολύνει υγιή κύτταρα στο ήπαρ.

Η δοκιμή διεξάγεται για ένα ποιοτικό PCR συντονισμένοι σε μια συγκεκριμένη ευαισθησία των 10 έως 500 IU / ml. Εάν ανιχνευθεί στο αίμα του ιού της ηπατίτιδας Β στο συγκεκριμένο περιεχόμενο λιγότερο από 10 IU / ml, η ανίχνευση του ιού μπορεί να είναι αδύνατη. Μία πολύ χαμηλή τιμή του συγκεκριμένου περιεχομένου του ιού παρατηρείται σε ασθενείς για τους οποίους συνταγογραφείται αντιιική θεραπεία. Ως εκ τούτου, το σημαντικό γεγονός είναι πόσο υψηλή είναι η ευαισθησία των ιατρικών συστημάτων για τη διάγνωση και σταδιοποίηση υψηλής ποιότητας αποτελέσματα με την αλυσιδωτή αντίδραση πολυμεράσης.

Συχνά, η αλυσιδωτή αντίδραση πολυμεράσης της C-ηπατίτιδας διεξάγεται αμέσως μετά την ανεύρεση των αντιστοίχων αντισωμάτων. Οι επόμενες δοκιμές, όταν περνάει η αντιική θεραπεία, πραγματοποιούνται την 4η, 12η και 24η εβδομάδα. Και μια άλλη ανάλυση μετά τον τερματισμό του PVT γίνεται μετά από 24 εβδομάδες. Στη συνέχεια - μία φορά το χρόνο.

Ποσοτική δοκιμή

Η ποσοτική ανάλυση του PCR RNA, μερικές φορές αναφέρεται ως ιικό φορτίο, καθορίζει τη συγκέντρωση (συγκεκριμένη περιεκτικότητα) του ιού στο αίμα. Με άλλα λόγια, το ιικό φορτίο ορίζεται ως μια ορισμένη ποσότητα ιικού RNA, το οποίο μπορεί να είναι σε μια συγκεκριμένη ποσότητα αίματος (είναι συνηθισμένο να χρησιμοποιείται 1 ml, ίσο με 1 cm σε κύβο). Οι μονάδες για τα αποτελέσματα των δοκιμών είναι διεθνείς (τυποποιημένες) μονάδες, διαιρούμενες κατά ένα χιλιοστόλιτρο (IU / mL). Το περιεχόμενο του ιού μερικές φορές φαίνεται διαφορετικά, εξαρτάται από τα εργαστήρια όπου διεξάγεται η έρευνα. Για την ηπατίτιδα C, ο ποσοτικός προσδιορισμός μερικές φορές χρησιμοποιεί τιμές όπως τα αντίγραφα / ml.

Θα πρέπει να γίνει κατανοητό ότι δεν υπάρχει συγκεκριμένη εξάρτηση από τη σοβαρότητα της C-ηπατίτιδας στη συγκέντρωση αυτού του στελέχους στο αίμα.

Ο έλεγχος του "ιικού φορτίου" σας επιτρέπει να καθορίσετε το βαθμό μολυσματικότητας της νόσου. Έτσι, ο κίνδυνος προσβολής του ιού ενός άλλου ατόμου αυξάνεται με την αύξηση της συγκέντρωσης της ηπατίτιδας στο αίμα. Επιπλέον, η υψηλή περιεκτικότητα του ιού μειώνει την επίδραση της θεραπείας. Επομένως, ένα μικρό ιικό φορτίο είναι ένας πολύ ευνοϊκός παράγοντας για την επιτυχή θεραπεία.

Επιπλέον, η δοκιμή ηπατίτιδας C και ο προσδιορισμός της με PCR διαδραματίζουν σημαντικό ρόλο στην εφαρμογή της θεραπείας κατά της νόσου και στον προσδιορισμό της επιτυχίας της θεραπείας. Με βάση τα αποτελέσματα των δοκιμών, προγραμματίζεται το πρόγραμμα αποκατάστασης. Για παράδειγμα, με πολύ αργή μείωση της ειδικής συγκέντρωσης του ιού της ηπατίτιδας, η αντιιική θεραπεία παρατείνεται και αντίστροφα.

Στη σύγχρονη ιατρική πιστεύεται ότι το φορτίο είναι μεγαλύτερο από 800000 ME / ml είναι υψηλό. Το φορτίο υπερβαίνει τα 10000000 ME / ml θεωρείται κρίσιμο. Ωστόσο, εμπειρογνώμονες από διαφορετικές χώρες και μέχρι σήμερα δεν είχαν την ίδια άποψη σχετικά με τα όρια του ιικού φορτίου.

Η συχνότητα της ποσοτικής δοκιμής

Γενικά, η ποσοτική ανάλυση για την ηπατίτιδα γίνεται πριν από την αντιική θεραπεία και 3 μήνες μετά το πέρας των θεραπευτικών διαδικασιών για τον προσδιορισμό της ποιότητας της θεραπείας.

Ως αποτέλεσμα της ποσοτικής δοκιμής θα θεωρηθεί ποσοτική αξιολόγηση των αποτελεσμάτων του δείγματος που προσδιορίστηκε παραπάνω. Ως αποτέλεσμα, μια ετυμηγορία "κάτω από τη μετρούμενη περιοχή" ή "στο αίμα δεν θα ανιχνευθεί" θα αποδίδεται.

Η παράμετρος ευαισθησίας της ποιοτικής δοκιμής είναι συνήθως χαμηλότερη από την ευαισθησία της ποσοτικής ανάλυσης. Η μεταγραφή "Missing" υποδεικνύει ότι και οι δύο τύποι αναλύσεων δεν βρήκαν το RNA του ιού. Με τη δοκιμή "κάτω από τη μετρούμενη περιοχή", η ποσοτική ανάλυση πιθανότατα δεν βρήκε ηπατίτιδα RNA, αν και αυτό επιβεβαιώνει την παρουσία ενός ιού με πολύ μικρό συγκεκριμένο περιεχόμενο.

Ηπατίτιδα C και οι γονότυποί της

Η γονοτύπηση του RNA του ιού της ηπατίτιδας C διαγνώσει την παρουσία διαφορετικών γενετικών τύπων ηπατίτιδας C. Science ξέρει περισσότερα από 10 είδη του γονιδιώματος του ιού, αλλά για την ιατρική πρακτική επαρκώς διακρίνει αρκετές γονότυποι που έχει το μεγαλύτερο μερίδιο της περιοχής. Ο προσδιορισμός του γενετικού τύπου διαδραματίζει βασικό ρόλο στην επιλογή του χρονικού διαστήματος της θεραπείας, κάτι που είναι πολύ σημαντικό αν ληφθεί υπόψη το ευρύ φάσμα παρενεργειών των φαρμάκων κατά της ηπατίτιδας.

Μέθοδοι θεραπείας της ιογενούς ηπατίτιδας C

Ο μόνος αποτελεσματικός τρόπος θεραπείας του ιού της ηπατίτιδας είναι κατά κανόνα ένας συνδυασμός 2 φαρμάκων: ιντερφερόνης-άλφα μαζί με ριμπαβιρίνη. Ξεχωριστά, αυτά τα φάρμακα δεν είναι τόσο αποτελεσματικά. Η συνιστώμενη δόση φαρμάκων και ο χρόνος εφαρμογής πρέπει να συνταγογραφούνται μόνο από τον γιατρό και μεμονωμένα σε κάθε ασθενή. Η θεραπεία με αυτά τα φάρμακα μπορεί να διαρκέσει από 6 έως 12 μήνες.

Σήμερα, δεν έχουν εφευρεθεί φάρμακα που εγγυώνται 100% ανάκτηση από τον ιό. Ωστόσο, με σωστά επιλεγμένη θεραπεία, η επούλωση των ασθενών μπορεί να φτάσει μέχρι και το 90% του αριθμού των περιπτώσεων.

Διάγνωση του ιού της ηπατίτιδας C

Ο ιός της ηπατίτιδας C (HCV) είναι ένας ιός που περιέχει RNA από την οικογένεια Flaviviridae. Αυτή η μόλυνση είναι σε θέση να πολλαπλασιάζεται στα κύτταρα του αίματος (μονοκύτταρα, ουδετερόφιλα, λεμφοκύτταρα Β και μακροφάγα) και επηρεάζουν επίσης το ίδιο το συκώτι κύτταρα - ηπατοκύτταρα. Λόγω του υψηλού βαθμού δραστηριότητας μετάλλαξης, αυτός ο τύπος ηπατίτιδας είναι σε θέση να αποφύγει την επίδραση του ανθρώπινου ανοσοποιητικού συστήματος.

Υπάρχουν 11 γονότυποι και μια μάζα υποτύπων ενός τέτοιου ιού που διαφέρουν ως προς τον βαθμό της ηπατικής βλάβης και επηρεάζουν τον χρόνο της θεραπείας της ηπατίτιδας. Μια τέτοια ποικιλία ηπατίτιδας C απαιτεί διαφορετικές μεθόδους αντιιικής θεραπείας. Για παράδειγμα, η ηπατίτιδα 1 st και 4 ου γονότυποι θα πρέπει να αντιμετωπίζονται για 48 εβδομάδες, και για μια πορεία της θεραπείας κατά του ιού του 2ου και 3ου ειδών μπορεί να απαιτείται μόνο 24 εβδομάδες.

Μετά την ταχεία δοκιμή για την ηπατίτιδα C έδωσε ένα θετικό αποτέλεσμα, πραγματοποιείται ανάλυση PCR για τον προσδιορισμό του RNA του ιού σε δείγματα αίματος.

Διαγνωστικά PCR

Η αλυσιδωτή αντίδραση πολυμεράσης (PCR) είναι μια πειραματική τεχνική για την ανίχνευση ιών. Μια τέτοια ανάλυση για την ηπατίτιδα C επιτρέπει μια σημαντική αύξηση της συγκέντρωσης ορισμένων θραυσμάτων του ιού DNA ή RNA στα υποβληθέντα δείγματα. Αυτό καθιστά δυνατή την αναγνώρισή τους και ακόμη και τον αριθμό.

Αυτή η δοκιμή για την ηπατίτιδα C πραγματοποιείται σύμφωνα με την ακόλουθη διαδικασία:

  1. Ένα δείγμα αίματος (γενετικό υλικό), το οποίο μπορεί να περιέχει το επιθυμητό γονίδιο ηπατίτιδας, εισάγεται σε δοκιμαστικό σωλήνα. Στη θέση της ειδικές ουσίες - αστάρια, είναι τμήματα μικρού μήκους από το επιθυμητό γονίδιο, τα οποία συντίθενται χημικά. Σε αυτό το δοχείο προστίθεται επίσης πολυμεράση ϋΝΑ ή RNA, είναι ικανή να δημιουργήσει αλυσίδες νουκλεϊκού οξέος, εντελώς ταυτόσημες με τις αρχικές. Σε αυτή τη σύνθεση προστίθεται και η επιλογή των ελεύθερων νουκλεοτιδίων είναι διακριτές δομικές μονάδες του DNA και RNA, ένα από τα οποία περιέχει τα λεπτότερα σωματίδια από το ραδιενεργό φώσφορο.
  2. Το προκύπτον μίγμα αρχικά θερμαίνεται στους 95 βαθμούς, λόγω του οποίου παρεμβάλλονται στην κανονική κατάσταση, και οι δύο έλικες ϋΝΑ εξασθενούν λόγω αυτής της επίδρασης.
  3. Για να συνεχίσετε την ανάλυση του παρασκευάσματος ψύχεται, στο οποίο σημείο οι εκκινητές συνδέεται με ένα επιθυμητό τμήμα του γονιδιώματος του ιού της ηπατίτιδας C, μη επιτρέποντας το DNA για να σχηματίσουν ένα διπλό έλικα. Όταν το μίγμα ψυχθεί, η πολυμεράση αναζητά μονές έλικες νουκλεοτιδίων. Κατά τη διάρκεια προσάρτηση του ενζύμου ολισθαίνει επί του κλώνου του DNA (όπως μια μονάδα από ένα καλώδιο), ενώ η διπλή έλικα δεν είναι σε θέση να «εργασία», και αυτή η απεικόνιση πραγματοποιείται μίγμα.
  4. Για να παραταθεί η ανάλυση, πραγματοποιείται επαναθέρμανση, η οποία οδηγεί και πάλι στον διαχωρισμό των νουκλεοτιδικών αλυσίδων. Κατά την εκτέλεση τέτοιων PCR κύκλων στο δείγμα, ο αριθμός των γονιδίων της ηπατίτιδας επιζητούσε αύξηση της γεωμετρικής αναλογίας και τα υπόλοιπα γενετικά υλικά παράγονται (σχηματίζονται) μόνο σε γραμμική κανονικότητα.
  5. Για να ολοκληρωθεί η μελέτη, το διάλυμα καθαρίζεται από υπολειμματικά σωματίδια νουκλεοτιδίων. Διαχωρίζονται με ηλεκτροφόρηση, με τον διαχωρισμό μοριακών αλυσίδων DNA από τις παραμέτρους του μοριακού βάρους. Τέτοιες δοκιμές για ηπατίτιδα με τη βοήθεια PCR επιτρέπουν να προσδιοριστεί αν τα επιθυμητά γονίδια του ιού υπάρχουν στο δείγμα ή όχι.

Το πλεονέκτημα αυτής της δοκιμής είναι το πολύ υψηλό όριο ευαισθησίας της αντίδρασης PCR. Μια τέτοια τεχνική για τη διεξαγωγή διαγνωστικών, ιδανικά, απαιτεί μόνο ένα γονιδίωμα του ιού για ολόκληρο το δείγμα.

Επιπλέον, αυτή η PCR είναι εντελώς ειδική. Σε κάθε ένα από τα γονίδια υπάρχει μια μοναδική αλληλουχία νουκλεοτιδίων, η οποία, όπως ένα δακτυλικό αποτύπωμα, δεν μπορεί να επαναληφθεί οπουδήποτε. Για αυτή την ανάλυση ηπατίτιδας C, τα εναρκτήρια μόρια συντίθενται με τέτοιο τρόπο ώστε να αντιστοιχούν απολύτως στα μοναδικά τμήματα των επιθυμητών γονιδίων που δεν έχει άλλη αλληλουχία.

Αυτή η τεχνική καθιστά επίσης δυνατή την ανάλυση και τον προσδιορισμό της ηπατίτιδας στο c, συμβάλλοντας στην καθιέρωση μιας οριστικής διάγνωσης.

Μια τέτοια εργαστηριακή ανάλυση επιτρέπει τη λήψη πληροφοριών περισσότερο από την παρουσία ή απουσία HCV RNA ή άλλου τύπου σε δείγματα αίματος. Καθορίζοντας την παράμετρο της ραδιενεργού ακτινοβολίας, υπάρχει επίσης η ευκαιρία να αποκαλυφθεί πόσο αρχικά βρέθηκε το επιθυμητό γενετικό υλικό στο υπό μελέτη δείγμα. Αυτό μας επιτρέπει να προσδιορίσουμε την παράμετρο του λεγόμενου ιικού φορτίου - τη συγκέντρωση σωματιδίων RNA ηπατίτιδας σε έναν ορισμένο όγκο.

Ποιοτική ανάλυση PCR

Η ανάλυση αυτή επιτρέπει τον προσδιορισμό της παρουσίας του ιού της ηπατίτιδας σε δείγματα αίματος. Πρέπει να γίνει για όλους τους ανθρώπους που έχουν βρεθεί ότι έχουν αντισώματα στην ηπατίτιδα.

Ως αποτέλεσμα μιας τέτοιας μελέτης μπορεί να υπάρχουν μόνο δύο τιμές:

  • "Ανακαλύφθηκε." Ένα τέτοιο θετικό αποτέλεσμα εξέτασης ερμηνεύεται ως εξής: τα θραύσματα του RNA του ιού της ηπατίτιδας βρέθηκαν στο αναλυθέν δείγμα από βιολογικό υλικό. Από αυτό προκύπτει ότι υπήρξε ένα γεγονός μόλυνσης του ασθενούς με αυτόν τον ιό. Αυτό μπορεί να υποδεικνύει ότι ο αιτιολογικός παράγοντας της ηπατίτιδας πολλαπλασιάζεται στο σώμα και μολύνει νέα κύτταρα, καταστρέφοντας το συκώτι.
  • Msgstr "Δεν εντοπίστηκε". Αυτό το αποτέλεσμα υποδεικνύει ότι στο δείγμα, το οποίο αναλύεται στο εργαστήριο, βρέθηκαν θραύσματα του RNA, το οποίο είναι ειδικό για τον ιό της ηπατίτιδας C Υπάρχει επίσης μια πιθανότητα ότι η συγκέντρωση του RNA ιού-παθογόνου στο δείγμα ήταν τόσο μικρή ώστε η δοκιμή δεν ήταν σε θέση να προσδιορίσει. Σε τέτοιες περιπτώσεις, λέγεται ότι το επίπεδο συγκέντρωσης είναι κάτω από το όριο ευαισθησίας της ανάλυσης.

Ένα τέτοιο τεστ μπορεί επίσης να είναι μια ψευδώς θετικά ή ψευδή αρνητικά λόγω της μόλυνσης του βιολογικού υλικού ή της παρουσίας συγκεκριμένων ουσιών σε δείγματα, που αντιδρούν με τα χημικά συστατικά απαραίτητα για την ανάλυση.

Πρέπει να τονιστεί ότι στις οξείες φάσεις της ηπατίτιδας C μια ποιοτική μελέτη που χρησιμοποιεί τη μέθοδο PCR μπορεί να ανιχνεύσει το RNA μετά από μόλις 1-2 εβδομάδες από τη στιγμή της μόλυνσης του σώματος. Αυτό σημαίνει ότι η ασθένεια μπορεί να εντοπιστεί πολύ πριν από την εμφάνιση των εξωτερικών συμπτωμάτων της ή την εμφάνιση αντισωμάτων στην ηπατίτιδα στο σώμα.

Η δειγματοληψία αίματος (από τη φλέβα) εκτελείται κατά προτίμηση με άδειο στομάχι.

Ποσοτική ανάλυση της PCR

Με τη βοήθεια αυτής της ανάλυσης, καθορίστε το επίπεδο συγκέντρωσης του ιού της ηπατίτιδας στον ασθενή (ιικό φορτίο). Μια τέτοια δοκιμή πρέπει να υποβληθεί για να εκτιμηθεί η ποσότητα του RNA του ιού σε μια μονάδα ορισμένου όγκου.

Η ανάλυση των δοκιμών για ηπατίτιδα c, που διεξάγεται χρησιμοποιώντας αυτή την τεχνική, μπορεί να έχει τα ακόλουθα αποτελέσματα:

  • Ποσοτικός δείκτης (σε αριθμούς)

Η συγκέντρωση του ιού (αριθμός) δίδεται σε αριθμητικούς όρους. Για να γίνει αυτό, χρησιμοποιούνται διαφορετικές μονάδες: είτε ME / ml (διεθνής μονάδα ανά χιλιοστόλιτρο) ή αντίγραφα / ml (ο αριθμός αντιγράφων του ιού RNA σε χιλιοστόλιτρα). Κατά μέσο όρο, 1 IU / mL αντιστοιχεί σε 4 αντίγραφα / ml, επειδή διαφορετικά συστήματα δοκιμής έχουν διαφορετικούς συντελεστές μετατροπής για αυτές τις μονάδες.

Το χαμηλό ιικό φορτίο θεωρείται ότι είναι μικρότερο από 400.000 IU / ml για αυτή τη δοκιμασία και το υψηλό είναι 8000000 IU / ml.

Αυτή η ποσοτική εκτίμηση επιτρέπει να προσδιοριστεί το επίπεδο μολυσματικότητας της νόσου («μολυσματικότητα») του ασθενούς. Όσο περισσότερο αυτός ο δείκτης ανάλυσης, τόσο μεγαλύτερος είναι ο κίνδυνος μετάδοσης του παθογόνου παράγοντα σε άλλους ανθρώπους (με σεξουαλική επαφή ή κάθετη διαδρομή).

Αυτή η ετυμηγορία σημαίνει ότι η ποσοτική μέθοδος δεν μπόρεσε να ανιχνεύσει RNA ηπατίτιδας, αλλά ο ίδιος ο ιός υπάρχει στο σώμα, μόνο σε πολύ χαμηλή συγκέντρωση. Αυτό επιβεβαιώθηκε με τη διεξαγωγή πρόσθετης ποιοτικής ανάλυσης της PCR και το θετικό αποτέλεσμα του δείχνει την παρουσία ηπατίτιδας.

  • Αποτέλεσμα "Δεν ανιχνεύθηκε"

    Αυτή η θετική ερμηνεία της ανάλυσης δείχνει ότι η ίδια η ποσοτική δοκιμή στο δείγμα αίματος δεν μπορούσε να ανιχνεύσει συγκεκριμένα σωματίδια RNA του ιού της ηπατίτιδας C.

  • Ποσοτική ανάλυση PCR διεξάγεται σε διάφορα στάδια της αντι-ιική θεραπεία (1η, 4η, 12η και 24η εβδομάδες) δίνει μια ένδειξη της αποτελεσματικότητας της θεραπείας και για να κάνει τις απαραίτητες διορθώσεις.

    Ειδικότητα της ανάλυσης

    Αυτή η δοκιμασία πρέπει να υποβληθεί για τον προσδιορισμό των διαφορετικών γενότυπων της ηπατίτιδας C. Επί του παρόντος, 11 γονότυποι αυτού του παθογόνου είναι γνωστοί και πολλοί υποτύποι. Οι γονοτύποι της ηπατίτιδας C του 1ου, 2ου και 3ου είδους είναι συνηθισμένοι στη χώρα μας. Στα εργαστήρια μπορούν να εντοπιστούν διάφοροι υποτύποι αυτών των ειδών: 1α, 1γ, 2α, 2γ ή 3, 4, 5, 6 γονότυποι με διάφορες τροποποιήσεις υποτύπων. Για όλη αυτή την ηπατίτιδα, η εξειδίκευση της ανίχνευσης είναι 100%.

    Η διευκρίνιση της τροποποίησης του γονότυπου καθιστά δυνατή την επιλογή κατάλληλης θεραπείας. Η παρουσία ενός συγκεκριμένου τύπου γονότυπου στον ασθενή δεν δείχνει ότι η νόσος είναι ευκολότερη ή πιο δύσκολη, είναι μόνο οι ποικιλίες του ιού της ηπατίτιδας και όχι περισσότερο.

    Στις περιπτώσεις που το εργαστήριο δεν μπορεί να απομονώσει τον γονότυπο του ιού, μπορεί να εκδοθεί ένα αποτέλεσμα: "Δεν πληκτρολογείται. Οι γονότυποι μελετήθηκαν: τέτοιες και τέτοιες (για παράδειγμα, 1a, 2b, 3av). Αυτό το αντίγραφο δείχνει ότι δεν υπήρχαν αντίστοιχα αντιδραστήρια σε αυτό το εργαστήριο που θα μπορούσαν να καθορίσουν τον γονότυπο του ιού της ηπατίτιδας. Στη μελέτη, έγινε έλεγχος για τους ιούς που δίνονται στον κατάλογο, αλλά δεν ανιχνεύθηκε η αντιστοιχία τους με δείγματα RNA.

    Για να γίνει μια τελική διάγνωση, μόνο ένα είδος ανάλυσης είναι ανεπαρκές. Κάθε μία από τις δοκιμές μπορεί να δώσει ένα ψευδώς θετικό αποτέλεσμα. Μια πολύπλοκη μελέτη γίνεται για να προσδιοριστεί ο ακριβής τύπος ηπατίτιδας και ο βαθμός μόλυνσης με αυτή τη λοίμωξη του σώματος. Ταυτόχρονα, γίνεται η βιοψία ήπατος και η εξέταση των ενζύμων του: ALAT, ASAT, καθώς και αλκαλική φωσφατάση και LDH. Μπορεί επίσης να πραγματοποιηθεί μια εξέταση χολερυθρίνης και ανάλυση δείκτη προθρομβίνης.

    Μόνο ένα σύνολο τέτοιων δοκιμών και εργαστηριακών εξετάσεων, με μια γενική ανάλυση της κατάστασης του ασθενούς, θα βοηθήσει στον προσδιορισμό της παρουσίας ηπατίτιδας στο σώμα, του σχήματος και του βαθμού σοβαρότητας. Στη βάση τους, ο γιατρός μπορεί να καθορίσει την περαιτέρω θεραπεία και να προβεί σε πιθανή πρόγνωση για τον ασθενή.

    Ηπατίτιδα RNA με ποσοτικό πρότυπο

    Ο ιός της ηπατίτιδας C είναι ικανός να αναπαράγεται στα κύτταρα του αίματος και να προκαλεί λεμφοϋπερπλαστικές ασθένειες. Χάρη στις πολλαπλές μεταλλάξεις, οι ανοσοποιητικές άμυνες του οργανισμού εξασθενούν, εμφανίζονται οι γονότυποι και οι υποτύποι του ιού. Με τη σωστή και έγκαιρη αναγνώριση ενός συγκεκριμένου τύπου εξαρτάται από την αποτελεσματικότητα της αντιιικής θεραπείας. Ο κίνδυνος μόλυνσης είναι ότι η ασθένεια είναι ασυμπτωματική. Συνολικά, το 15% των 100 μπορεί να παρουσιάσουν ναυτία και έμετο, απώλεια βάρους και πυρετό.

    Ορισμός του ιού της ηπατίτιδας C

    Ο πρότυπος κανόνας της ηπατίτιδας C είναι τα μεγέθη από 40 έως 60 nm, με την πλειονότητα των λιπιδίων, ηπατική βλάβη ως αποτέλεσμα της οξείας ή χρόνιας πορείας της νόσου. Η ηπατίτιδα C, δηλαδή ο ιός RNA της οικογένειας Togaviridae, είναι εξαιρετικά ανθεκτικός, μεταδίδεται με μετάγγιση αίματος ή τη χρήση μη αποστειρωμένων αντικειμένων, ακατάλληλη υγιεινή των αξεσουάρ μπάνιου, Η ποσοτική ανάλυση σας επιτρέπει να εξετάσετε το αίμα και να προσδιορίσετε τη γενετική δομή του μολυσμένου ιού.

    Για την εκτίμηση της ηπατίτιδας C και των γενότυπων της, πραγματοποιείται ποσοτική ανάλυση. Ανάλογα με τον αναλυτή, μπορούν να προσδιοριστούν τρία επίπεδα επίπτωσης του ιού RNA.

    Οι υποτύποι μπορούν να παράγουν διάφορες τροποποιήσεις, οπότε η ειδικότητα και η ευαισθησία του αναλυτή πρέπει να είναι εκατό τοις εκατό. Εκτός από την ανίχνευση μιας νόσου σε έναν ασθενή, είναι απαραίτητο να προσδιοριστεί ο βαθμός της σοβαρότητάς του. Ορισμένα εργαστήρια δεν διαθέτουν όλα τα δεδομένα σχετικά με τους ορισμούς του ιού RNA, υπάρχει η πιθανότητα μιας ψευδώς θετικής αντίδρασης.

    Η μελέτη για την ηπατίτιδα C θα είναι πιο ακριβής κατά τη μελέτη τέτοιων δεικτών:

    ALAT, ASAT. ЩФ; LDH.

    Δίνοντας έμφαση στα αποτελέσματα αυτών των δεικτών και στη γενική κατάσταση του σώματος, εμφανίζεται ένα αποτέλεσμα που δείχνει το βαθμό μόλυνσης, τη μορφή και τον αριθμό των κυττάρων ηπατίτιδας C στο αίμα. Αυτό συμβάλλει στη διαδικασία επούλωσης και στην αποτελεσματικότητα της αντιιικής θεραπείας.

    Τύποι ανάλυσης για την ηπατίτιδα C

    Η αντίδραση πολυδιάστατης αλύσου (PCR) δίνει μια ιδέα για την ποσότητα σωματιδίων DNA στις αναλύσεις του ασθενούς και προσδιορίζει σωστά τον αιτιολογικό παράγοντα της λοίμωξης.

    Οι μολυσματικοί παράγοντες μπορούν να εκδηλωθούν. Μια τέτοια μολυσματική νόσος του ήπατος, όπως η ηπατίτιδα C, είναι σήμερα θεραπεύσιμη όταν ανιχνεύεται εγκαίρως. Εάν υπάρχει υποψία για ιό, η ανάλυση PCR γίνεται.

    Ενώ τα συμπτώματα του ιού μπορεί να καλυφθούν για μεγάλο χρονικό διάστημα, ένα άτομο μπορεί να μην αισθάνεται την εμφάνιση της πορείας της νόσου. Αλλά με προσεκτική εξέταση στο 60-70% των περιπτώσεων, η ηπατίτιδα C ανιχνεύεται, μια πρωταρχική ανάλυση στην οποία είναι η ELISA, ακολουθεί η διάγνωση PCR. Η ανάλυση πραγματοποιείται σε ορισμένες περιόδους για να προσδιοριστεί το στάδιο της ασθένειας και να συνταγογραφηθεί η κατάλληλη θεραπεία. Κάνετε χωρίς αυτό, χωρίς να εφαρμόσετε όλες αυτές τις διαδικασίες, μπορείτε να εμβολιάσετε από ηπατίτιδα.

    Η ανάλυση, συμπεριλαμβανομένης της διάγνωσης PCR, παρέχει μια εικόνα της ασθένειας, πόσο δραστική είναι ο ιός σε διαφορετικές περιόδους ανάπτυξης.

    Πρώτα έρχεται μια ποιοτική ανάλυση, η οποία επιβεβαιώνει μόνο την υπόθεση για τη μόλυνση, και στη συνέχεια μια ποσοτική, καθορίζοντας το φορτίο στο ήπαρ. Η ιδανική επιλογή είναι ένα αρνητικό αποτέλεσμα για την ηπατίτιδα C στο γενετικό υλικό του ασθενούς.

    Ποιοτική και ποσοτική ανάλυση

    Υπάρχουν ποιοτικές και ποσοτικές αναλύσεις. Η ουσία του πρώτου είναι ότι καθορίζει την παρουσία λοίμωξης στο αίμα. Και αυτό σημαίνει ότι ο ιός επηρεάζει υγιή ηπατικά κύτταρα. Όταν ένας ασθενής έχει αντισώματα έναντι της ηπατίτιδας C, πραγματοποιείται αμέσως ποιοτική δοκιμή. Ο κανόνας που πρέπει να παράγει το αποτέλεσμα είναι "δεν ανιχνεύεται στο αίμα". Κατά τον προσδιορισμό της συγκέντρωσης του ιού, υπάρχει ανάγκη γνώσης της ευαισθησίας του διαγνωστικού συστήματος, καθώς η ανάλυση μπορεί να γίνει από άτομα που υποβάλλονται σε αντιιική θεραπεία. Η ευαισθησία του αναλυτή δεν πρέπει να είναι μικρότερη από 50 IU / ml.

    Όταν ανιχνεύεται ένας ιός, γίνεται ποσοτική ανάλυση, με άλλα λόγια ένα ιικό φορτίο που καθορίζει τη συγκέντρωση του ιού στο αίμα και τη σοβαρότητα της νόσου.

    Το ιογενές RNA, το οποίο είναι σε μια ορισμένη ποσότητα αίματος, ορίζεται ως ο κανόνας με ρυθμό 1 ml ανά 1 κυβικό εκατοστό. Μετά την ποσοτικοποίηση του ιικού φορτίου, είναι δυνατόν να κρίνουμε τον βαθμό μόλυνσης του μη μολυσμένου περιβάλλοντος. Μόλις η συγκέντρωση της ηπατίτιδας C αυξηθεί στο αίμα, το περιβάλλον πρέπει να απομονωθεί.

    Είναι σημαντικό στα πρώτα στάδια να ανιχνευθεί ο βαθμός συγκέντρωσης της ηπατίτιδας προκειμένου να καθοριστεί ο ρυθμός αποκατάστασης. Εάν η συχνότητα της ηπατίτιδας C υπερβεί κατά περισσότερο από 800 χιλιάδες IU / ml, θεωρείται υπερβολικά υψηλή, με αύξηση σε ένα εκατομμύριο - κρίσιμη. Εάν η ποσοτική περιοχή είναι μικρότερη από 400 χιλιάδες IU / ml, θεωρείται ότι η μόλυνση των άλλων θα συμβεί με λιγότερες πιθανότητες. Αυτός ο αριθμός καθιστά σαφές ότι η ηπατίτιδα C στο σώμα είναι παρούσα σε πολύ μικρές δόσεις. Η ανάλυση δεν μπόρεσε να προσδιορίσει την ποσοτική τιμή του RNA των σωματιδίων του ιού, έτσι επανατοποθετείται αρκετές φορές για την ακρίβεια της διάγνωσης.

    Αποτελέσματα ποσοτικής ανάλυσης

    Το καθήκον του προσδιορισμού της ποσότητας του ιικού φορτίου στο αίμα του ασθενούς είναι να προσδιοριστεί η έκταση της λοίμωξης για τους άλλους.

    Ανάλυση για την ηπατίτιδα C

    επιτρέπει να αξιολογηθεί η αποτελεσματικότητα της αντιιικής θεραπείας, το επίπεδο μολυσματικότητας και ο αριθμός των μολυσμένων ιστών.

    Είναι σημαντικό να μην επιτρέπεται η πρόοδος της νόσου, να λαμβάνουν έγκαιρα προληπτικά μέτρα, να συνταγογραφούν τη σωστή θεραπεία με βάση τη διάγνωση της PCR. Εάν, σύμφωνα με τα αποτελέσματα, το επίπεδο ιικού φορτίου είναι μικρότερο από 400 χιλιάδες IU / ml, τότε η συγκέντρωση μπορεί να είναι ελάχιστη, πράγμα που υποδηλώνει πιθανή πλήρη ανάκτηση. Ο κανόνας για ένα θετικό αποτέλεσμα είναι η απουσία μόλυνσης.

    Αποτελέσματα ανάλυσης PCR:

    Μια θετική απάντηση σημαίνει ότι υπάρχει μια μόλυνση στο βιολογικό υλικό. Η ανάλυση σας επιτρέπει να προσδιορίσετε τον ακριβή αριθμό των μολυσμένων κυττάρων. Μια αρνητική απάντηση δείχνει την απουσία μόλυνσης, η οποία αναζητήθηκε προσεκτικά στο σώμα.

    Η ποσοτική μέθοδος για την ηπατίτιδα C είναι ακριβής και ενημερωτική, διεξάγεται σε εξοπλισμό με υψηλή ευαισθησία. Η αποκρυπτογράφηση των αποτελεσμάτων της ανάλυσης σας επιτρέπει να γνωρίζετε αν υπάρχει μόλυνση και η ειδικότητά της, για να δείτε τον μικρότερο αριθμό μολυσμένων κυττάρων σε αναλυτές υψηλής ευαισθησίας.

    Τα ψευδώς θετικά ή αντίθετα αποτελέσματα της ανάλυσης σπάνια δίνουν, συχνότερα συμβαίνει σε μελέτες ανοσοδοκιμασίας.

    Πρόσφατα, στις μηχανές αναζήτησης των πόρων Διαδικτύου, το ερώτημα "ποσοτική ανάλυση για την ηπατίτιδα με αποκωδικοποίηση" εμφανίζεται όλο και περισσότερο.

    Πράγματι, ο ιός της ηπατίτιδας είναι κοινός και επικίνδυνος, η νόσος επηρεάζει το ήπαρ. Το όνομά της ήρθε από το lat. ηπατίτιδα - φλεγμονή του ήπατος. Η μόλυνση εμφανίζεται μέσω του αίματος ή μέσω σεξουαλικής επαφής, οι ενήλικες είναι πιο πιθανό να αρρωσταίνουν σε ηλικία 25 έως 50 ετών.

    Υπάρχουν διάφοροι τύποι αυτής της ασθένειας. Η ηπατίτιδα C δεν έχει έντονη έκφραση, αλλά σε 40-70% των περιπτώσεων περνάει σε μια χρόνια μορφή, μπορεί να προκαλέσει κίρρωση του ήπατος και καρκίνο. Αυτή η ασθένεια απαιτεί ακριβή διάγνωση και ερμηνεία των αποκτηθέντων δεδομένων, για τα οποία αναπτύσσονται οι μέθοδοι. Το ένα είναι ανάλυση RNA του HCV RNA με PCR.

    Ανάλυση RNA του HCV RNA με PCR

    Το RNA (ριβονουκλεϊνικό οξύ) είναι ένα είδος μακρομορίου, ένα από τα συστατικά ενός ζωντανού κυττάρου. Το RNA είναι υπεύθυνο για την κωδικοποίηση των γενετικών πληροφοριών. Ο ιός της ηπατίτιδας C περιέχει ένα μόριο RNA και έχει τη συνήθεια να μεταλλάσσεται. Υπάρχουν έξι από τους υποτύπους της, καθώς και πολλοί υποτύποι.

    Η ασθένεια στο χρόνιο της στάδιο οδηγεί σε ίνωση του ήπατος - οι συνδετικοί ιστοί μεγαλώνουν, η δομή του οργάνου σταδιακά σπάει. Η ίνωση μπορεί να υποβληθεί σε έγκαιρη θεραπεία, καθώς το ήπαρ δεν έχει υποστεί ακόμα καταστροφικές διεργασίες. Σε αντίθεση με την κίρρωση, μια σοβαρή μη αναστρέψιμη ασθένεια του ήπατος, στην οποία η ίνωση μπορεί να αναπτυχθεί χωρίς την έγκαιρη λήψη των απαραίτητων μέτρων.

    Ένα άτομο με υποψία ότι έχει ιό ηπατίτιδας προσδιορίζει αντισώματα σε αυτό. Εάν δεν υπάρχουν - η ασθένεια αποκλείεται, στην παρουσία τους καταφεύγουν σε μια μέθοδο PTSR (αλυσιδωτή αντίδραση polimeraznoj). Στη μοριακή βιολογία, είναι πειραματικό, αλλά διαδραματίζει ηγετικό ρόλο στις μεθόδους διάγνωσης μολυσματικών ασθενειών. Με τη βοήθεια αυτού, μπορεί να αυξηθεί σημαντικά η συγκέντρωση θραυσμάτων μορίων στο δείγμα. 10 ημέρες μετά τη μόλυνση, το RNA είναι ήδη δυνατό να ανιχνευθεί στο αίμα.

    Αυτή η μέθοδος είναι η μόνη που επιτρέπει την ταυτοποίηση της νόσου στα αρχικά στάδια. Με άλλους τρόπους (π.χ. βιοχημική εξέταση αίματος) αυτό δεν μπορεί να γίνει, δεδομένου ότι το ήπαρ δεν έχει επηρεαστεί ακόμη.

    Οι αναλύσεις για την ηπατίτιδα C με αποκωδικοποίηση (PCR) αποτελούν αξιόπιστο δείκτη της παρουσίας του ιού στο αίμα ενός ατόμου.

    Η μέθοδος ανακαλύφθηκε το 1993 από τον βιοχημικό Carrie Mullis, για τον οποίο έλαβε το βραβείο Νόμπελ. Η PCR ήταν μια σημαντική ανακάλυψη στην ιατρική και την επιστήμη, καθώς επέτρεψε την ταχεία και ακριβή αναγνώριση των λοιμώξεων στο αίμα και σε άλλα βιολογικά υλικά ενός ατόμου. Με άλλα λόγια, η μέθοδος επιτάχυνε την ανάπτυξη της διάγνωσης των μολυσματικών ασθενειών.

    Η ανάλυση RNA του HCV RNA με PCR είναι αποτελεσματική για τους ακόλουθους λόγους:

    Έχει καλή ευαισθησία - ανιχνεύεται ακόμη και μια μικρή ποσότητα του ιού στο αίμα. ο ίδιος ο ιός καθορίζεται και όχι τα παραπροϊόντα που δημιουργούνται από αυτόν. προσδιορίζεται ο τύπος του παθογόνου παράγοντα.

    Διαφορές στην ποσοτική ανάλυση του HCV RNA από ποιοτικό

    Η μέθοδος PCR περιλαμβάνει δύο βασικές μεθόδους για τη μελέτη βιολογικού υλικού για την αναζήτηση του ιού της ηπατίτιδας C:

    Αυτές οι μελέτες έχουν διαφορετικά καθήκοντα.

    Η ποιοτική ανάλυση για την ηπατίτιδα με αποκωδικοποίηση επιβεβαιώνει την παρουσία του ιού μετά την ανεύρεση των αντισωμάτων της νόσου στο αίμα. Εάν η μελέτη έδωσε ένα θετικό αποτέλεσμα, τότε η ασθένεια βρέθηκε. Με άλλα λόγια, ένα άτομο είναι μολυσμένο. Αν προκύψει αρνητικό αποτέλεσμα, αυτό σημαίνει ότι το άτομο δεν έχει μολυνθεί ή υπάρχει πολύ μικρή συγκέντρωση του ιού. Αυτή η συγκέντρωση δεν ανιχνεύεται με αυτόν τον τρόπο.

    Επιπλέον, η κλινική εικόνα της νόσου βασίζεται σε δείκτες ηπατίτιδας C και ερμηνεία της ανάλυσης. Οι κύριοι δείκτες είναι οι ανοσοσφαιρίνες (αντισώματα) Μ και G. Η παρουσία τους στο αίμα του ασθενούς υποδηλώνει μια μη χαρακτηριστική διαδικασία για έναν υγιή οργανισμό. Με βάση την παρουσία αυτών των αντισωμάτων, ο ασθενής συνήθως διαγιγνώσκεται με μια κύρια διάγνωση.

    Προβλέπεται ποσοτική ανάλυση για την αρχική ανίχνευση αντισωμάτων και, εάν είναι απαραίτητο, για θεραπεία.

    Επίσης, μια ποσοτική ανάλυση για την ηπατίτιδα C συνταγογραφείται για την ανίχνευση μικτής ηπατίτιδας (μόλυνση με αρκετούς ιούς).

    Η ποσοτική ανάλυση με αποκωδικοποίηση εκτελείται με σκοπό:

    διευκρίνιση της τελικής διάγνωσης · ευθυγράμμιση των προβλέψεων σχετικά με την πορεία της νόσου και τη θεραπεία της - παράταση, μείωση της θεραπείας ή αλλαγή τακτικής. παρακολούθηση της θεραπείας.

    Η διεθνής ΜΕ / ml δείχνει ότι εξετάζεται η ποσότητα του RNA σε 1 ml αίματος. Ένας υψηλός ποσοτικός δείκτης δηλώνει αυξημένη πιθανότητα μόλυνσης από άλλο άτομο.

    Για να βεβαιωθείτε ότι τα αποτελέσματα είναι σωστά, πρέπει να ακολουθήσετε το συνταγογραφούμενο σχήμα πριν κάνετε δωρεά αίματος:

    έρχονται στο εργαστήριο με άδειο στομάχι, η τελευταία φορά που μπορείτε να πάρετε τα τρόφιμα μπορεί να είναι 8 ώρες πριν από τη διαδικασία? δύο ημέρες πριν από τη μελέτη, απαγορεύεται το οινόπνευμα, τα λιπαρά και τα τηγανητά τρόφιμα. υπερηχογράφημα, μασάζ, φυσιοθεραπεία πριν από τη μελέτη δεν μπορεί να διεξαχθεί? για την ημέρα, η λήψη φαρμάκων απαγορεύεται, εάν η λήψη των μεμονωμένων φαρμάκων δεν μπορεί να ακυρωθεί, αυτό αναφέρεται πριν από τη δειγματοληψία αίματος. πριν από τη διαδικασία συνιστάται η μείωση των σωματικών και νευρικών φορτίων όσο το δυνατόν περισσότερο.

    Η εκπλήρωση αυτών των απαιτήσεων θα είναι το κλειδί για την επίτευξη των σωστών αποτελεσμάτων της ποσοτικής ανάλυσης για την ηπατίτιδα C.

    Αποκωδικοποίηση της ποσοτικής ανάλυσης

    Αφού λάβουμε τους δείκτες ποσοτικής ανάλυσης, είναι απαραίτητο να αποκρυπτογραφήσουμε τα αποτελέσματα των δοκιμών για την ηπατίτιδα C. Τα αποτελέσματα υπολογίζονται τόσο σε μονάδες ME / ml όσο και σε αντίγραφα ανά ml. Για να λάβετε τα αποτελέσματα που αναφέρθηκαν στο αντίγραφο, χρησιμοποιούνται διάφορες μέθοδοι.

    Παρακολούθηση HCV (συντελεστής μετατροπής σε ME - 2,7). LCX HCV RNA (ο συντελεστής μετατροπής για ME είναι 3.8).

    Πίνακας. Αποκωδικοποίηση της ποσοτικής ανάλυσης του HCV RNA με PCR.

    Τι είναι το RNA του ιού της ηπατίτιδας C

    "Η ανίχνευση των γονιδίων του ιού της ηπατίτιδας C (HVC) στο αίμα του ασθενούς είναι το δεύτερο στάδιο της εργαστηριακής διάγνωσης αυτής της μολυσματικής παθολογίας. Για την ανίχνευση ενός παράγοντα που δεν έχει κυτταρική μεμβράνη και, κατά συνέπεια, επιφανειακά αντιγόνα, χρησιμοποιείται η μέθοδος αλυσιδωτής αντίδρασης πολυμεράσης. Με τη βοήθεια αυτής της μεθόδου, είναι άμεσα το μόριο στο οποίο κωδικοποιούνται όλες οι γενετικές πληροφορίες - RNA.

    RNA - Το ριβονουκλεϊκό οξύ, μαζί με το DNA είναι μέρος των κυττάρων όλων των ζωντανών οργανισμών. Ο ιός της ηπατίτιδας C περιέχει ένα μόριο RNA και έχει την ικανότητα να το μεταλλάξει.

    Μια μελέτη για την παρουσία του γονιδιώματος HVC χορηγείται συνήθως αφού διεξαχθεί γενική βιοχημική εξέταση αίματος και αποκτηθεί θετική απόκριση αντισώματος (anti-HVC).

    Τι σημαίνει αυτό;

    Έρευνα για αντισώματα προς HVC είναι ένα διαλογής, δηλαδή μπορεί να χρησιμοποιηθεί για την εξέταση μεγάλου αριθμού ατόμων (γιατροί, οι έγκυες γυναίκες, ασθενείς νοσοκομείων, δωρητές, χρήστες ενδοφλέβιων ναρκωτικών, HIV-θετικό). Ένα αρνητικό αποτέλεσμα της εργαστηριακής ανάλυσης του αντι-HVC δείχνει ότι δεν υπήρχε ανοσοαπόκριση στον ιό στο αίμα του υποκειμένου. Ένα αρνητικό αποτέλεσμα μπορεί να επιτευχθεί σε τέτοιες περιπτώσεις:

    Εάν ένα άτομο δεν έχει μολυνθεί ποτέ από ηπατίτιδα C.

    Εάν η ευαισθησία του εργαστηριακού συστήματος δοκιμής είναι χαμηλότερη από τη συγκέντρωση αντι-ΗνC.

    Εάν η λοίμωξη εμφανίστηκε λιγότερο από 2 μήνες πριν και η αντι-HVC στο αίμα δεν είναι ακόμα αρκετή για να προσδιοριστεί. Με μια ψευδώς αρνητική απόκριση λόγω του ανθρώπινου παράγοντα.

    Αν το αποτέλεσμα λαμβάνεται ότι τα αντισώματα να HVC ασθενή ανιχνεύεται, αυτό σημαίνει ότι ο ιός της ηπατίτιδας C είναι μέσα στο σώμα του υποκειμένου κατά το χρόνο της έρευνας ή είχαν αίμα πριν από λίγο καιρό. Εάν ένα θετικό αποτέλεσμα για αντι-HVC υπάρχει ανάγκη για πρόσθετες εργαστηριακές εξετάσεις που ανιχνεύουν γενετικό υλικό του παθογόνου, τον προσδιορισμό της συγκεντρώσεως των γονιδίων του (ιικό φορτίο, ιαιμία) και να καθορίσει τη γονότυπο.

    Ανάλυση για RNA του ιού της ηπατίτιδας C

    Το γονιδίωμα HVC στο εργαστήριο μπορεί να ανιχνευθεί χρησιμοποιώντας διάφορες μελέτες:

    διακλαδισμένο ϋΝΑ (ρ-ϋΝΑ);

    μεταγραφική ενίσχυση (ΤΜΑ).

    αλυσιδωτής αντίδρασης πολυμεράσης (PCR).

    Η μέθοδος ρ-ϋΝΑ είναι μια φθηνή και απλή μέθοδος για την ανίχνευση του ιικού γονιδιώματος σε μεγάλο αριθμό ατόμων που ερευνούνται. Το κύριο μειονέκτημα του είναι η χαμηλή ευαισθησία: ανιχνεύει HVC μόνο στη συγκέντρωσή του πάνω από 500 IU / ml.

    Η μέθοδος μεταγραφικής ενίσχυσης ανιχνεύει τα νουκλεϊνικά οξέα του ιού στον ορό του αίματος. Η ανάλυση έχει υψηλή ευαισθησία (5-10 IU / ml), αλλά δεν έχει ακόμη εισαχθεί επαρκώς στην πανταχού παρούσα εργαστηριακή πρακτική.

    Η μέθοδος PCR στη Ρωσία είναι η πιο συνηθισμένη και προσιτή εργαστηριακή εξέταση με υψηλή ευαισθησία (από 50-60 IU / ml).

    Η δοκιμή PCR διεξάγεται σε οποιοδήποτε κλινικό εργαστήριο που διαθέτει κατάλληλη διαπίστευση. Μια πολύ σημαντική απόχρωση αυτής της διαγνωστικής μεθόδου, η οποία επηρεάζει το αποτέλεσμα της ανάλυσης, είναι η ευαισθησία του συστήματος δοκιμής που χρησιμοποιείται στο εργαστήριο. Για παράδειγμα, η ευαισθησία του διαγνωστικού δείγματος 60 IU / ml, όπως στα εργαστήρια Invitro, σας επιτρέπει να ανιχνεύσετε ιικό RNA 3 μήνες μετά τη μόλυνση. Σε χαμηλή ευαισθησία του συστήματος δοκιμής, τα γονίδια του παθογόνου δεν μπορούν να ανιχνευθούν ακόμη και μετά από 4 μήνες μετά τη μόλυνση.

    RNA του ιού της ηπατίτιδας C: μέθοδος PCR

    Η μέθοδος PCR έχει πολλά πλεονεκτήματα σε σχέση με άλλες εργαστηριακές εξετάσεις για την ανίχνευση γονιδίων HVC:

    υψηλή ευαισθησία. Η μέθοδος επιτρέπει τον προσδιορισμό του γενετικού υλικού του παθογόνου μικροοργανισμού, ακόμη και στην ελάχιστη συγκέντρωσή του στο δείγμα.

    μεγαλύτερη ειδικότητα. Προσδιορίζει τα γονίδια ενός ιού ενός συγκεκριμένου γονότυπου μεταξύ μίας ποικιλίας ϋΝΑ και RNA άλλων παθογόνων, που επιτρέπει γονοτυποποίηση του παθογόνου,

    πραγματοποιώντας ταχύτητα. Η απουσία μίας μακράς διαδικασίας καλλιέργειας του παθογόνου μειώνει τον χρόνο λήψης του αποτελέσματος μέχρι αρκετές ώρες. την καθολικότητα της ανάλυσης.

    Η καθολική διαδικασία για τη μελέτη επιτρέπει την ταυτόχρονη χρήση ενός δείγματος ανθρώπινου αίματος για την ανίχνευση του γενετικού υλικού διαφόρων παθογόνων. Αυτά τα πλεονεκτήματα επιτρέπουν να θεωρηθεί η PCR ως το "χρυσό πρότυπο" της εργαστηριακής διάγνωσης της ιογενούς ηπατίτιδας C μαζί με μια ανοσολογική δοκιμασία ενζύμου για αντι-HVC.

    Η PCR είναι μια μελέτη που χρησιμοποιείται για τον προσδιορισμό των γονιδίων HVC στο αίμα ενός ατόμου που εξετάζεται. Η μελέτη αποτελείται από διάφορα στάδια:

    Δειγματοληψία του βιοϋλικού.

    Πολλαπλασιάστε την αύξηση της συγκέντρωσης των αντιγράφων του RNA στο επιλεγμένο δείγμα.

    Ανίχνευση γενετικού υλικού με τη βοήθεια ειδικών δοκιμαστικών συστημάτων.

    Μετά από δειγματοληψία φλεβικού αίματος, ο ασθενής υφίσταται τεχνητή έναρξη της διαδικασίας πολλαπλής αντιγραφής (ενίσχυση, αντιγραφή) γονιδίων HVC.

    Για το σκοπό αυτό, η θερμοκρασία στο εσωτερικό του δοκιμαστικού σωλήνα με το βιοϋλικό αλλάζει αρκετές φορές με κάποιο τρόπο. Όταν ο αριθμός αντιγράφων του RNA στον σωλήνα φτάσει στην απαιτούμενη τιμή, το παθογόνο ανιχνεύεται χρησιμοποιώντας ειδικά διαγνωστικά δοκιμής.

    (ανιχνεύει την παρουσία του ιού),

    ποσοτική (καθορίζει τη συγκέντρωση των ιογενών γονιδίων ανά μονάδα όγκου)

    γονοτυπικό (καθιερώνει τον γονότυπο του παθογόνου).

    RNA της ηπατίτιδας C: ποιοτική ανάλυση

    Το έργο της ποιοτικής PCR είναι να προσδιορίσει την παρουσία της HVC στο παρουσιαζόμενο βιοϋλικό. Η μελέτη αυτή διεξάγεται συνήθως για τη διαλογή της διάγνωσης της νόσου ή του φορέα αναγνώρισης. Εκχωρήστε το μετά ανιχνεύεται με αντι-HVC με ELISA.

    Για τη διάγνωση της ηπατίτιδας C αρκεί να ανιχνευθεί ποιοτικά το HCV γενετικό υλικό, δηλαδή χωρίς να μετράται η συγκέντρωσή του στον όγκο του αίματος. Το αποτέλεσμα ποιοτικής PCR μπορεί να είναι: "Ανίχνευση RNA" ή "ανίχνευση RNA".

    Η ακρίβεια της μεθόδου αντιστοιχεί στο 95%. Ταυτόχρονα, η ακρίβεια των ίδιων των διαγνωστικών δοκιμών φθάνει το 100% και το 5% είναι ο ανθρώπινος παράγοντας που υπάρχει πάντα στις εργαστηριακές μελέτες. Για να αποφευχθεί η ψευδής αρνητική ανάλυση, ειδικά σε άτομα με χαμηλή ιαιμία, είναι απαραίτητη η υψηλή ευαισθησία του διαγνωστικού συστήματος που χρησιμοποιείται στη μελέτη. Η ευαισθησία του συστήματος δοκιμής πρέπει να είναι τουλάχιστον 60 IU / ml.

    RNA της ηπατίτιδας C: ποσοτική ανάλυση

    Ποσοτική ανάλυση προδιαγράφεται όταν είναι απαραίτητο να γνωρίζουμε το επίπεδο της ιαιμίας στο ανθρώπινο σώμα. Ενδείξεις για τη μελέτη αυτή είναι:

    ένα θετικό αποτέλεσμα ποιοτικής PCR υπό τον όρο ότι ανιχνεύονται αντισώματα στον ιό ·

    τη θέσπιση του σταδίου της παθολογίας.

    τον ορισμό του ιικού φορτίου στην ηπατίτιδα ·

    επιλογή ενός συνδυασμού αντιικών φαρμάκων.

    Παρακολούθηση της απόκρισης του ιού στην τρέχουσα αντιιική θεραπεία.

    αξιολόγηση της πιθανότητας μετάβασης της οξείας ηπατίτιδας C σε χρόνια.

    Το αποτέλεσμα της ανάλυσης εκφράζεται σε IU / ml (διεθνείς μονάδες σε 1 ml ορού) ή σε αντίγραφα / ml (ο αριθμός αντιγράφων των γονιδίων του ιού σε 1 ml ορού). Η ποσοτική PCR δεν έχει κανόνα: κανονικά δεν πρέπει να ανιχνεύεται το γονίδιο HVC στο ανθρώπινο αίμα. Τα αποτελέσματα της έρευνας συγκρίνονται με τις τιμές αναφοράς που έχουν καθοριστεί για δεδομένο βαθμό ιϊκού φορτίου.

    Έτσι, οι δείκτες (σε IU / ml):

    κάτω από 4 × 10 * 5 θεωρούνται χαμηλή ιαιμία.

    από 4 × 10 * 5 έως 8 × 10 * 5 - μέτρια.

    περισσότερες από 8 × 10 * 5 - υψηλές.

    Τα περισσότερα αντίγραφα του ιικού RNA στο αίμα, τόσο πιο επιθετική είναι η ασθένεια και τόσο μεγαλύτερος είναι ο κίνδυνος μετάδοσης του ιού σε άλλους. Αλλά το επίπεδο του ιϊκού φορτίου δεν είναι ο μόνος δείκτης που επηρεάζει τη σοβαρότητα της πορείας της παθολογίας και μια περαιτέρω πρόγνωση για τον ασθενή: ο γονότυπος του παθογόνου είναι επίσης σημαντικός.

    Η καθιέρωση ενός γονότυπου είναι απαραίτητη για τον καθορισμό του σωστού θεραπευτικού σχήματος. Καθορίζει επίσης την πρόγνωση για την υγεία και τη ζωή του ασθενούς. Για παράδειγμα, ο ιός 3 του γονότυπου συχνά οδηγεί σε ίνωση ή κίρρωση του ήπατος, σε σύγκριση με ασθενείς που φέρουν 1 γονότυπο.

    Ηπατίτιδα C: ανάλυση και ερμηνεία

    RNA Η διάγνωση της ηπατίτιδας C δεν μπορεί να γίνει μόνο με βάση την ποιοτική και / ή ποσοτική PCR: ο προσδιορισμός της HVC και το επίπεδο του ιϊκού φορτίου δεν αρκεί για να συνταγογραφήσει επαρκή αντιιική θεραπεία. Ένας πιθανός ασθενής πρέπει να εξεταστεί διεξοδικά (κλινικά, εργαστηριακά, με όργανα) προκειμένου να έχει μια αντικειμενική εικόνα της παθολογίας. Διορθώστε να ορίσετε ένα σύνθετο των εξετάσεων για να διαπιστώσετε τη διάγνωση της ηπατίτιδας C, και στη συνέχεια να αποκρυπτογραφήσει σωστά τα αποτελέσματα μπορεί μόνο ένας γιατρός.

    Ποιοτική ανάλυση της PCR για την ηπατίτιδα C

    Η ηπατίτιδα είναι μια σοβαρή ασθένεια που έχει πολλές αιτίες για την έναρξη. Στο επίκεντρο της ανάπτυξής του είναι άμεση ή έμμεση βλάβη στο ήπαρ. Δεδομένης της σημασίας του για ολόκληρο τον οργανισμό, μπορεί κανείς να μαντέψει πόσο κακή είναι η παθολογία. Σε αυτό το άρθρο, θα συζητήσουμε λεπτομερέστερα τα χαρακτηριστικά της πορείας και τη εργαστηριακή διάγνωση της ηπατίτιδας C.

    Η αιτία της ασθένειας είναι ένας ιικός παράγοντας, ο οποίος αναφέρεται σε παθογόνους που περιέχουν RNA. Έχει ένα χαρακτηριστικό γνώρισμα - τη δυνατότητα να μεταλλαχθεί, δηλαδή να αλλάξει τη δομή του. Λόγω αυτής της μόλυνσης διαφεύγει από την επίθεση του ανοσοποιητικού συστήματος και στις περισσότερες περιπτώσεις οδηγεί σε χρόνια φλεγμονή στο ήπαρ.

    Δεδομένης της ύπαρξης διαφόρων υποτύπων του ιού, η επιλογή των φαρμάκων θα πρέπει να διεξάγεται λαμβάνοντας υπόψη τα αποτελέσματα της γονότυπης. Παρά τη μακρά μελέτη της νόσου και των ιδιαιτεροτήτων της δομής του HCV, δεν ήταν δυνατόν να αναπτυχθεί ένα συγκεκριμένο εμβόλιο κατά της νόσου.

    Οι δυσκολίες της έγκαιρης διάγνωσης είναι στην ασυμπτωματική πορεία της ηπατίτιδας, με αποτέλεσμα το άτομο να στραφεί σε γιατρό στο στάδιο της κίρρωσης. Για την έγκαιρη ανίχνευση της νόσου απαιτούνται τακτικές φυσικές εξετάσεις. Μόνο με εργαστηριακές εξετάσεις αίματος μπορεί να εντοπιστεί ο HCV και να προληφθεί η μόλυνση άλλων. Το γεγονός ότι ο φορέας της λοίμωξης μπορεί για πολύ καιρό να μην γνωρίζει την παθολογία και να συνεχίσει να μεταδίδει τον ιό σε υγιείς ανθρώπους.

    Διαδρομές μετάδοσης

    Ο ιός στις περισσότερες περιπτώσεις εξαπλώνεται μέσω του αίματος, καθώς περιέχει τη μεγαλύτερη συγκέντρωση παθογόνων παραγόντων. Έτσι, η μόλυνση μεταδίδεται:

    • με αιμοκάθαρση.
    • όταν βυθίζετε με βελόνα.
    • κατά τη διάρκεια του αγώνα, όταν το δέρμα τραυματίζεται, και η αιμόσωμη επαφή συμβαίνει?
    • με μετάγγιση αίματος (μετάγγιση αίματος).

    Η πιθανότητα μόλυνσης με στενή οικειότητα είναι ασήμαντη, καθώς το σπέρμα και η κολπική έκκριση περιέχουν μικρό αριθμό παθογόνων παραγόντων. Ο κίνδυνος μόλυνσης αυξάνεται σημαντικά εάν διαταραχθεί η ακεραιότητα του βλεννογόνου των γεννητικών οργάνων. Αυτό παρατηρείται με επιθετικό και πρωκτικό σεξ.

    Όσο για τον κατακόρυφο τρόπο μετάδοσης της λοίμωξης, πραγματοποιείται κατά τη διάρκεια της εργασίας. Κατά την περίοδο της κύησης, το παθογόνο δεν μπορεί να διεισδύσει στον πλακούντα στο έμβρυο. Σε φυσικά είδη ο παθογόνος παράγοντας μεταφέρεται στο παιδί σε τραύμα του δέρματός του όταν παρατηρείται επαφή με το αίμα της μητέρας.

    Μετά τη διείσδυση του παθογόνου παράγοντα σε έναν υγιή οργανισμό, αρχίζει η σύνθεση αντισωμάτων, τα οποία προστατεύουν από τη μόλυνση και ανήκουν σε ανοσοποιητικές δομές. Βρίσκονται κατά τη διάρκεια της αρχικής μελέτης ενός ατόμου με τη βοήθεια της μεθόδου ELISA.

    Για να επιβεβαιωθεί η διάγνωση, ο ασθενής υφίσταται αλυσιδωτή αντίδραση πολυμεράσης. Πρόκειται για μια ανάλυση για τον προσδιορισμό του γενετικού υλικού ενός παθογόνου παράγοντα και για τον προσδιορισμό του ιικού φορτίου.

    Εργαστηριακή διάγνωση ηπατίτιδας C

    Η εργαστηριακή διάγνωση ξεκινά με μια ανοσοδοκιμασία ενζύμου. Κύριος στόχος του είναι να ανιχνεύσει αντισώματα που παράγονται κατά του παθογόνου. Η απόδοσή του είναι σχεδόν 95%. Χάρη σε αυτή την έρευνα στο προκλινικό στάδιο είναι δυνατόν να εντοπιστεί ο φορέας του ιού και να το στείλει για περαιτέρω εξέταση.

    Η ποιοτική ανάλυση της ELISA υποδεικνύει την παρουσία ή την απουσία ανοσοσφαιρινών στο αίμα του ασθενούς. Το αποτέλεσμά του μπορεί να είναι "θετικό" ή "αρνητικό". Αφού έλαβε την πρώτη παραλλαγή της απάντησης, το άτομο πηγαίνει στην επόμενη εξέταση - PCR. Η τιμή του εξαρτάται από την ποιότητα των αντιδραστηρίων και του εργαστηρίου. Το κόστος μιας αλυσιδωτής αντίδρασης πολυμεράσης μπορεί να φθάσει τα 4.000 ρούβλια.

    Χαρακτηριστικά της PCR

    Με την αλυσιδωτή αντίδραση πολυμεράσης, ακόμη και μια μικρή ποσότητα βιολογικού υλικού καθιστά δυνατή την εκτίμηση του ιικού φορτίου στο αίμα, δηλαδή για τον υπολογισμό της συγκέντρωσης των παθογόνων σε ένα χιλιοστόλιτρο υγρού.

    Με την έλευση της PCR, η διάγνωση της ηπατίτιδας ήταν πολύ απλούστερη. Η ανάλυση καθιστά δυνατή την ταυτοποίηση του HCV RNA, για να καθοριστεί το στάδιο της μολυσματικής διαδικασίας και η μολυσματικότητα του φορέα του ιού.

    Υπάρχουν διάφοροι τύποι γενετικής διάγνωσης:

    1. ποιοτική ανάλυση της PCR για την ηπατίτιδα C - επιβεβαιώνει την παρουσία ή την απουσία HCV στο αίμα του εξεταστή:
    2. ποσοτική, λόγω της οποίας είναι δυνατόν να υπολογιστεί η συγκέντρωση των ιών και να καθοριστεί το στάδιο της νόσου. Το αποτέλεσμα δίδεται σε IU / ml ή αντίγραφα / ml (ανάλογα με το εργαστήριο).
    3. ο γονότυπος είναι απαραίτητος για τον προσδιορισμό του γονότυπου του HCV. Αυτό απαιτείται για την ακριβή επιλογή των φαρμάκων που θα είναι πιο αποτελεσματικά στην περίπτωση αυτή. Η ανάλυση εμμέσως υποδεικνύει τη σοβαρότητα της παθολογικής διαδικασίας στο ήπαρ. Έτσι, με τον τρίτο γονότυπο του παθογόνου, παρατηρείται συχνότερα στεάτωση, η ανάπτυξη της οποίας είναι η συσσώρευση λίπους στα ηπατοκύτταρα (τα κύτταρα του). Επιπλέον, ο τύπος του ιού επηρεάζει το αποτέλεσμα και τη διάρκεια της θεραπευτικής πορείας.

    Ποιοτική ανάλυση της PCR για την ηπατίτιδα C

    Το πρώτο βήμα στο εργαστήριο είναι η μελέτη του βιολογικού υλικού για την παρουσία HCV RNA. Είναι σημαντικό να θυμόμαστε ότι μια ποιοτική ανάλυση για την ηπατίτιδα C έχει ένα ορισμένο επίπεδο ευαισθησίας και συνεπώς δεν μπορεί πάντα να δώσει τη σωστή απάντηση. Σε αυτή την περίπτωση, συνιστάται η διεξαγωγή επαναλαμβανόμενης εργαστηριακής διάγνωσης με τη χρήση άλλων αντιδραστηρίων.

    Για να ληφθούν αξιόπιστα αποτελέσματα, πρέπει να χρησιμοποιηθεί ένα σύστημα δοκιμής με ευαισθησία τουλάχιστον 50 IU / ml.

    Το αποτέλεσμα της διάγνωσης μπορεί να είναι είτε "θετικό" είτε "αρνητικό". Εάν ο παθογόνος παράγοντας δεν βρίσκεται στο αίμα, η μελέτη τελειώνει. Όταν ανιχνεύεται παθογόνος παράγοντας στο δείγμα, πραγματοποιείται κατόπιν ποσοτικός μετρητής του ιικού φορτίου.

    Μια ψευδής αρνητική απάντηση λαμβάνεται όταν διακόπτεται η τεχνολογική διαδικασία, για παράδειγμα, ενεργά συστατικά που καταπιέζουν την κατασκευή αντιγράφων του παθογόνου εισέρχονται στο περιβάλλον. Έτσι, δεν είναι δυνατό να εμφανιστεί η πραγματική εικόνα του αίματος, λόγω της οποίας δεν διαγνωσθεί η ανθρώπινη λοίμωξη.

    Ένα ψευδώς θετικό αποτέλεσμα μπορεί να επιτευχθεί εάν ο σωλήνας συλλογής για το βιολογικό υλικό, καθώς και το περιβάλλον για τη μελέτη, έχουν μολυνθεί. Επιπλέον, μια τέτοια αντίδραση ανάλυσης είναι δυνατή με μια μικτή μόλυνση, όταν το ήπαρ επηρεάζεται από διάφορους ιούς, για παράδειγμα ηπατίτιδα C και D.

    Ενδείξεις για ποιοτική έρευνα

    Ένας γιατρός μπορεί να εκχωρήσει μια ποιοτική μελέτη σε έναν ασθενή για την ανίχνευση του RNA του ιού της ηπατίτιδας C:

    • όταν λαμβάνουν θετική ή αμφισβητήσιμη απόκριση της ανοσοδοκιμασίας του ενζύμου.
    • για επαλήθευση της διάγνωσης.
    • προσδιορισμός του ιικού φορτίου.
    • τη σταδιοποίηση της φάσης της νόσου.
    • διάγνωση μικτής μόλυνσης. Συχνά, η ηπατίτιδα C επηρεάζει το ήπαρ ταυτόχρονα με τον ιό "D".
    • προσδιορισμός θεραπευτικών τακτικών λαμβάνοντας υπόψη τον γονότυπο του παθογόνου παράγοντα ·
    • αξιολόγηση της δυναμικής των μεταβολών στο πλαίσιο της θεραπείας με αντιιικά φάρμακα.

    Τα πλεονεκτήματα μιας αλυσωτής αντίδρασης πολυμεράσης περιλαμβάνουν:

    1. υψηλή ευαισθησία της τεχνικής, η οποία επιτρέπει να διαπιστωθεί το γεγονός της μόλυνσης στο προκλινικό στάδιο,
    2. την ταυτοποίηση του γενετικού υλικού του παθογόνου, και όχι τα αντισώματα του ·
    3. τη δυνατότητα δημιουργίας ενός υποτύπου παθογόνου παράγοντα ·
    4. υψηλή ταχύτητα διάγνωσης, δεδομένου ότι δεν είναι απαραίτητο να σπείρει υλικό σε θρεπτικό μέσο, ​​αλλά αρκεί να χρησιμοποιηθούν ειδικά συστήματα δοκιμών. Ένα άτομο λαμβάνει αποτέλεσμα μετά από 5 ώρες.
    5. καθολικότητα. Η ανάλυση καθιστά δυνατή την ταυτοποίηση οποιουδήποτε γενετικού υλικού (RNA, DNA). Λόγω αυτού, ο γιατρός μπορεί να επιβεβαιώσει την ηπατίτιδα C και άλλους τύπους ασθένειας (Β).
    6. τη δυνατότητα ανίχνευσης λανθάνουσας λοίμωξης.

    Ποσοτική έρευνα

    Στη μελέτη του αίματος με αλυσιδωτή αντίδραση πολυμεράσης, είναι δυνατόν να υπολογιστεί ο αριθμός των παθογόνων σε σταθερό όγκο βιολογικού υλικού. Ο δείκτης παρουσιάζεται σε IU / ml. Λόγω της ανάλυσης είναι δυνατόν να καθοριστεί ο βαθμός μολυσματικότητας του ασθενούς, να προσδιοριστεί το στάδιο της μολυσματικής διαδικασίας και επίσης να αξιολογηθεί η αποτελεσματικότητα της φαρμακευτικής θεραπείας.

    Με βάση την PCR, ο εμπειρογνώμονας αποφασίζει ποιες δοσολογίες φαρμάκων μπορούν να εμποδίσουν τη διάδοση παθογόνων παραγόντων. Επιπλέον, προσδιορίζεται η διάρκεια της αντιιικής αγωγής και η πρόγνωση για τη ζωή. Είναι σημαντικό να θυμόμαστε ότι τα πειραματικά συστήματα είναι ιδιαίτερα ευαίσθητα, οπότε η μέθοδος καθιστά δυνατή την επιβεβαίωση της ανθρώπινης μόλυνσης ακόμα και στο προκλινικό στάδιο.

    Γονότυπο

    Δεδομένης της ικανότητας του αιτιολογικού παράγοντα να μεταλλαχθεί, να καθορίσει την τακτική της θεραπείας και την επιλογή των αντιιικών φαρμάκων, χρειάζεται ο γονότυπός του. Για παράδειγμα, η θεραπεία της ηπατίτιδας HCV 1 διαρκεί 48 εβδομάδες, με θετική τάση παρατηρούμενη μόνο στο 60% των περιπτώσεων. Οι γονοτύποι 2 και 3 έχουν ευνοϊκότερη πρόγνωση. Τα αντιιικά φάρμακα συνταγογραφούνται για 8 μήνες και η αποτελεσματικότητά τους φτάνει το 85%.

    Σύμφωνα με στατιστικά στοιχεία, στις περισσότερες περιπτώσεις οι HCV 1, 2 και 3 είναι εγγεγραμμένοι στο έδαφος της Ρωσικής Ομοσπονδίας.

    Κατά την αποκρυπτογράφηση μιας εργαστηριακής μελέτης, μπορεί να αναφερθεί μια τέτοια απάντηση - "μη δακτυλογραφημένη". Αυτό σημαίνει ότι ένας ιός κυκλοφορεί στο κυκλοφορικό σύστημα του ασθενούς, ο οποίος δεν μπορεί να αναγνωριστεί από το σύστημα δοκιμών. Το αποτέλεσμα της ανάλυσης στην περίπτωση αυτή δείχνει τη μόλυνση ενός ατόμου που είναι άτυπη για μια δεδομένη γεωγραφική περιοχή του αιτιολογικού παράγοντα.

    Πώς να αποκτήσετε αξιόπιστα αποτελέσματα;

    Για την ποιοτική έρευνα της PCR για την ανίχνευση του RNA του αιτιολογικού παράγοντα της ηπατίτιδας C έχει δείξει τα σωστά αποτελέσματα, είναι απαραίτητο να συμμορφωθούν με τις απαιτήσεις για την προετοιμασία για εργαστηριακή διάγνωση:

    1. η δειγματοληψία αίματος πραγματοποιείται με άδειο στομάχι και το "πεινασμένο" κενό δεν πρέπει να είναι μικρότερο από 8 ώρες.
    2. δύο ημέρες πριν από τη μελέτη συνιστάται να σταματήσετε να πίνετε αλκοόλ και να απορρίπτετε από αιχμηρά, λιπαρά και καπνισμένα πιάτα.
    3. να καταργηθεί η εισαγωγή φαρμάκων που μειώνουν την πήξη του αίματος, όπως η ηπαρίνη. Εάν αυτά τα φάρμακα συνταγογραφούνται για λόγους ζωής, θα πρέπει να ενημερώσετε το γιατρό σχετικά. Επιπλέον, ο ειδικός θα πρέπει να γνωρίζει την εισαγωγή άλλων φαρμάκων που μπορεί να επηρεάσουν το αποτέλεσμα μιας εργαστηριακής δοκιμής.
    4. Την παραμονή της συλλογής του βιολογικού υλικού, οι φυσιοθεραπευτικές διαδικασίες δεν θα πρέπει να εκτελούνται και να υποβάλλονται σε βαριά σωματική άσκηση.

    Τα αποτελέσματα της ανάλυσης μπορούν να επηρεαστούν όχι μόνο από το άτομο που δωρίζει αίμα αλλά και από άλλους παράγοντες, όπως:

    • κακή συλλογή αίματος.
    • μη τήρηση των συστάσεων για τη μεταφορά βιολογικού υλικού ·
    • ανεπαρκής κατάρτιση των εργαστηριακών εργαζομένων ·
    • μη τήρηση των ερευνητικών τεχνικών ·
    • την εισαγωγή αντιπηκτικών (ηπαρίνη) την παραμονή της δειγματοληψίας αίματος. Αυτή η ομάδα φαρμάκων μειώνει την πήξη, επιβραδύνοντας έτσι την εργασία των αντιδραστηρίων.

    Σε διαφορετικά εργαστήρια, η διαγνωστική απόκριση μπορεί να είναι ελαφρώς διαφορετική, αλλά αυτά τα σφάλματα δεν επηρεάζουν το τελικό αποτέλεσμα της μελέτης.

    Ιδιαίτερη προσοχή δίνεται στους τύπους συστημάτων δοκιμών που χρησιμοποιούνται στο εργαστήριο. Συχνά προτιμώνται τα αντιδραστήρια με υψηλή ευαισθησία. Αυτό είναι σημαντικό για ασθενείς με χαμηλό ιικό φορτίο, καθώς είναι δύσκολο να εντοπιστεί.

    Πόσο συχνά εκτελείται ένας εργαστηριακός έλεγχος;

    Πρωτίστως, η αλυσιδωτή αντίδραση πολυμεράσης διεξάγεται σε άτομα που έχουν δοκιμαστεί για αντισώματα στον ιό ηπατίτιδας σε ανοσοδοκιμασία. Σε αυτή την περίπτωση, διορίζεται για να επιβεβαιώσει το γεγονός της λοίμωξης ενός ατόμου και να καθορίσει το στάδιο της νόσου. Επιπλέον, η ανάλυση σας επιτρέπει να προσδιορίσετε τον υποτύπο του ιού, ο οποίος είναι ιδιαίτερα σημαντικός για την επιλογή φαρμάκων.

    Η επόμενη περίοδος για υποχρεωτικό εργαστηριακό έλεγχο είναι 3 μήνες από την έναρξη της αντιιικής θεραπείας. Η διάγνωση παρέχει την ευκαιρία να εκτιμηθεί η αποτελεσματικότητα των φαρμάκων, να ρυθμιστεί η δόση ή να αντικατασταθεί.

    Εκτός από τις βασικές αναλύσεις, η PCR μπορεί να πραγματοποιηθεί επιπρόσθετα στις 4 και 24 εβδομάδες από την έναρξη της θεραπείας. Μια θετική πρόγνωση της νόσου επιβεβαιώνεται από τη μείωση του ιικού φορτίου μετά από τρεις μήνες θεραπείας. Έτσι, για παράδειγμα, θα πρέπει να μειωθεί από 1 εκατομμύριο IU / ml σε αρκετές εκατοντάδες χιλιάδες.

    Εάν η συγκέντρωση των παθογόνων παραγόντων στο αίμα παραμένει στο ίδιο επίπεδο ή αυξάνεται ελαφρώς, αυτό δείχνει την αναποτελεσματικότητα των αντιιικών παραγόντων και απαιτεί την αντικατάστασή τους. Με τη βοήθεια της PCR στο τέλος της θεραπείας είναι δυνατόν να επιβεβαιωθεί η ανάκτηση του ασθενούς.

    Για την ορθή ερμηνεία των αποτελεσμάτων της εργαστηριακής διάγνωσης, απαιτείται η πραγματοποίηση διαβουλεύσεων με έναν ειδικό ήπατολόγο ή ειδικό για μολυσματικές ασθένειες. Δεδομένης της μεγάλης συχνότητας εμφάνισης λανθασμένων απαντήσεων για τη μέθοδο ELISA, η ανάλυση χρησιμοποιείται αποκλειστικά για πρωτογενή εξέταση. Για μια πιο εμπεριστατωμένη εξέταση του ασθενούς, χρησιμοποιείται αλυσιδωτή αντίδραση πολυμεράσης.

    Πιστεύετε ακόμα ότι είναι δύσκολο να θεραπεύσετε την ηπατίτιδα C;

    Κρίνοντας από το γεγονός ότι διαβάζετε τώρα αυτές τις γραμμές - μια νίκη στον αγώνα κατά της ηπατικής νόσου δεν είναι στο πλευρό σας... Και έχετε ήδη σκεφτεί τη θεραπεία με ιντερφερόνη; Είναι κατανοητό, επειδή η ηπατίτιδα C είναι μια πολύ σοβαρή ασθένεια, επειδή η σωστή λειτουργία του ήπατος αποτελεί εγγύηση για την υγεία και την ευημερία. Η ναυτία και ο εμετός, κιτρινωπό ή γκριζωπό χρώμα του δέρματος, πικρή γεύση στο στόμα, σκουρόχρωμα ούρα και διάρροια... Όλα αυτά τα συμπτώματα είναι γνωστά σε σας όχι από φήμες. Αλλά ίσως είναι πιο σωστό να μην αντιμετωπίζετε μια συνέπεια, αλλά έναν λόγο;

    Σήμερα, σύγχρονα φάρμακα και νέα γενιά sofosbuvir Daklatasvir με 97-100% πιθανότητες για πάντα θα σας θεραπεύσει από ηπατίτιδα C. Το νέο φάρμακο είναι διαθέσιμο στα Ρωσικά στο επίσημο εκπρόσωπο της ινδικής farmgiganta Zydus Heptiza. Τα παραγγελθέντα προϊόντα παραδίδονται από τον courier εντός 4 ημερών, μετά την παραλαβή. Αποκτήστε δωρεάν συμβουλές σχετικά με τη χρήση σύγχρονων ναρκωτικών καθώς και μάθετε για τις μεθόδους αγοράς που μπορείτε να βρείτε στην επίσημη ιστοσελίδα του προμηθευτή Zydus στη Ρωσία.


    Σχετικά Άρθρα Ηπατίτιδα