Ποιοι είναι οι κανόνες στην ποσοτική ανάλυση για την ηπατίτιδα C;

Share Tweet Pin it

Ο ιός της ηπατίτιδας C είναι ικανός να αναπαράγεται στα κύτταρα του αίματος και να προκαλεί λεμφοϋπερπλαστικές ασθένειες. Χάρη στις πολλαπλές μεταλλάξεις, οι ανοσοποιητικές άμυνες του οργανισμού εξασθενούν, εμφανίζονται οι γονότυποι και οι υποτύποι του ιού. Με τη σωστή και έγκαιρη αναγνώριση ενός συγκεκριμένου τύπου εξαρτάται από την αποτελεσματικότητα της αντιιικής θεραπείας. Ο κίνδυνος μόλυνσης είναι ότι η ασθένεια είναι ασυμπτωματική. Συνολικά, το 15% των 100 μπορεί να παρουσιάσουν ναυτία και έμετο, απώλεια βάρους και πυρετό.

Ορισμός του ιού της ηπατίτιδας C

Ο πρότυπος κανόνας της ηπατίτιδας C είναι τα μεγέθη από 40 έως 60 nm, με την πλειονότητα των λιπιδίων, ηπατική βλάβη ως αποτέλεσμα της οξείας ή χρόνιας πορείας της νόσου. Η ηπατίτιδα C, δηλαδή ο ιός RNA της οικογένειας Togaviridae, είναι εξαιρετικά ανθεκτικός, μεταδίδεται με μετάγγιση αίματος ή τη χρήση μη αποστειρωμένων αντικειμένων, ακατάλληλη υγιεινή των αξεσουάρ μπάνιου, Η ποσοτική ανάλυση σας επιτρέπει να εξετάσετε το αίμα και να προσδιορίσετε τη γενετική δομή του μολυσμένου ιού.

Για την εκτίμηση της ηπατίτιδας C και των γενότυπων της, πραγματοποιείται ποσοτική ανάλυση. Ανάλογα με τον αναλυτή, μπορούν να προσδιοριστούν τρία επίπεδα επίπτωσης του ιού RNA.

Οι υποτύποι μπορούν να παράγουν διάφορες τροποποιήσεις, οπότε η ειδικότητα και η ευαισθησία του αναλυτή πρέπει να είναι εκατό τοις εκατό. Εκτός από την ανίχνευση μιας νόσου σε έναν ασθενή, είναι απαραίτητο να προσδιοριστεί ο βαθμός της σοβαρότητάς του. Ορισμένα εργαστήρια δεν διαθέτουν όλα τα δεδομένα σχετικά με τους ορισμούς του ιού RNA, υπάρχει η πιθανότητα μιας ψευδώς θετικής αντίδρασης.

Η μελέτη για την ηπατίτιδα C θα είναι πιο ακριβής κατά τη μελέτη τέτοιων δεικτών:

Δίνοντας έμφαση στα αποτελέσματα αυτών των δεικτών και στη γενική κατάσταση του σώματος, εμφανίζεται ένα αποτέλεσμα που δείχνει το βαθμό μόλυνσης, τη μορφή και τον αριθμό των κυττάρων ηπατίτιδας C στο αίμα. Αυτό συμβάλλει στη διαδικασία επούλωσης και στην αποτελεσματικότητα της αντιιικής θεραπείας.

Τύποι ανάλυσης για την ηπατίτιδα C

Η αντίδραση πολυδιάστατης αλύσου (PCR) δίνει μια ιδέα για την ποσότητα σωματιδίων DNA στις αναλύσεις του ασθενούς και προσδιορίζει σωστά τον αιτιολογικό παράγοντα της λοίμωξης.

Οι μολυσματικοί παράγοντες μπορούν να εκδηλωθούν. Μια τέτοια μολυσματική νόσος του ήπατος, όπως η ηπατίτιδα C, είναι σήμερα θεραπεύσιμη όταν ανιχνεύεται εγκαίρως. Εάν υπάρχει υποψία για ιό, η ανάλυση PCR γίνεται.

Ενώ τα συμπτώματα του ιού μπορεί να καλυφθούν για μεγάλο χρονικό διάστημα, ένα άτομο μπορεί να μην αισθάνεται την εμφάνιση της πορείας της νόσου. Αλλά με προσεκτική εξέταση στο 60-70% των περιπτώσεων, η ηπατίτιδα C ανιχνεύεται, μια πρωταρχική ανάλυση στην οποία είναι η ELISA, ακολουθεί η διάγνωση PCR. Η ανάλυση πραγματοποιείται σε ορισμένες περιόδους για να προσδιοριστεί το στάδιο της ασθένειας και να συνταγογραφηθεί η κατάλληλη θεραπεία. Κάνετε χωρίς αυτό, χωρίς να εφαρμόσετε όλες αυτές τις διαδικασίες, μπορείτε να εμβολιάσετε από ηπατίτιδα.

Ποιοτική και ποσοτική ανάλυση

Υπάρχουν ποιοτικές και ποσοτικές αναλύσεις. Η ουσία του πρώτου είναι ότι καθορίζει την παρουσία λοίμωξης στο αίμα. Και αυτό σημαίνει ότι ο ιός επηρεάζει υγιή ηπατικά κύτταρα. Όταν ένας ασθενής έχει αντισώματα έναντι της ηπατίτιδας C, πραγματοποιείται αμέσως ποιοτική δοκιμή. Ο κανόνας που πρέπει να παράγει το αποτέλεσμα είναι "δεν ανιχνεύεται στο αίμα". Κατά τον προσδιορισμό της συγκέντρωσης του ιού, υπάρχει ανάγκη γνώσης της ευαισθησίας του διαγνωστικού συστήματος, καθώς η ανάλυση μπορεί να γίνει από άτομα που υποβάλλονται σε αντιιική θεραπεία. Η ευαισθησία του αναλυτή δεν πρέπει να είναι μικρότερη από 50 IU / ml.

Όταν ανιχνεύεται ένας ιός, γίνεται ποσοτική ανάλυση, με άλλα λόγια ένα ιικό φορτίο που καθορίζει τη συγκέντρωση του ιού στο αίμα και τη σοβαρότητα της νόσου.

Το ιογενές RNA, το οποίο είναι σε μια ορισμένη ποσότητα αίματος, ορίζεται ως ο κανόνας με ρυθμό 1 ml ανά 1 κυβικό εκατοστό. Μετά την ποσοτικοποίηση του ιικού φορτίου, είναι δυνατόν να κρίνουμε τον βαθμό μόλυνσης του μη μολυσμένου περιβάλλοντος. Μόλις η συγκέντρωση της ηπατίτιδας C αυξηθεί στο αίμα, το περιβάλλον πρέπει να απομονωθεί.

Είναι σημαντικό στα πρώτα στάδια να ανιχνευθεί ο βαθμός συγκέντρωσης της ηπατίτιδας προκειμένου να καθοριστεί ο ρυθμός αποκατάστασης. Εάν η συχνότητα της ηπατίτιδας C υπερβεί κατά περισσότερο από 800 χιλιάδες IU / ml, θεωρείται υπερβολικά υψηλή, με αύξηση σε ένα εκατομμύριο - κρίσιμη. Εάν η ποσοτική περιοχή είναι μικρότερη από 400 χιλιάδες IU / ml, θεωρείται ότι η μόλυνση των άλλων θα συμβεί με λιγότερες πιθανότητες. Αυτός ο αριθμός καθιστά σαφές ότι η ηπατίτιδα C στο σώμα είναι παρούσα σε πολύ μικρές δόσεις. Η ανάλυση δεν μπόρεσε να προσδιορίσει την ποσοτική τιμή του RNA των σωματιδίων του ιού, έτσι επανατοποθετείται αρκετές φορές για την ακρίβεια της διάγνωσης.

Αποτελέσματα ποσοτικής ανάλυσης

Το καθήκον του προσδιορισμού της ποσότητας του ιικού φορτίου στο αίμα του ασθενούς είναι να προσδιοριστεί η έκταση της λοίμωξης για τους άλλους.

Αποτελέσματα ανάλυσης PCR:

  1. Μια θετική απάντηση σημαίνει ότι υπάρχει μια μόλυνση στο βιολογικό υλικό. Η ανάλυση σας επιτρέπει να προσδιορίσετε τον ακριβή αριθμό των μολυσμένων κυττάρων.
  2. Μια αρνητική απάντηση δείχνει την απουσία μόλυνσης, η οποία αναζητήθηκε προσεκτικά στο σώμα.

Η ποσοτική μέθοδος για την ηπατίτιδα C είναι ακριβής και ενημερωτική, διεξάγεται σε εξοπλισμό με υψηλή ευαισθησία. Η αποκρυπτογράφηση των αποτελεσμάτων της ανάλυσης σας επιτρέπει να γνωρίζετε αν υπάρχει μόλυνση και η ειδικότητά της, για να δείτε τον μικρότερο αριθμό μολυσμένων κυττάρων σε αναλυτές υψηλής ευαισθησίας.

Τα ψευδώς θετικά ή αντίθετα αποτελέσματα της ανάλυσης σπάνια δίνουν, συχνότερα συμβαίνει σε μελέτες ανοσοδοκιμασίας.

Ηπατίτιδα C PCR

Αφήστε ένα σχόλιο 15.344

Η ηπατίτιδα C είναι μία από τις πιο επικίνδυνες και δύσκολη στη διάγνωση ιογενών ασθενειών. Για τον προσδιορισμό της νόσου χρησιμοποιώντας PCR ηπατίτιδα C. Αυτή η μέθοδος είναι μια νέα τεχνική υψηλής τεχνολογίας που επιτρέπει σε κάποιον να μελετήσει το γενετικό υλικό της ύπαρξης της ζωής στα μικρότερα σωματίδια (μόρια) και τα μικρότερα ποσά. Ο ιός της ηπατίτιδας Β είναι πολύ ανθεκτική, μπορεί να ζήσει για μεγάλο χρονικό διάστημα στο περιβάλλον και καλά ριζώσει στο ανθρώπινο σώμα.

Τι είναι το PCR;

Σήμερα υπάρχουν πολλές ασθένειες. Και όχι λιγότερος αριθμός μεθόδων για τον προσδιορισμό τους. Δεδομένου ότι οι παράγοντες μόλυνσης έχουν μάθει να εύκολα εξοικειώνονται με το περιβάλλον και να εξελίσσονται, οι τελευταίες τεχνολογίες χρησιμοποιούνται για τη διάγνωσή τους. Η αλυσιδωτή αντίδραση πολυμεράσης (PCR) είναι μια ταχύτερη και ακριβέστερη μέθοδος, η οποία στοχεύει στην εύρεση του αιτιολογικού παράγοντα της ασθένειας, αυξάνοντας ουσιαστικά την αναλογία του DNA του ιού της ηπατίτιδας στο δείγμα. Συχνά είναι γραμμένο για: αναζήτηση μιας βελόνας σε ένα άχυρα και στη συνέχεια να χτίσετε μια στοίβα από βελόνες.

Τύποι μεθόδων PCR

Επισημάνετε μια ποιοτική και ποσοτική ανάλυση για την ηπατίτιδα. Για να προσδιορίσετε εάν ο ιός βρίσκεται στο σώμα και εκείνοι που έχουν βρει αντισώματα στην ηπατίτιδα C, πραγματοποιήστε ποιοτικούς ελέγχους. Η ανάλυση της ανάλυσης δίνει το αποτέλεσμα: "θετικά". "Αρνητικό". Αρνητικό νόημα σημαίνει: είτε το άτομο είναι υγιές, είτε οι παράγοντες στο αίμα δεν είναι αρκετοί και δεν μπορούν να βρεθούν. Ως εκ τούτου, αξίζει να διεξαχθεί μια δεύτερη μελέτη μετά από λίγο.

Ένα θετικό αποτέλεσμα υποδεικνύει την ύπαρξη λοίμωξης. Αυτό είναι σχεδόν πάντα μια ακριβής τιμή. Τα λανθασμένα αποτελέσματα συνήθως εξαρτώνται από τον ανθρώπινο παράγοντα (ακατάλληλη αποθήκευση ή μη συμμόρφωση με τους κανόνες της διαδικασίας). Όταν ο κανόνας, το αποτέλεσμα είναι αρνητικό. Πριν από τη δοκιμή, δεν υπάρχουν ειδικοί κανόνες, πάρτε μόνο αίμα από τη φλέβα.

Εάν βρεθεί, πραγματοποιήστε μια ποσοτική ανάλυση (ιικό φορτίο) - δίνει αριθμητικές τιμές: πόσο RNA του ιού της ηπατίτιδας είναι σήμερα στον προδιαγεγραμμένο όγκο του υλικού δοκιμής. Με την ενεργό ανάπτυξη της λοίμωξης, μπορεί να βρεθεί στο μολυσμένο άτομο για 1-2 εβδομάδες. Το αίμα επίσης εξετάζεται συνήθως επειδή οι παράγοντες που κυκλοφορούν ελεύθερα.

Χαρακτηριστικά της ποσοτικής ανάλυσης PCR

Η διαφορά της ποσοτικής ανάλυσης είναι ότι δεν περνούν όλοι. Ποιοτική - καθορίζει την παρουσία και την ποσότητα - βοηθά να επιβεβαιώσει το συμπέρασμα του «ιού της ηπατίτιδας C», την πρόγνωση της νόσου και να καθορίσει την πορεία της θεραπείας. Πόσο αποτελεσματική θεραπεία, ανάλογα με τον αριθμό των RNA πριν και κατά τη διάρκεια της θεραπείας. Επίσης, χρησιμοποιείται για τον προσδιορισμό της δοσολογίας των φαρμάκων.

Ενδείξεις

Κατά κανόνα, παράγεται πριν από την έναρξη της ανάκαμψης. Οι κύριες ενδείξεις μπορούν να είναι:

  • τον ορισμό του ιικού φορτίου και τον έλεγχο της αντιιικής θεραπείας.
  • Ποιοτική PCR έδειξε αντισώματα ηπατίτιδας C.
  • εύρεση οξείας και χρόνιας ηπατίτιδας C.
  • την ύπαρξη μικτής ηπατίτιδας.
  • κατά τον προγραμματισμό της θεραπείας.
  • αν μια ποιοτική μελέτη εξακολουθεί να βρίσκει την παρουσία της νόσου μετά τη δωδέκατη εβδομάδα της θεραπείας.

Δείτε επίσης το είδος του ιικού φορτίου για ηπατίτιδα: η χαμηλή θεραπεία είναι επιτυχής. αυξημένη - η θεραπεία δεν είναι αποτελεσματική και πρέπει να αλλάξει.

Τι γίνεται σε διαφορετικά στάδια της νόσου;

Σε διαφορετικές φάσεις της ασθένειας, η μελέτη διεξάγεται για να ανασκοπήσει τα οφέλη της θεραπείας και να προγραμματίσει τη διάρκεια της περαιτέρω εφαρμογής της. Με καλές απαντήσεις στη θεραπεία, συντομεύεται. Διαφορετικά, με αργή απόσυρση του ιού, η πορεία της θεραπείας παρατείνεται. Η PCR για ηπατίτιδα γίνεται στις 1,4, 12, 24 εβδομάδες θεραπείας. Όταν οι δείκτες δεν πέσουν μετά από 12 εβδομάδες, καταλήγουν στο συμπέρασμα ότι η θεραπεία δεν είναι κατάλληλη για αυτόν τον οργανισμό. Αυτή η ανάλυση χρησιμοποιείται για να καθορίσει πόσο ενεργός είναι η μόλυνση και πόσο πιθανό είναι να μεταδοθεί. Για παράδειγμα, κατά την εγκυμοσύνη, υπάρχει κίνδυνος μόλυνσης ενός μωρού. Μετά τη θεραπεία, εντοπίζεται ο κίνδυνος υποτροπής.

Επεξήγηση

Μετά τη μελέτη, η ανάλυση μπορεί να αποκρυπτογραφηθεί όχι σε αριθμούς, αλλά με τις λέξεις: "κάτω από την περιοχή μέτρησης" και "δεν ανιχνεύεται". Η ποσοτική PCR είναι πιο ευαίσθητη στην ποιότητα. Το συμπέρασμα "δεν βρέθηκε" μπορεί να πει ότι η λοίμωξη δεν βρέθηκε. "Κάτω από το εύρος μέτρησης" - η δοκιμή δεν εντοπίστηκε από τον ιό, αλλά είναι σε μικρή ποσότητα. Σε αυτή την περίπτωση, κάντε μια δεύτερη μελέτη.

Ιογενές φορτίο - προσδιορισμός του αριθμού του μολυσματικού RNA στον καθορισμένο όγκο αίματος (ποσοτικά 1 ml = 1 κυβικό εκατοστό). Διατυπώνεται σε διεθνείς μετρήσεις ME / ml. Τα μεμονωμένα εργαστήρια ορίζουν αντίγραφα / ml. Η αποκρυπτογράφηση της μετάφρασης των συνιστωσών στις διεθνείς αξίες, τα διαφορετικά συστήματα δοκιμών μπορούν με τον δικό τους τρόπο. Πίνακας 1. Αποκωδικοποίηση της ποσοτικής ανάλυσης του RNA του ιού

Ο κανόνας της ποσοτικής ανάλυσης για την ηπατίτιδα C

Όταν ένα άτομο είναι υγιές, ο κανόνας είναι - "δεν βρέθηκε". Πληγέντες κανόνας θα μειωθεί σε δοσολογία των αποτελεσμάτων ιού σε μια λογαριθμική μονάδα, η οποία εκδηλώνεται να μειώσει τον αριθμό των μηδενικών στην ανάλυση από ένα (π.χ., 1 * 106 IU / ml έως 1 * 105 IU / ml). ιός Πλαίσια εύρος συγκέντρωσης που καθορίζει το θερμικό ανακυκλωτή βρίσκονται στα σύνορα 102 1.8 * - 2.4 * 107 IU / ml. Η ερμηνεία του αποτελέσματος:

  • χαμηλή συγκέντρωση - από 600 IU / ml έως 3 * 104 IU / ml.
  • μέσος όρος - από 3 * 104 IU / ml έως 8 * 105 IU / ml.
  • Υψηλότερα από 8 * 105 IU / ml.
Επιστροφή στα περιεχόμενα

Αποκλίσεις

Εάν τα αποτελέσματα των αναλύσεων αλλάξουν εκτός του κανόνα, αυτό μπορεί να υποδεικνύει την επιστροφή της νόσου και την αναπαραγωγή του ιού. Μερικοί παράγοντες μπορούν να επηρεάσουν την παραλαβή ενός αναξιόπιστου αποτελέσματος, για παράδειγμα, τη μόλυνση των δειγμάτων. η παρουσία ηπαρίνης στο αίμα και των ουσιών που επιβραδύνουν τη δράση των συστατικών PCR. εργαστηριακά σφάλματα. μη συμμόρφωση με τη δοκιμή.

Επίσης, το αποτέλεσμα σε διάφορα εργαστήρια μπορεί να ποικίλει, ίσως υπήρξε μια διαφορετική ερευνητική μεθοδολογία. Για να μάθουμε πόσο επηρεάζεται το ήπαρ και ο κίνδυνος της νόσου, δεν αρκεί να ποσοτικοποιήσουμε την PCR της ηπατίτιδας. Επιπλέον, διεξάγονται βιοχημικές διαδικασίες και βιοψία.

Κατά τον προγραμματισμό της θεραπείας, ο ιός είναι γονότυπος. Λόγω του γεγονότος ότι η ηπατίτιδα C είναι σε θέση να αλλάξει, υπάρχουν πολλές ομάδες. Για διαφορετικούς τύπους θεραπείας μπορεί να διαφέρουν. Υπάρχουν περιπτώσεις όπου υπάρχουν πολλά είδη, αλλά η ανάλυση βρίσκει ένα, το οποίο επικρατεί. Στη συνέχεια, η δοκιμή θα επαναληφθεί.

Τα πλεονεκτήματα της μεθόδου

Η τεχνική PCR καθιστά δυνατή τη γνωμοδότηση και τη συνταγογράφηση της σωστής θεραπείας. Πλεονεκτήματα της μεθοδολογίας:

  • Η ταχύτητα των αποτελεσμάτων δεν απαιτεί τη διάκριση και την καλλιέργεια του είδους του παθογόνου. Η αυτοματοποίηση της διαδικασίας σας επιτρέπει να επεξεργαστείτε και να μελετήσετε το υλικό με αποτέλεσμα σε 4-5 ώρες.
  • Η αμεσότητα του προσδιορισμού του παθογόνου - η εξεύρεση ειδικού τμήματος του DNA, δείχνει άμεσα την παρουσία της νόσου. Για παράδειγμα, η ELISA - βρίσκει δείκτες πρωτεϊνών (τα προϊόντα της ζωής των βακτηριδίων), που δεν παρέχουν ακριβή επιβεβαίωση της παρουσίας της νόσου.
  • Ειδικότητα - εξετάζεται μια ουσία που είναι ειδική για ένα συγκεκριμένο παθογόνο, η οποία αποκλείει την αντίδραση σε ψευδείς συν-αντιδραστικούς παράγοντες.
  • Ευαισθησία - μπορεί να εντοπίσει τον μικρότερο αριθμό ιών.
  • Η καθολικότητα - βασίζεται στην εύρεση θραυσμάτων DNA ή RNA συγκεκριμένων οργανισμών. Αυτό καθιστά δυνατή τη διεξαγωγή διαγνωστικών για όλους τους παράγοντες από ένα βιοϋλικό, αν άλλες μέθοδοι είναι ανίσχυρες.
  • Αποκαλύπτει όχι μόνο προφανείς, αλλά και κρυμμένες λοιμώξεις - είναι αποτελεσματική για τη μελέτη παραγόντων που είναι δύσκολα καλλιεργημένοι, δεν καλλιεργούνται, είναι επίμονοι.
  • https://www.youtube.com/watch?v=lBi-d6jAKxQ

Μέσω αυτής της έρευνας, κάθε άτομο μπορεί να διαγνωστεί με μια διάγνωση της απουσίας της νόσου. Αλλά για αξιόπιστα γεγονότα πρέπει να ακολουθήσετε τις οδηγίες. PCR χρησιμοποιείται σε διάφορους τομείς: εγκληματολογία, πατρότητας, για τη διάγνωση διαφόρων ιών, για την ανίχνευση αλλεργιών σε φάρμακα, γονιδιακή κλωνοποίηση, μεταλλαξογένεση, καθορισμό αλληλουχίας DNA.

Ποικιλίες και αναγκαιότητα χρήσης μελετών PCR

Ο ιός της ηπατίτιδας C είναι ένας ιός που περιέχει ένα μόριο RNA. Είναι σε θέση να αποφύγει την ανοσολογική απόκριση του σώματος λόγω των υψηλών ικανοτήτων μετάλλαξης. Υπάρχουν έξι κύριοι γονότυποι του ιού και πολλών υποτύπων. Στην περιοχή μας, είναι γενικά 1, 2 και 3 γονότυποι.

Σε 75-80% της νόσου πηγαίνει σε μια χρόνια μορφή, η οποία προκαλεί ηπατική ίνωση - μια κατάσταση στην οποία ο ήπατος ιστός αντικαθίσταται με συνδετικό ιστό. Η ίνωση, με τη σειρά της, οδηγεί σε καρκίνο ή κίρρωση. Ο κύριος τρόπος μετάδοσης της νόσου είναι μέσω του αίματος. Εάν ένα άτομο έχει ένδειξη για δοκιμή για ηπατίτιδα C, διεξάγονται δύο βασικές δοκιμές. Προσδιορίστε τα αντισώματα στον ιό και, ελλείψει αυτών, πιστεύεται ότι δεν έχει ηπατίτιδα. Εάν η παρουσία αντισωμάτων στον ιό της ηπατίτιδας ανιχνεύεται στο αίμα, πραγματοποιείται η ανάλυση PCR.

Το RNA αυτή η μέθοδος προσδιορίζεται στο αίμα ήδη 10-12 ημέρες μετά τη μόλυνση και υποδεικνύει ότι ο ιός πολλαπλασιάζεται ενεργά στον οργανισμό. Κατά τη διάρκεια αυτής της περιόδου, είναι απλώς αδύνατο να ανιχνευθεί ένας ιός με άλλο τρόπο, δεδομένου ότι δεν παράγει ακόμη ειδικά αντισώματα και οι αλλοιώσεις του ήπατος εξακολουθούν να είναι αόρατες σε βιοχημικές αναλύσεις και βιοψίες.

Ποικιλίες έρευνας χρησιμοποιώντας τη μέθοδο PCR

Η ανάλυση με αλυσιδωτή αντίδραση πολυμεράσης έχει ορισμένα πλεονεκτήματα:

  1. Με μια τέτοια μελέτη, ο ίδιος ο ιός καθορίζεται, όχι τα προϊόντα της ζωτικής δραστηριότητας του. Στην περίπτωση αυτή, είναι δυνατόν να προσδιοριστεί ο τύπος του παθογόνου παράγοντα.
  2. Η τεχνική έχει μεγάλη εξειδίκευση εξαιτίας του γεγονότος ότι εξετάζεται μόνο μια συγκεκριμένη περιοχή DNA, αλλά μειώνεται η πιθανότητα απόκτησης λανθασμένων αποτελεσμάτων.
  3. Έχει πολύ υψηλή ευαισθησία, ανιχνεύεται ακόμη και μια ελάχιστη ποσότητα ιού στο αίμα.

Υπάρχουν δύο κύριες μέθοδοι ανάλυσης αίματος για την ηπατίτιδα C με PCR: ποιοτική και ποσοτική ανάλυση PCR. Χρησιμοποιείται μια ποιοτική μέθοδος για τον προσδιορισμό της παρουσίας ενός ιού. Σε όλους όσοι είχαν αντισώματα στην ηπατίτιδα στο αίμα τους, γίνεται ανάλυση. Το αποτέλεσμα μπορεί να είναι μόνο δύο τύπων: "ανιχνεύεται" και "δεν ανιχνεύεται", η τελευταία τιμή θεωρείται ο κανόνας.

Ένα θετικό αποτέλεσμα της δοκιμής σημαίνει ότι στο δείγμα βρέθηκαν θραύσματα του RNA του ιού, πράγμα που με τη σειρά του υποδεικνύει ότι το άτομο έχει μολυνθεί από ηπατίτιδα. Σε περίπτωση αρνητικού αποτελέσματος, είναι δυνατές δύο επιλογές: δεν υπήρξε μόλυνση ή η συγκέντρωσή της είναι τόσο χαμηλή που δεν ανιχνεύεται από αυτήν την τεχνική.

Η ποσοτική μέθοδος διαφέρει ουσιαστικά στη μελέτη, σύμφωνα με τα καθήκοντά της και τις ενδείξεις. Όλοι οι ασθενείς με ηπατίτιδα δεν υποβάλλονται σε τέτοια ανάλυση. Ο ίδιος, όπως οποιοσδήποτε άλλος, έχει συγκεκριμένους στόχους. Προσδιορίζεται ιικό φορτίο ή ποσοτική ανάλυση της PCR στο RNA του ιού:

  • για τον προσδιορισμό του RNA του ιού στο αίμα και τη διάγνωση της "ιογενούς ηπατίτιδας".
  • για την πρόβλεψη της χρόνιας ηπατίτιδας και της πορείας της νόσου.
  • για την παρακολούθηση της αντιιικής θεραπείας και για να αποφασίσει αν θα παραταθεί, να μειώσει ή να αλλάξει την τακτική της θεραπείας.

Η μελέτη διεξάγεται εάν υπάρχουν τέτοιες ενδείξεις:

  • η ηπατίτιδα C ανιχνεύεται στην ποιοτική έρευνα και τα αντισώματα βρίσκονται στο αίμα.
  • με μικτή ηπατίτιδα.
  • εάν έχει προγραμματιστεί αντιιική θεραπεία.
  • κατά τη διάρκεια και μετά τη θεραπεία για την ηπατίτιδα C.
  • παρουσία χρόνιας και οξείας ηπατίτιδας C.

Η δοκιμή εκτελείται για να εκτιμηθεί ο αριθμός μονάδων του ιού σε δεδομένο όγκο δείγματος αίματος 1 cm3 ή 1 ml. Τα αποτελέσματα δίνονται σε αριθμούς. Οι δείκτες χρησιμοποιούνται: IU / ml, που σημαίνει τη διεθνή μονάδα ανά χιλιοστόλιτρο και αντίγραφα ανά ml, τον αριθμό αντιγράφων του RNA σε δείγμα 1 ml. Όσο υψηλότερος είναι ο ποσοτικός δείκτης της ανάλυσης, τόσο μεγαλύτερη είναι η πιθανότητα μετάδοσης του ιού σε άλλο άτομο.

Το Ρ-ϋΝΑ είναι μια μέθοδος διακλαδισμένου ϋΝΑ. Πιο απλή και ανέξοδη μέθοδος. Χρησιμοποιείται για περισσότερα δείγματα, έχει χαμηλή ευαισθησία, από 500 IU / ml. Με τέτοια ευαισθησία, είναι πιθανό να μην εντοπιστεί ο ιός, ακόμη και αν υπάρχει στο αίμα.

Το ΤΜΑ είναι μια μέθοδος μεταγραφικής ενίσχυσης. Αυτή η τεχνική αποκαλύπτει τα νουκλεϊνικά οξέα στο αίμα. Έχει ένα χαμηλό κόστος και την ίδια υψηλή ευαισθησία, από 5-10 IU / ml. Μια σχετικά νέα τεχνική που επιτρέπει την επιτάχυνση και τη μείωση του κόστους των δοκιμών.

Τα αποτελέσματα της ποσοτικής ανάλυσης του προσδιορισμού του RNA του ιού, που παρουσιάζεται από το εργαστήριο, ερμηνεύονται ως εξής:

Ποσοτική ανάλυση της PCR για την ηπατίτιδα C

Υπάρχουν πολλοί υποτύποι του HCV, γι 'αυτό δεν είναι πάντοτε δυνατό να επιλέγονται αποτελεσματικά αντιιικά φάρμακα και να επιτυγχάνονται τα επιθυμητά αποτελέσματα στη θεραπεία. Η ποικιλία των παθογόνων οφείλεται στην ικανότητά τους να αλλάζουν τη δομή τους, δηλαδή να μεταλλάσσονται. Ως αποτέλεσμα, η ανοσία δεν έχει χρόνο για να σχηματίσει ισχυρή απόκριση έναντι παθογόνου παράγοντα και τα φάρμακα είναι αναποτελεσματικά.

Συχνά, η ηπατίτιδα διαγιγνώσκεται στο στάδιο της κίρρωσης, η οποία προδιαθέτει αργότερα την ανίχνευση της νόσου λόγω έλλειψης κλινικών συμπτωμάτων. Μόνο μέσω εργαστηριακών εξετάσεων μπορεί να ανιχνευθεί HCV κατά την περίοδο επώασης.

Η ποσοτική ανάλυση για την ηπατίτιδα C καθιστά εφικτό όχι μόνο να διαπιστωθεί η παρουσία του παθογόνου στο αίμα, αλλά και να υπολογιστεί η συγκέντρωσή του.

Συστάσεις για την προετοιμασία της ανάλυσης

Δεν απαιτείται ειδική προετοιμασία για εργαστηριακή διάγνωση. Αρκεί να τηρήσετε τις ακόλουθες συστάσεις:

  1. η ποσοτική ανάλυση πραγματοποιείται με άδειο στομάχι, με το τελευταίο γεύμα - 8 ώρες πριν από το δείγμα αίματος.
  2. για δύο ημέρες πρέπει να εγκαταλειφθεί αλκοόλ και "βαριά" πιάτα?
  3. Τα φάρμακα που λαμβάνει ο ασθενής έχουν ιδιαίτερη σημασία. Μπορούν να επηρεάσουν το αποτέλεσμα της μελέτης, οπότε ο γιατρός θα πρέπει να το γνωρίζει.

Επίσης, οι βαρειές σωματικές προσπάθειες και οι φυσιοθεραπευτικές διαδικασίες την παραμονή της δειγματοληψίας αίματος δεν είναι επιθυμητές. Για να αποκρυπτογραφήσετε την ποσοτική ανάλυση για την ηπατίτιδα C αποδείχθηκε αξιόπιστη, μην παραμελούν τις παραπάνω συστάσεις.

Συχνά ο ασθενής λαμβάνει το αποτέλεσμα της ανάλυσης σε μια μέρα. Η τιμή της δοκιμής για τον προσδιορισμό της συγκέντρωσης του παθογόνου στο αίμα εξαρτάται από το εργαστήριο και την ποιότητα των αντιδραστηρίων και μπορεί να φτάσει τα 4.000 ρούβλια.

Εργαστηριακή διάγνωση ηπατίτιδας C

Μεταξύ των κύριων διαγνωστικών μεθόδων είναι η ELISA, ή με άλλο τρόπο μια ενζυμική ανοσοπροσροφητική δοκιμασία. Αποδίδεται για την ανίχνευση ειδικών αντισωμάτων έναντι του HCV. Η αποτελεσματικότητά του φθάνει το 95%. Εάν το αντίγραφο της μελέτης δίνει ένα θετικό αποτέλεσμα, αξίζει να υποψιάζεστε την παρουσία ενός παράγοντα στο αίμα.

Θα πρέπει να σημειωθεί ότι τα μισά από τα άτομα που εξετάστηκαν με μια δοκιμασία "+" κατά τη διάρκεια της περαιτέρω διάγνωσης δεν ανιχνεύουν έναν ιικό παράγοντα στο αίμα. Η ELISA σε αυτή την περίπτωση υποδεικνύει προηγούμενη επαφή με HCV στο παρελθόν, η οποία επιβεβαιώνεται από κυκλοφορούντα αντισώματα.

Μια ακριβέστερη μελέτη είναι μια αλυσιδωτή αντίδραση πολυμεράσης, ή αλλιώς PCR. Επιτρέπει τον προσδιορισμό της συγκέντρωσης του RNA του παθογόνου στο αίμα. Έχοντας ανακαλύψει το γενετικό σύνολο του ιού σε βιολογικό υλικό, ο γιατρός επιβεβαιώνει την ηπατίτιδα C.

Η PCR αποδίδεται στον ασθενή για να επαληθεύσει τη διάγνωση. Αυτό καθιστά δυνατή την ταυτοποίηση του RNA σε ένα στάδιο όπου τα αντισώματα δεν είναι ακόμη διαθέσιμα. Υπάρχουν διάφοροι τύποι γενετικών μελετών:

  1. μια ποσοτική ανάλυση της PCR για την ηπατίτιδα C, η οποία όχι μόνο καθιερώνει την παρουσία του παθογόνου στο αίμα αλλά παρέχει επίσης πληροφορίες για τη συγκέντρωσή της.
  2. ποιότητα - επιβεβαιώνει τη μόλυνση.
  3. ο γονότυπος - επιτρέπει τον προσδιορισμό του γονότυπου ενός παθογόνου παράγοντα και την επιλογή των πλέον αποτελεσματικών φαρμάκων εναντίον του.

Αλυσιδωτή αντίδραση πολυμεράσης

Όπως ήδη αναφέρθηκε, υπάρχουν διάφοροι τύποι εργαστηριακής έρευνας:

  • ποιοτική ανάλυση - υποδεικνύει την παρουσία παθογόνου παράγοντα στο αίμα. Αυτός ο τύπος διάγνωσης έχει ένα ορισμένο "επίπεδο απόκρισης", οπότε δεν είναι πάντα αξιόπιστο. Προκειμένου να αποκρυπτογραφηθούν σωστά τα αποτελέσματα και να ληφθούν πραγματικοί δείκτες, συνιστάται η χρήση ενός συστήματος δοκιμών με ευαισθησία τουλάχιστον 50 IU / ml για τη μελέτη. Ο κανόνας της ανάλυσης είναι μια "αρνητική απάντηση" ή "ο ιός δεν ανιχνεύεται". Αυτό δείχνει την έλλειψη ενός γενετικού συνόλου παθογόνων στο υλικό δοκιμής. Αν το αποτέλεσμα ήταν θετικό, απαιτείται περαιτέρω εξέταση του ασθενούς.
  • η ποσοτική ανάλυση της PCR για την ηπατίτιδα C καθορίζει το ιικό φορτίο, δηλαδή τη συγκέντρωση του παθογόνου παράγοντα στο αίμα. Το αποτέλεσμα της μελέτης δείχνει τον αριθμό μονάδων RNA σε σταθερό όγκο του βιολογικού υγρού.

Το ιικό φορτίο είναι η καταμέτρηση του μολυσματικού RNA σε ένα χιλιοστόλιτρο αίματος του ερευνητή. Οι μονάδες μέτρησης είναι ME / ml, αλλά ορισμένα εργαστήρια προσδιορίζουν "αντίγραφα / ml", ενώ δείχνουν το κενό του προτύπου ανάλυσης για σύγκριση και αξιολόγηση των αποτελεσμάτων.

  • γονοτυπία. Λόγω της ικανότητας του παθογόνου να αλλάξει την επιλογή των αποτελεσματικών αντιιικών φαρμάκων για τη θεραπεία θα πρέπει να βασίζεται στον γονοτύπο του. Εξαρτάται όχι μόνο από το αποτέλεσμα, αλλά και από τη διάρκεια της θεραπείας. Έτσι, η ηπατίτιδα HCV 1 απαιτεί φάρμακα για ένα χρόνο, αλλά μόνο το 60% των περιπτώσεων παρουσιάζει θετική δυναμική. Όσον αφορά τον δεύτερο και τον τρίτο γονότυπο, είναι λιγότερο ανθεκτικοί στη δράση αντιιικών παραγόντων, γι 'αυτό και η αποτελεσματικότητα της θεραπείας υπερβαίνει το 85%. Όταν αποκτάται ένα τέτοιο αποτέλεσμα της έρευνας - "ο ιός δεν πληκτρολογείται", αξίζει να υποψιαστεί την παρουσία ενός παράγοντα που δεν αναγνωρίζεται από τα τυποποιημένα συστήματα δοκιμών.

Ενδείξεις για ανάλυση

Η ερμηνεία της ποσοτικής ανάλυσης για την ηπατίτιδα C είναι απαραίτητη για:

  1. περαιτέρω εξέταση του ασθενούς, όταν ανιχνεύθηκαν αντισώματα κατά του HCV με ELISA.
  2. επιβεβαίωση διάγνωσης ·
  3. καθιέρωση του ιικού φορτίου σε περίπτωση μικτής μόλυνσης, όταν ένα άτομο έχει μολυνθεί με διάφορους τύπους παθογόνων παραγόντων ·
  4. καθορισμός τακτικών θεραπείας (επιλογή αντιιικών φαρμάκων, αντικατάσταση ή ολοκλήρωση της θεραπείας).
  5. αξιολογεί τη δυναμική της εξέλιξης της νόσου, καθώς και την αποτελεσματικότητα των ναρκωτικών ·
  6. προσδιορισμός του σταδίου της παθολογίας (οξεία, χρόνια).

Η PCR έχει τα ακόλουθα πλεονεκτήματα:

  1. καλή ευαισθησία, χάρη στην οποία είναι δυνατή η μέτρηση ακόμη και μιας μικρής ποσότητας του ιού.
  2. τον προσδιορισμό του ίδιου του παθογόνου (RNA), όχι αντιγόνων,
  3. ειδικότητα της τεχνικής - δημιουργία συγκεκριμένου τύπου παθογόνου παράγοντα ·
  4. η ταχύτητα απόκτησης των αποτελεσμάτων, επειδή για την ανάλυση δεν απαιτείται καλλιέργεια των καλλιεργειών σε ένα θρεπτικό μέσο. Η απάντηση είναι έτοιμη σε 5 ώρες.
  5. καθολικότητα - επιτρέπει τον εντοπισμό ενός γενετικού συνόλου διαφόρων παθογόνων, τόσο RNA όσο και DNA που περιέχει (ηπατίτιδα Β).
  6. ανίχνευση λανθάνουσας μόλυνσης.

Ένας εργαστηριακός έλεγχος βοηθά στην επιβεβαίωση της διάγνωσης και αποτελεί αναπόσπαστο μέρος μιας περιεκτικής εξέτασης (ανάλυση κλινικών συμπτωμάτων, αποτελέσματα ELISA και βιοχημείας).

Επιπλέον, η PCR χρησιμοποιείται ευρέως στην αλλεργιολογία, τη γενετική, καθώς και για να διαπιστώσει το γεγονός της πατρότητας.

Αποκωδικοποίηση της ποσοτικής ανάλυσης για τον ιό της ηπατίτιδας C

Η αξιολόγηση των αποτελεσμάτων της εργαστηριακής διάγνωσης εκτελείται από ιατρό, συγκρίνοντας τα δεδομένα που λαμβάνονται με τον κανόνα.

Medinfo.club

Πύλη για το ήπαρ

Ποσοτική ανάλυση του HCV και της ερμηνείας του

Η ηπατίτιδα C είναι μια ασθένεια που μπορεί να αναπαραχθεί σε υγιή ηπατικά κύτταρα και να προκαλέσει πολλαπλασιαστικές ασθένειες. Στο σημερινό κόσμο, όταν ο ιός της ηπατίτιδας Β ήταν συγκεκριμένη μετάλλαξη, το ανθρώπινο ανοσοποιητικό σύστημα βρίσκεται υπό απειλή, σε σύγκριση με τη μόλυνση, είναι αμελητέα. Αξίζει επίσης να σημειωθεί ότι δεν θα έχουν όλοι οι ασθενείς τα πρώτα σημάδια της νόσου, ειδικά στα πρώιμα στάδια.

RNA ανάλυση του ιού της ηπατίτιδας C - μια ποσοτική μελέτη, ο ρυθμός της οποίας είναι η παρουσία μιας μέτριας ποσότητας του ιού στα κύτταρα του αίματος του ασθενούς. Σύμφωνα με στατιστικά στοιχεία, περίπου το 31% των ασθενών θεραπεύονται πλήρως από αυτή την ασθένεια, εάν βρίσκεται στο αρχικό στάδιο.

Στην ιατρική πρακτική, οι γιατροί λένε ότι 4 εκατομμύρια μολυσμένα συμπτώματα και τα πρώτα σημάδια δεν φαίνονται, αν και οι προηγμένες μορφές ηπατίτιδας μπορεί να οδηγήσει σε κίρρωση ή καρκίνο.

Επί του παρόντος, κατά τη διάρκεια της διαδικασίας «μετάγγιση αίματος», αυτό το αίμα ελέγχεται για την παρουσία του ιού της ηπατίτιδας C, καθώς η νόσος μεταδίδεται μέσω των μεταγγίσεων αίματος.

Μέχρι σήμερα, ο κόσμος έχει ήδη προκύψει φάρμακα για την ηπατίτιδα C με απόδοση κοντά στο 100% Σύγχρονη βιομηχανία έχει καθιερώσει τις φαρμακευτικές φάρμακα που έχουν μικρή ή καθόλου παρενέργειες. Πολλοί ασθενείς λαμβάνουν τα πρώτα αποτελέσματα με τη μορφή ανακούφισης των συμπτωμάτων και μείωσης του ιικού φορτίου μετά από μια εβδομάδα λήψης. Διαβάστε περισσότερα για τα παρασκευάσματα από την ηπατίτιδα από την ινδική κατασκευή στο ξεχωριστό άρθρο μας.

Στην αγορά των εταιρειών για τη μεταφορά της ινδικής ιατρικής για την ηπατίτιδα C "Sofosbuvir Express" έχει αποδειχθεί. Αυτή η εταιρεία βοηθάει τους ανθρώπους να ανακάμψουν από την ασθένεια περισσότερο από 2 χρόνια. Σχόλια και βίντεο ικανοποιημένων ασθενών μπορείτε να δείτε εδώ. Αντιπροσωπεύουν περισσότερους από 4.000 ανθρώπους που ανακτήθηκαν λόγω αγορασμένων φαρμάκων. Μην καθυστερείτε την υγεία σας σε ένα μακρύ κουτί, πηγαίνετε στο www.sofosbuvir-express.com ή καλέστε τον αριθμό 8-800-200-59-21

Τύποι μελετών PCR

Η PCR (αλυσιδωτή αντίδραση πολυμεράσης) είναι η πιο σύγχρονη και αποτελεσματική μέθοδος για τη μελέτη του γονιδίου του ιού και των δυνατοτήτων του. Τέτοια διαγνωστικά μπορούν να καθορίσουν μια ποικιλία της νόσου και να καθορίσουν την περαιτέρω μετάλλαξη στο σώμα του ασθενούς.

Η ανάλυση πραγματοποιείται λαμβάνοντας αίμα, το οποίο στη συνέχεια τοποθετείται σε ειδικά αντιδραστήρια, στα οποία πραγματοποιείται η κλωνοποίηση των κυττάρων.

Δύο κελιά παράγονται από ένα κελί, και ούτω καθεξής. Ως αποτέλεσμα, εμφανίζονται εκατοντάδες DNA, χάρη στις οποίες είναι δυνατή η διάγνωση του παθογόνου και η ταυτοποίηση του ιού σε πρώιμο στάδιο.

Επομένως, η PCR διαιρείται σε διάφορους τύπους:

  • ποιοτική ανάλυση - αναγνωρίζει τα γονίδια μιας λοίμωξης στο αίμα. Εάν ένας ασθενής επιβεβαιωθεί για ποιοτική ανάλυση, θα πρέπει να γίνει ποσοτική ανάλυση για τον προσδιορισμό του βαθμού μόλυνσης. Ως αποτέλεσμα αυτού του διαγνωστικού ελέγχου, οι ειδικοί γράφουν "ανίχνευση / ανίχνευση". "Ανακαλύφθηκε" - υποδηλώνει ότι η ασθένεια υπάρχει στο σώμα και το RNA της έχει ήδη ανιχνευθεί. "Δεν ανιχνεύεται" υποδηλώνει ότι δεν υπάρχει γονίδιο ιού στο δείγμα, δηλαδή, δεν υπάρχει ηπατίτιδα RNA. Αλλά οι γιατροί συνιστούν να πραγματοποιήσουν μια δεύτερη μελέτη μετά από 10 ημέρες.
  • ποσοτική ανάλυση - καθορίζει την ποσότητα του γενετικού υλικού της λοίμωξης στο αίμα. Τέτοια διαγνωστικά βοηθούν στην εξακρίβωση της σοβαρότητας της νόσου και ολόκληρου του κλινικού ιστορικού. Ως αποτέλεσμα μιας τέτοιας ανάλυσης, μπορεί να γραφτεί μόνο "Θετικό / Αρνητικό / Άκυρο". "Θετικό" - απεικονίζει το μολυσματικό φορτίο. Γιατρό ένα μέθοδο διάγνωσης της ασθένειας ορισθέντα για να προσδιοριστεί η αποτελεσματικότητα της θεραπείας στους 4, 12, 16 και 24 εβδομάδες bolezni.Esli συστατικό του ιού είναι στην περιοχή 8h10t IU / ml, η θεραπεία είναι αποτελεσματική αν τις ανωτέρω παραμέτρους - όχι. "Αρνητικό" - δεν βρέθηκε το γονίδιο της λοίμωξης. «Μη έγκυρο» - αυτό συμβαίνει όταν το γονίδιο του ιού βρίσκεται στην ποιοτική, αλλά δεν προσδιορίζονται στην ποσοτική ανάλυση. Υπάρχει μια παρόμοια αν η μόλυνση είναι κάτω από το επίπεδο.

Διαφορές στις ποιοτικές και ποσοτικές αναλύσεις

Ο ιός της ηπατίτιδας C - εντοπίζεται κυρίως μέσω μιας ποσοτικής ανάλυσης, η αποκωδικοποίηση της οποίας είναι απαραίτητη για τη σωστή ερμηνεία της νόσου. Αλλά παρ 'όλα αυτά, η ποιοτική και ποσοτική μέθοδος διάγνωσης έχουν τις διαφορές τους, όπως ο ρόλος και τα καθήκοντα για την έρευνα - ποιοτικά - επιβεβαιώνει την παρουσία των λοιμώξεων μετά την ανακάλυψη των αντισωμάτων του ιού, και ποσοτικά - μια δευτερεύουσα μέθοδος διαψεύδοντας ή επιβεβαιώνοντας την ασθένεια, προκειμένου να κάνουν το σωστό και μόνο διάγνωση.

Επεξήγηση της ποσοτικής έρευνας

Μετά τη διάγνωση, μόνο οι γιατροί μπορούν να ερμηνεύσουν το αποτέλεσμα, αφού απεικονίζονται δεν θα πρέπει να είναι σε αριθμούς, αλλά με λέξεις. Σύμφωνα με στατιστικά στοιχεία, η ποσοτική PCR είναι η πιο ευαίσθητη ανάλυση. Για να κατανοήσουμε εάν ο ιός είναι παρών στο σώμα, είναι απαραίτητο να κατανοήσουν και να γνωρίζουν ότι η ποσοτική ανάλυση για την ηπατίτιδα C αποκρυπτογραφείται χρησιμοποιώντας ψηφιακής σήμανσης (πρότυπο) λοίμωξη:

HCV, RNA ποσοτικά [PCR σε πραγματικό χρόνο]

Μελέτη για την αναγνώριση του αιτιολογικού παράγοντα της ηπατίτιδας C (HCV), με τον οποίο με την μέθοδο της αλυσιδωτής αντίδρασης πολυμεράσης σε πραγματικό χρόνο (RT-PCR) προσδιορίζεται από την παρουσία του γενετικού υλικού του ιού (RNA) και ο όγκος του (το ιικό φορτίο) στο δείγμα αίματος.

Το HCV RNA μπορεί να ανιχνευθεί σε συγκέντρωση κάτω από το κατώτερο όριο της γραμμικής περιοχής συγκεντρώσεων. Το εύρος της γραμμικής συγκέντρωσης είναι το εύρος στο οποίο ο αριθμός των αντιγράφων του παθογόνου μπορεί να υπολογιστεί με ακρίβεια. Για την ανάλυση αυτή, η γραμμική περιοχή των συγκεντρώσεων του HCV DNA που προσδιορίζεται από τον ενισχυτή ανίχνευσης είναι 7,5 × 10 2 - 1,0 × 10 8 αντίγραφα / ml του δείγματος.

Ρωσικά συνώνυμα

Ο ιός της ηπατίτιδας C (HCV), ο ποσοτικός προσδιορισμός του RNA.

Συνώνυμα Αγγλικά

Ηπατίτιδας C RNA, ποσοτική, PCR σε πραγματικό χρόνο, αίμα, HCV ιικό φορτίο, ιό ηπατίτιδας C RNA Quant.

Μέθοδος έρευνας

Αλυσιδωτή αντίδραση πολυμεράσης με αντίστροφη μεταγραφή σε πραγματικό χρόνο.

Ποιο βιοϋλικό μπορεί να χρησιμοποιηθεί για έρευνα;

Πώς να προετοιμαστεί σωστά για τη μελέτη;

Μην καπνίζετε για 30 λεπτά προτού δώσετε αίμα.

Γενικές πληροφορίες σχετικά με τη μελέτη

Ο ιός της ηπατίτιδας C (HCV) είναι ένας ιός που περιέχει RNA από την οικογένεια Flaviviridae που επηρεάζει το ήπαρ. Είναι σε θέση να πολλαπλασιάζεται στα κύτταρα του αίματος (ουδετερόφιλα, μονοκύτταρα και μακροφάγα, λεμφοκύτταρα Β) και επάγουν κρυοσφαιριναιμία, νόσος του Sjogren και η νόσος του Β λεμφοϋπερπλαστικών κυττάρων. Ο HCV λόγω της υψηλής μεταλλακτικής δραστηριότητας είναι σε θέση να αποφύγει τις επιδράσεις των προστατευτικών μηχανισμών του ανοσοποιητικού συστήματος. Υπάρχουν 6 γονότυπους και πολλές υποτύπων που έχουν διαφορετικές τιμές για την πρόβλεψη της ασθένειας και της αποτελεσματικότητας της αντι-ιικής θεραπείας.

Ο κύριος τρόπος μετάδοσης της λοίμωξης είναι μέσω του αίματος (παρασκευάσματα για μετάγγιση αίματος και πλάσματος, όργανα δότη, μη αποστειρωμένες σύριγγες, βελόνες, εργαλεία για τατουάζ, διάτρηση). Πιθανώς μόλυνση κατά τη σεξουαλική επαφή και το παιδί από τη μητέρα κατά τη διάρκεια του τοκετού, αλλά αυτό συμβαίνει σπάνια.

Η οξεία ιογενής ηπατίτιδα, κατά κανόνα, χαρακτηρίζεται από μια ασυμπτωματική πορεία και παραμένει αδιάγνωστη στις περισσότερες περιπτώσεις. Μόνο το 15% της νόσου εμφανίζεται με οξεία προσβολή - ναυτία, πόνους στο σώμα, έλλειψη όρεξης και απώλεια βάρους (σπάνια συνοδεύεται από ίκτερο). Σε 60-85% των ατόμων που έχουν μολυνθεί αναπτύσσουν χρόνια μόλυνση, η οποία είναι 15 φορές υψηλότερη από τη συχνότητα της χρόνιας ηπατίτιδας Β Χρόνια ηπατίτιδα C λαμβάνει χώρα με αύξηση των ηπατικών ενζύμων και των φτωχών εκδήλωση των συμπτωμάτων. Σε 20-30% των ασθενών, η ασθένεια οδηγεί σε κίρρωση του ήπατος, αυξάνοντας τον κίνδυνο ηπατικής ανεπάρκειας και ηπατοκυτταρικού καρκίνου.

Η ανίχνευση του HCV RNA δείχνει τον πολλαπλασιασμό του ιού στο σώμα και είναι μια μέθοδος διάγνωσης της νόσου. Το γενετικό υλικό του ιού μπορεί να ανιχνευθεί με PCR σε 10-12 ημέρες μετά την μόλυνση - κατά την περίοδο αυτή, τα ειδικά αντισώματα τα οποία παράγονται σε αρκετούς μήνες μετά την μόλυνση, και καμία λειτουργία του ήπατος είναι εντός μιας περιοχής αναφοράς.

Με PCR, το RNA του ιού ανιχνεύεται ποιοτικά ή ποσοτικά. Λόγω της ποιοτικής μεθόδου επιβεβαιώνεται η παρουσία του ιού της ηπατίτιδας C και η ενεργός αναπαραγωγή του. Ο ποσοτικός προσδιορισμός του ιϊκού φορτίου λαμβάνοντας υπόψη τον HCV γονότυπο επιτρέπει τον έλεγχο της τρέχουσας θεραπείας και την πρόβλεψη της πορείας της νόσου.

Η αποτελεσματικότητα της θεραπείας εκτιμάται με την ποσότητα του RNA πριν και κατά τη διάρκεια της θεραπείας. Τυπικά, το ιικό φορτίο του αίματος μειώνεται αρκετές φορές κατά τους πρώτους τρεις μήνες επιτυχούς θεραπείας. Με αποτελεσματική θεραπεία, η ιαιμία μειώνεται κατά δύο τάξεις μεγέθους κατά τις πρώτες 4-12 εβδομάδες θεραπείας και μετά τη λήξη της πορείας της θεραπείας, το γενετικό υλικό του ιού στο αίμα δεν ανιχνεύεται. Η απουσία μείωσης της ιαιμίας μετά από 12 εβδομάδες από την έναρξη της θεραπείας υποδεικνύει την αναποτελεσματικότητά της. Συνιστάται η διεξαγωγή της ανάλυσης πριν από την έναρξη της θεραπείας, την 4η, 12η και 24η εβδομάδα θεραπείας και 24 εβδομάδες μετά το πέρας της θεραπείας. Η διάρκεια της θεραπείας και η συχνότητα ποσοτικού προσδιορισμού του RNA του ιού της ηπατίτιδας C εξαρτάται από τον γονότυπο του ιού και τον βαθμό της ηπατικής βλάβης.

Για ποια έρευνα χρησιμοποιείται;

  • Για να επιβεβαιώσετε τη διάγνωση της "ιογενούς ηπατίτιδας C".
  • Για την πρόβλεψη της πορείας της ιικής ηπατίτιδας C.
  • Παρακολούθηση της αντιιικής θεραπείας και αντιμετώπιση του προβλήματος των περαιτέρω τακτικών θεραπείας.

Πότε ανατίθεται η μελέτη;

  • Με ποιοτική ανίχνευση του RNA του ιού της ηπατίτιδας C.
  • Στην οξεία και τη χρόνια ιογενή ηπατίτιδα C.
  • Με μικτή ηπατίτιδα.
  • Κατά τον προγραμματισμό, κατά τη διάρκεια και μετά το τέλος της αντιιικής θεραπείας.

Τι σημαίνουν τα αποτελέσματα;

  • Δεν βρέθηκε - το RNA του ιού της ηπατίτιδας C δεν ανιχνεύθηκε ή η τιμή είναι κάτω από το όριο ευαισθησίας της μεθόδου (200 αντίγραφα / ml = 400 IU / ml).
  • αντίγραφα / ml (IU / ml) - το RNA του ιού της ηπατίτιδας C ανιχνεύθηκε. Χαμηλή ιαιμία (η ευνοϊκότερη πρόγνωση της πορείας της νόσου και η αποτελεσματικότητα της θεραπείας).
  • > 2 * 10 ^ 6 αντίγραφα / ml (> 4 * 10 ^ 6 IU / ml) - Ανιχνεύθηκε RNA του ιού της ηπατίτιδας C. Υψηλή ιαιμία.
  • > 1,0 * 10 ^ 8 αντίγραφα / ml (> 2 * 10 ^ 8 IU / ml) - Το RNA του ιού της ηπατίτιδας C ανιχνεύθηκε σε συγκεντρώσεις πάνω από το εύρος γραμμικής συγκέντρωσης.

Γραμμική συγκεντρώσεις RNA φάσμα HCV C προσδιορίζεται ανίχνευση θερμοκυκλοποιητή, ήταν 7,5 × 10 2 - 1,0 χ 10 8 αντίγραφα / ml (1,5 χ 10 3 - 2 10 8 IU / ml).

Τι μπορεί να επηρεάσει το αποτέλεσμα;

Ένα αναξιόπιστο αποτέλεσμα μπορεί να επιτευχθεί με:

  • μόλυνση βιοϋλικών ·
  • παρουσία στο δείγμα αναστολέων - χημικές και πρωτεϊνικές ουσίες που επηρεάζουν διάφορα συστατικά της PCR.
  • την παρουσία ηπαρίνης στο αίμα.

Σημαντικές σημειώσεις

  • Το επίπεδο του ιϊκού φορτίου του αίματος δεν υποδεικνύει το βαθμό της ηπατικής βλάβης και τη σοβαρότητα της νόσου. Για την αξιολόγησή τους είναι απαραίτητο να διερευνηθούν οι βιοχημικοί δείκτες και τα υλικά βιοψίας.
  • Κατά τον προγραμματισμό της θεραπείας είναι πολύ σημαντικό να προσδιοριστεί ο γονότυπος του ιού της ηπατίτιδας C.

Συνιστάται επίσης

Ποιος διορίζει τη μελέτη;

Λογοτεχνία

  • Vozianova Zh.I. Μολυσματικές και παρασιτικές ασθένειες: Σε 3 τόνους - Κ.: Υγεία, 2000. - Τ.1.: 600-690.
  • Kishkun ΑΑ Ανοσολογικές και ορολογικές μελέτες στην κλινική πρακτική. - M.: MIA LLC, 2006. - 471-476 p.
  • Αρχές εσωτερικής ιατρικής του Harrison. 16η έκδοση. Νέα Υόρκη: McGraw-Hill; 2005: 1822-1855.
  • Lerat Η, Rumin S, Habersetzer F και άλλοι. Ιη νίνο τροπισμός των γονιδιωματικών αλληλουχιών του ιού της ηπατίτιδας C σε αιματοποιητικά κύτταρα: η επίδραση του ιικού φορτίου, του ιικού γονότυπου και του κυτταρικού φαινοτύπου. Αίμα. 1998 15 Μαΐου 91 (10): 3841-9.PMID: 9573022.
  • Revie D, Salahuddin SZ. Ανθρώπινοι τύποι κυττάρων σημαντικοί για την αναπαραγωγή του ιού της ηπατίτιδας C in vivo και in vitro: παλαιά ισχυρισμοί και τρέχουσες αποδείξεις. Virol J. 2011 Jul 11, 8: 346. doi: 10.1186 / 1743-422Χ-8-346. PMID: 21745397.

Ανάλυση αντι-HCV, ποσοτική PCR, ποιοτική PCR

Η ερμηνεία των αποτελεσμάτων των εξετάσεων είναι μόνο για το γιατρό σας. Οι πληροφορίες σε αυτό το άρθρο δίνονται με σκοπό την εξοικείωση και δεν μπορούν να χρησιμοποιηθούν για αυτο-θεραπεία και αυτοδιάγνωση. Η ακριβής διάγνωση θα πρέπει να γίνει από το γιατρό σας (ηπατολόγο, λοιμώδη νοσήματα κ.λπ.).

Ανάλυση των αντι-HCV (αντισώματα έναντι των αντιγόνων του ιού της ηπατίτιδας C).

Αυτό δείχνει την παρουσία των αντισωμάτων (βαθμού Μ ή G) σε αντισώματα HCV της κατηγορίας Μ παράγονται από τον οργανισμό μετά από τέσσερις εβδομάδες μετά τη μόλυνση με ηπατίτιδα C.

Αντισώματα Το αντι-HCV δεν είναι ο ίδιος ο ιός. Αντισώματα - είναι μέρος του ανοσοποιητικού συστήματος που αρχίζει να παράγει για την καταπολέμηση του ιού, τη στιγμή που θα ανιχνεύει τον ιό στο σώμα. Τα αντισώματα που στην πλειοψηφία παραμένουν για τη ζωή, ανεξάρτητα από το αν το πρόσωπο που πήρε αντι-ιική θεραπεία ή όχι, και θα είναι πάντα θετικό! Έτσι το σύστημα ανοσοπροστασίας στους ανθρώπους είναι διευθετημένο.

Για να μάθετε για την παρουσία / απουσία του ίδιου του ιού της ηπατίτιδας C (HCV), είναι απαραίτητο να λάβετε:
Η ανάλυση της ηπατίτιδας C PCR (RNA ηπατίτιδας C, HCV RNA) είναι μια ποιοτική μελέτη.

Ανάλυση του RNA του HCV (προσδιορισμός του HCV RNA στο αίμα), που συχνά αναφέρεται απλά ως η ανάλυση PCR της ηπατίτιδας C είναι η μελέτη του αίματος, η οποία επιτρέπει την ταυτοποίηση της γενετικό υλικό απ 'ευθείας στον ιό της ηπατίτιδας Β (κάθε ιός - RNA είναι ένα σωματίδιο). Αυτή η δοκιμασία εκτελείται πιο συχνά με τη μέθοδο PCR, εξ ου και η ονομασία PCR της ηπατίτιδας C.

Ποιοτική ανίχνευση του RNA του HCV με PCR, HCV, RNA (PCR πραγματικού χρόνου).

Προσδιορισμός του RNA του ιού της ηπατίτιδας C στον ορό με αλυσιδωτή αντίδραση πολυμεράσης (PCR) με ανίχνευση σε πραγματικό χρόνο. Δείχνει εάν υπάρχει ή όχι ιός ηπατίτιδας C στο αίμα.

Παράδειγμα ερμηνείας του αποτελέσματος: "Δεν εντοπίστηκε / Αρνητικό".

Ποσοτικός προσδιορισμός του RNA του ιού της ηπατίτιδας C με PCR (ποσοτική PCR, ιικό φορτίο).

Προσδιορισμός του RNA του ιού της ηπατίτιδας C στον ορό με αλυσιδωτή αντίδραση πολυμεράσης (PCR) με ανίχνευση σε πραγματικό χρόνο. Προσδιορισμός του ιικού φορτίου (ποσότητα ιού στο αίμα) σε IU / Ml και αντίγραφα / Ml. Δείχνει αν υπάρχει ή όχι ιός της ηπατίτιδας C στο αίμα και, εάν υπάρχει, το ποσό του.

Παράδειγμα ερμηνείας του αποτελέσματος:

  • "Δεν ανιχνεύθηκε / αρνητικά": δεν ανιχνεύθηκε RNA ιού ηπατίτιδας C. Το αποτέλεσμα ερμηνεύεται ως «HCV RNA δεν ανιχνεύθηκε», «Ηπατίτιδας C αίμα ΟΧΙ»?
  • 10 ^ 8 IU / ml: το αποτέλεσμα είναι θετικό με συγκέντρωση RNA ιού ηπατίτιδας C μεγαλύτερη από 10 ^ 8 IU / ml.

Το αποτέλεσμα της διόδου της αντι-ιικής θεραπείας sofosbuvir + daklatasvirom (ledipasvirom, velpatasvirom) PCR θα πρέπει να ρυθμιστεί ώστε να «μην ανιχνεύεται ή αρνητική.»

Παράδοση φαρμάκων για τη θεραπεία της ηπατίτιδας C από την Ινδία και την Αίγυπτο:

Οι δείκτες της ηπατίτιδας C και η ερμηνεία των αποτελεσμάτων της ποσοτικής ανάλυσης του HCV RNA

Πρόσφατα, στις μηχανές αναζήτησης των πόρων Διαδικτύου, το ερώτημα "ποσοτική ανάλυση για την ηπατίτιδα με αποκωδικοποίηση" εμφανίζεται όλο και περισσότερο.

Πράγματι, ο ιός της ηπατίτιδας είναι κοινός και επικίνδυνος, η νόσος επηρεάζει το ήπαρ. Το όνομά της ήρθε από το lat. ηπατίτιδα - φλεγμονή του ήπατος. Η μόλυνση εμφανίζεται μέσω του αίματος ή μέσω σεξουαλικής επαφής, οι ενήλικες είναι πιο πιθανό να αρρωσταίνουν σε ηλικία 25 έως 50 ετών.

Υπάρχουν διάφοροι τύποι αυτής της ασθένειας. Η ηπατίτιδα C δεν έχει έντονη έκφραση, αλλά σε 40-70% των περιπτώσεων περνάει σε μια χρόνια μορφή, μπορεί να προκαλέσει κίρρωση του ήπατος και καρκίνο. Αυτή η ασθένεια απαιτεί ακριβή διάγνωση και ερμηνεία των αποκτηθέντων δεδομένων, για τα οποία αναπτύσσονται οι μέθοδοι. Το ένα είναι ανάλυση RNA του HCV RNA με PCR.

Ανάλυση RNA του HCV RNA με PCR

Το RNA (ριβονουκλεϊνικό οξύ) είναι ένα είδος μακρομορίου, ένα από τα συστατικά ενός ζωντανού κυττάρου. Το RNA είναι υπεύθυνο για την κωδικοποίηση των γενετικών πληροφοριών. Ο ιός της ηπατίτιδας C περιέχει ένα μόριο RNA και έχει τη συνήθεια να μεταλλάσσεται. Υπάρχουν έξι από τους υποτύπους της, καθώς και πολλοί υποτύποι.

Η ασθένεια στο χρόνιο της στάδιο οδηγεί σε ίνωση του ήπατος - οι συνδετικοί ιστοί μεγαλώνουν, η δομή του οργάνου σταδιακά σπάει. Η ίνωση μπορεί να υποβληθεί σε έγκαιρη θεραπεία, καθώς το ήπαρ δεν έχει υποστεί ακόμα καταστροφικές διεργασίες. Σε αντίθεση με την κίρρωση, μια σοβαρή μη αναστρέψιμη ασθένεια του ήπατος, στην οποία η ίνωση μπορεί να αναπτυχθεί χωρίς την έγκαιρη λήψη των απαραίτητων μέτρων.

Ένα άτομο με υποψία ότι έχει ιό ηπατίτιδας προσδιορίζει αντισώματα σε αυτό. Εάν δεν υπάρχουν - η ασθένεια αποκλείεται, στην παρουσία τους καταφεύγουν σε μια μέθοδο PTSR (αλυσιδωτή αντίδραση polimeraznoj). Στη μοριακή βιολογία, είναι πειραματικό, αλλά διαδραματίζει ηγετικό ρόλο στις μεθόδους διάγνωσης μολυσματικών ασθενειών. Με τη βοήθεια αυτού, μπορεί να αυξηθεί σημαντικά η συγκέντρωση θραυσμάτων μορίων στο δείγμα. 10 ημέρες μετά τη μόλυνση, το RNA είναι ήδη δυνατό να ανιχνευθεί στο αίμα.

Αυτή η μέθοδος είναι η μόνη που επιτρέπει την ταυτοποίηση της νόσου στα αρχικά στάδια. Με άλλους τρόπους (π.χ. βιοχημική εξέταση αίματος) αυτό δεν μπορεί να γίνει, δεδομένου ότι το ήπαρ δεν έχει επηρεαστεί ακόμη.

Η μέθοδος ανακαλύφθηκε το 1993 από τον βιοχημικό Carrie Mullis, για τον οποίο έλαβε το βραβείο Νόμπελ. Η PCR ήταν μια σημαντική ανακάλυψη στην ιατρική και την επιστήμη, καθώς επέτρεψε την ταχεία και ακριβή αναγνώριση των λοιμώξεων στο αίμα και σε άλλα βιολογικά υλικά ενός ατόμου. Με άλλα λόγια, η μέθοδος επιτάχυνε την ανάπτυξη της διάγνωσης των μολυσματικών ασθενειών.

Η ανάλυση RNA του HCV RNA με PCR είναι αποτελεσματική για τους ακόλουθους λόγους:

  • Έχει καλή ευαισθησία - ανιχνεύεται ακόμη και μια μικρή ποσότητα του ιού στο αίμα.
  • ο ίδιος ο ιός καθορίζεται και όχι τα παραπροϊόντα που δημιουργούνται από αυτόν.
  • προσδιορίζεται ο τύπος του παθογόνου παράγοντα.

Διαφορές στην ποσοτική ανάλυση του HCV RNA από ποιοτικό

Η μέθοδος PCR περιλαμβάνει δύο βασικές μεθόδους για τη μελέτη βιολογικού υλικού για την αναζήτηση του ιού της ηπατίτιδας C:

Αυτές οι μελέτες έχουν διαφορετικά καθήκοντα.

Η ποιοτική ανάλυση για την ηπατίτιδα με αποκωδικοποίηση επιβεβαιώνει την παρουσία του ιού μετά την ανεύρεση των αντισωμάτων της νόσου στο αίμα. Εάν η μελέτη έδωσε ένα θετικό αποτέλεσμα, τότε η ασθένεια βρέθηκε. Με άλλα λόγια, ένα άτομο είναι μολυσμένο. Αν προκύψει αρνητικό αποτέλεσμα, αυτό σημαίνει ότι το άτομο δεν έχει μολυνθεί ή υπάρχει πολύ μικρή συγκέντρωση του ιού. Αυτή η συγκέντρωση δεν ανιχνεύεται με αυτόν τον τρόπο.

Επιπλέον, η κλινική εικόνα της νόσου βασίζεται σε δείκτες ηπατίτιδας C και ερμηνεία της ανάλυσης. Οι κύριοι δείκτες είναι οι ανοσοσφαιρίνες (αντισώματα) Μ και G. Η παρουσία τους στο αίμα του ασθενούς υποδηλώνει μια μη χαρακτηριστική διαδικασία για έναν υγιή οργανισμό. Με βάση την παρουσία αυτών των αντισωμάτων, ο ασθενής συνήθως διαγιγνώσκεται με μια κύρια διάγνωση.

Προβλέπεται ποσοτική ανάλυση για την αρχική ανίχνευση αντισωμάτων και, εάν είναι απαραίτητο, για θεραπεία.

Επίσης, μια ποσοτική ανάλυση για την ηπατίτιδα C συνταγογραφείται για την ανίχνευση μικτής ηπατίτιδας (μόλυνση με αρκετούς ιούς).

Η ποσοτική ανάλυση με αποκωδικοποίηση εκτελείται με σκοπό:

  • διευκρίνιση της τελικής διάγνωσης ·
  • ευθυγράμμιση των προβλέψεων σχετικά με την πορεία της νόσου και τη θεραπεία της - παράταση, μείωση της θεραπείας ή αλλαγή τακτικής.
  • παρακολούθηση της θεραπείας.

Για να βεβαιωθείτε ότι τα αποτελέσματα είναι σωστά, πρέπει να ακολουθήσετε το συνταγογραφούμενο σχήμα πριν κάνετε δωρεά αίματος:

  • έρχονται στο εργαστήριο με άδειο στομάχι, η τελευταία φορά που μπορείτε να πάρετε τα τρόφιμα μπορεί να είναι 8 ώρες πριν από τη διαδικασία?
  • δύο ημέρες πριν από τη μελέτη, απαγορεύεται το οινόπνευμα, τα λιπαρά και τα τηγανητά τρόφιμα.
  • υπερηχογράφημα, μασάζ, φυσιοθεραπεία πριν από τη μελέτη δεν μπορεί να διεξαχθεί?
  • για την ημέρα, η λήψη φαρμάκων απαγορεύεται, εάν η λήψη των μεμονωμένων φαρμάκων δεν μπορεί να ακυρωθεί, αυτό αναφέρεται πριν από τη δειγματοληψία αίματος.
  • πριν από τη διαδικασία συνιστάται η μείωση των σωματικών και νευρικών φορτίων όσο το δυνατόν περισσότερο.

Η εκπλήρωση αυτών των απαιτήσεων θα είναι το κλειδί για την επίτευξη των σωστών αποτελεσμάτων της ποσοτικής ανάλυσης για την ηπατίτιδα C.

Αποκωδικοποίηση της ποσοτικής ανάλυσης

Αφού λάβουμε τους δείκτες ποσοτικής ανάλυσης, είναι απαραίτητο να αποκρυπτογραφήσουμε τα αποτελέσματα των δοκιμών για την ηπατίτιδα C. Τα αποτελέσματα υπολογίζονται τόσο σε μονάδες ME / ml όσο και σε αντίγραφα ανά ml. Για να λάβετε τα αποτελέσματα που αναφέρθηκαν στο αντίγραφο, χρησιμοποιούνται διάφορες μέθοδοι.

  • Παρακολούθηση HCV (συντελεστής μετατροπής σε ME - 2,7).
  • LCX HCV RNA (ο συντελεστής μετατροπής για ME είναι 3.8).

Πίνακας. Αποκωδικοποίηση της ποσοτικής ανάλυσης του HCV RNA με PCR.

Μελέτη PCR για ηπατίτιδα C: τύποι, ενδείξεις, μεταγραφή

Η ιική ηπατίτιδα C είναι μια σοβαρή ασθένεια που εμφανίζεται με ηπατική βλάβη. Σε ογδόντα τοις εκατό των ασθενών περνάει σε μια χρόνια μορφή. Ο ιός πολλαπλασιάζεται στα ηπατικά κύτταρα - ηπατοκύτταρα - και προκαλεί το θάνατό τους. Ο νεκρός ιστός αντικαθίσταται από εστίες συνδετικού ιστού, αναπτύσσεται ίνωση.

Με την ανάπτυξη της ίνωσης του ήπατος δεν είναι σε θέση να επιτελέσει τη λειτουργία του, αρχίζει κίρρωση, το οποίο είναι επικίνδυνο για τις επιπλοκές της: αυξανόμενη πίεση στην πυλαία φλέβα, γαστρεντερική αιμορραγία, διαταραχές της πήξης του αίματος, ψυχικές αλλαγές που οφείλεται σε βλάβη του εγκεφάλου πυρήνες τοξικά προϊόντα.

Η αιτία της νόσου είναι η μόλυνση με ιό από την οικογένεια Flaviviridae, που είναι ένας τύπος ιού RNA. Αυτό σημαίνει ότι το γενετικό υλικό με το οποίο συντίθενται πρωτεΐνες του παθογόνου κωδικοποιείται σε ένα μόριο ριβονουκλεϊκού οξέος. Η μόλυνση γίνεται μέσω του αίματος, σεξουαλικά, και από μια έγκυο γυναίκα στο έμβρυο. Δυστυχώς, μεταξύ της μόλυνσης και της έναρξης της παραγωγής των αντισωμάτων μπορεί να περάσει αρκετά μεγάλο χρονικό διάστημα - από δύο εβδομάδες έως έξι μήνες. Αυτό δεν επιτρέπει τον προσδιορισμό της μόλυνσης με τη μέθοδο της ανοσοπροσδιορισμού ενζύμου και την έναρξη της θεραπείας στα αρχικά στάδια.

Τι είναι η ανάλυση PCR;

Η PCR είναι μια μέθοδος μοριακής ανάλυσης που επιτρέπει την ανίχνευση του γενετικού υλικού του παθογόνου ήδη από την πρώτη εβδομάδα μετά τη μόλυνση χρησιμοποιώντας αλυσιδωτή αντίδραση πολυμεράσης. Η μελέτη έχει υψηλή εξειδίκευση, ακρίβεια και επιτρέπει όχι μόνο τον προσδιορισμό της παρουσίας ή απουσίας του ιού, αλλά και της συγκέντρωσης και του γονότυπου του.

Για τη μελέτη, πάρτε το αίμα του ασθενούς, στο οποίο μπορεί να βρεθεί το RNA του ιού. Το αίμα προστίθεται εκκινητές - τεχνητά συντίθενται τμήματα μικρού μήκους του επιθυμητού γονιδίου, και RNA πολυμεράση - ένα ειδικό ένζυμο, το οποίο πολλαπλασιάζει την ποσότητα του γενετικού υλικού του παθογόνου. Με τη βοήθεια ειδικής συσκευής διεξάγονται αρκετοί κύκλοι θέρμανσης και ψύξης. Το υλικό στη συνέχεια αναλύεται και συγκρίνεται με γνωστά γονίδια ιού, βάσει των οποίων γίνεται συμπέρασμα για την παρουσία ή απουσία μόλυνσης.

Τύποι ανάλυσης PCR για ηπατίτιδα C

Υπάρχουν τρεις τύποι ανάλυσης PCR:

  1. Ποιοτική ανάλυση PCR. Το πρώτο στάδιο της μελέτης. Σας επιτρέπει να αναγνωρίσετε το γενετικό υλικό του ιού στο αίμα.

  • Ποσοτική ανάλυση της PCR. Επιτρέπει τον προσδιορισμό του ιικού φορτίου - της συγκέντρωσης του γενετικού υλικού του παθογόνου σε ένα χιλιοστόλιτρο αίματος. Η μελέτη αυτή διεξάγεται πριν από την έναρξη της θεραπείας, και στη συνέχεια στην πρώτη, τέταρτη, δωδέκατη και (εάν η πορεία είναι μεγάλη) την εικοστή τέταρτη εβδομάδα θεραπείας για την αξιολόγηση της αποτελεσματικότητάς της.

  • Γονότυπο. Ο αιτιολογικός παράγοντας της ηπατίτιδας C συχνά και γρήγορα μεταλλάσσεται. Στον πλανήτη βρέθηκαν επτά παραλλαγές του γονότυπου αυτού του ιού. Στη Ρωσία, ο πρώτος, ο δεύτερος και ο τρίτος τύπος είναι κοινός. Κάθε ένας από τους γονότυπους έχει διαφορετική αντίσταση στη θεραπεία, για παράδειγμα, η αποτελεσματικότητα της θεραπείας του πρώτου τύπου είναι εξήντα τοις εκατό, και για το δεύτερο και τρίτο, φτάνει τα ογδόντα πέντε. Επομένως, προκειμένου να επιλεγούν κατάλληλα φάρμακα και να συνταγογραφηθεί μια σειρά θεραπείας επαρκούς διάρκειας, είναι απαραίτητο να προσδιοριστεί με ακρίβεια ποιος τύπος ιού έχει μολυνθεί από τον ασθενή.
  • Ενδείξεις για ανάλυση PCR για ηπατίτιδα C

    Η μελέτη PCR έχει συνταχθεί στις ακόλουθες περιπτώσεις:

    • επαφή με άρρωστο άτομο, η οποία θα μπορούσε να οδηγήσει σε μόλυνση.
    • θετική ενζυμική ανοσοανάλυση ·
    • σημάδια κίρρωσης του ήπατος: αλλαγές στο μέγεθος του ήπατος, μεγέθυνση της σπλήνας, εμφάνιση του υποδόριου φλεβικού πλέγματος στην κοιλία.
    • την εμφάνιση συμπτωμάτων ηπατικής βλάβης: πόνος στη δεξιά πλευρά της κοιλιάς, κιτρίνισμα του δέρματος,
    • αυξημένη δραστικότητα ALT και AST σε βιοχημική ανάλυση αίματος.
    • πριν από την έναρξη της θεραπείας για τον προσδιορισμό του ιικού φορτίου.
    • για την παρακολούθηση της αποτελεσματικότητας της αντιιικής θεραπείας.
    • μετά την ολοκλήρωση της θεραπείας για την παρακολούθηση της υποτροπής.
    • παρουσία διαγνωσμένης ηπατίτιδας Β, για να αποκλειστεί η μικτή ηπατική βλάβη.

    Αποκωδικοποίηση της μελέτης PCR για ηπατίτιδα C

    Απομαγνητοφώνηση ανάλυση PCR και ανοσοδοκιμή για Hepatology ηπατίτιδα C πρέπει να εμπλακεί ή μολυσματικές ασθένειες. Η ανάλυση των αποτελεσμάτων της PCR είναι απαραίτητη σε συνδυασμό με τη βιοχημική εξέταση αίματος, βιοψία και υπερηχογράφημα. Μόνο ένας ειδικευμένος γιατρός θα είναι σε θέση να αναλύσει τα αποτελέσματα των μελετών και, βάσει αυτών, θα συνταγογραφήσει τη σωστή θεραπεία.

    Αποκωδικοποίηση της ποιοτικής ανάλυσης.

    Το γενετικό υλικό του παθογόνου βρέθηκε στο αναλυθέν βιολογικό υλικό. Η μόλυνση επιβεβαιώνεται.

    Δεν υπάρχει μόλυνση ή η ποσότητα του RNA του παθογόνου είναι κάτω από το όριο ευαισθησίας.

    Αποκωδικοποίηση της ποσοτικής ανάλυσης.

    Μια φυσιολογική εικόνα για τους υγιείς ανθρώπους. Σημαίνει ότι δεν υπάρχει RNA ηπατίτιδας C στο υλικό δοκιμής, ή η συγκέντρωσή του είναι κάτω από το όριο ευαισθησίας της μελέτης.

    Η συγκέντρωση του RNA είναι κάτω από το εύρος ποσοτικοποίησης. Τέτοια αποτελέσματα ερμηνεύονται πολύ προσεκτικά, συσχετίζονται με τα δεδομένα άλλων μελετών και συχνά εκτελούν μια δεύτερη μελέτη.

    Το επίπεδο ιικού φορτίου σε δεδομένη συγκέντρωση θεωρείται χαμηλό. Συνήθως μια μείωση στην ποσότητα του ιού σημαίνει ότι η θεραπεία είναι επιτυχής.

    Περισσότερο από 8 * 10 ^ 5 IU / ml

    Το επίπεδο του ιϊκού φορτίου σε δεδομένη συγκέντρωση θεωρείται υψηλό.

    Περισσότερο από 2,4 * 10 ^ 7 IU / ml

    Η ποσότητα του RNA είναι πάνω από το ανώτατο όριο του εύρους ποσοτικοποίησης. Είναι αδύνατο να συναχθούν συμπεράσματα σχετικά με τον βαθμό ιικού φορτίου με αυτό το αποτέλεσμα. Συνήθως σε τέτοιες περιπτώσεις, η δοκιμή επαναλαμβάνεται με την αραίωση του δείγματος αίματος.

    Αποκωδικοποίηση της γονότυπης.

    Ανακαλύφθηκε RNA συγκεκριμένου γονότυπου

    Στο βιοϋλικό, ο ιός της ηπατίτιδας C ανιχνεύεται συγκεκριμένου γονότυπου και υποτύπου. Το αποτέλεσμα είναι κωδικοποιημένο με λατινικούς αριθμούς και λατινικά γράμματα, για παράδειγμα - 1α, 2β. Υπάρχουν επτά γονότυποι και εξήντα επτά υποτύποι, αλλά στη Ρωσία υπάρχουν μόνο τρεις πρώτοι τύποι.

    Βρέθηκε RNA ιού ηπατίτιδας C

    Στο αίμα, το RNA βρίσκεται σπάνιος γονότυπος για τη Ρωσία, ο οποίος δεν μπορεί να αποδοθεί στον πρώτο, δεύτερο ή τρίτο τύπο. Απαιτείται περισσότερη έρευνα.

    Αυτό το αποτέλεσμα δείχνει ότι ο ασθενής είναι υγιής ή ότι το επίπεδο RNA του παθογόνου είναι πολύ μικρό.

    Μια κατάσταση είναι δυνατή όταν η ανάλυση PCR για την ηπατίτιδα C είναι αρνητική, και η ανοσοδοκιμασία ενζύμου ανιχνεύει αντισώματα κατά του ιού. Αυτό σημαίνει ότι ο ασθενής είχε ηπατίτιδα C σε οξεία μορφή και θεραπεύτηκε. Περίπου είκοσι περιπτώσεις λοίμωξης οδηγούν σε αυθόρμητη θεραπεία αν το σώμα του ασθενούς ασκεί επαρκή αντίσταση σε λοίμωξη.

    Παρά το γεγονός ότι η PCR είναι μια πολύ ακριβής ανάλυση, τα αποτελέσματά της μπορούν να αλλοιωθούν στις ακόλουθες περιπτώσεις:

    • το αίμα μεταφέρθηκε στο εργαστήριο υπό ανεπαρκείς συνθήκες, το καθεστώς θερμοκρασίας παραβιάστηκε.
    • το δείγμα του βιοϋλικού μολύνθηκε.
    • στο αίμα υπήρχαν εναπομείναντα ίχνη ηπαρίνης και άλλων αντιπηκτικών.
    • Στην ουσία που ερευνήθηκε ήταν αναστολείς - ουσίες που επιβραδύνουν ή σταματούν την αλυσιδωτή αντίδραση πολυμεράσης.

    Πλεονεκτήματα της PCR έναντι άλλων μεθόδων

    1. Διάγνωση στα αρχικά στάδια. Η PCR ανιχνεύει το γενετικό υλικό του αιτιολογικού παράγοντα της ασθένειας. ουσίες που παράγει το σώμα σε απόκριση προς λοίμωξη - μόνο ανοσοσφαιρίνες μπορεί να ανιχνευθεί με ανοσοφθορισμό. Στην περίπτωση του διαστήματος της ηπατίτιδας C μεταξύ μόλυνσης και την έναρξη της ανοσολογικής απόκρισης μπορεί να είναι μερικές εβδομάδες ή μήνες, στον οποίο χρόνο η ELISA θα είναι αναποτελεσματική. Η PCR θα δώσει μια απάντηση ήδη την πρώτη εβδομάδα μετά τη μόλυνση.

  • Χαμηλή πιθανότητα σφάλματος. Στο υλικό που μελετήθηκε, προσδιορίζεται το γενετικό υλικό, το οποίο είναι χαρακτηριστικό μόνο για έναν τύπο παθογόνων παραγόντων. Αυτό σας επιτρέπει να αποκλείσετε τα ψευδή αποτελέσματα. Με τη μέθοδο ELISA, είναι δυνατά λάθη, καθώς το ίδιο είδος αντισωμάτων μπορεί να απελευθερωθεί έναντι διαφορετικών ιών - τέτοια αντισώματα ονομάζονται διασταυρούμενα αντιδραστικά.

  • Υψηλή ευαισθησία. Η PCR μπορεί να ανιχνεύσει RNA του παθογόνου ακόμη και σε ελάχιστες ποσότητες. Αυτό καθιστά δυνατό τον εντοπισμό κρυφών μολύνσεων.
  • Πώς να προετοιμαστείτε για χορήγηση αίματος για έρευνα PCR

    Για την ανάλυση PCR, συλλέγεται φλεβικό αίμα για την ηπατίτιδα C. Συνήθως, δύο μερίδες αίματος λαμβάνονται από τη φλέβα του ασθενούς αμέσως: η πρώτη αποστέλλεται στην PCR και η δεύτερη στην ELISA. Αυτό γίνεται προκειμένου να εκτιμηθεί με μεγαλύτερη ακρίβεια πόσο άσχημα ο ασθενής είναι μολυσμένος με τον ιό και πώς η ασυλία στρέφεται εναντίον του.

    Συνήθως, οι ακόλουθοι κανόνες απαιτούνται από τον ασθενή:

    • ένα τεστ αίματος λαμβάνεται το πρωί.
    • το διάλειμμα μεταξύ του τελευταίου γεύματος και της παράδοσης αίματος πρέπει να είναι οκτώ έως δέκα ώρες.
    • δύο ή τρεις ημέρες πριν από την ανάλυση πρέπει να εγκαταλείψετε τα τηγανητά και λιπαρά τρόφιμα και το αλκοόλ.
    • για είκοσι τέσσερις ώρες πριν από την ανάλυση, ο ασθενής θα πρέπει να αποφεύγει τη σωματική άσκηση: μην κουβαλάτε βάρος, μη παρακολουθείτε γυμναστήριο ή πισίνα.

    Σχετικά Άρθρα Ηπατίτιδα