Ηπατίτιδα C PCR

Share Tweet Pin it

Αφήστε ένα σχόλιο 15.344

Η ηπατίτιδα C είναι μία από τις πιο επικίνδυνες και δύσκολη στη διάγνωση ιογενών ασθενειών. Για τον προσδιορισμό της νόσου χρησιμοποιώντας PCR ηπατίτιδα C. Αυτή η μέθοδος είναι μια νέα τεχνική υψηλής τεχνολογίας που επιτρέπει σε κάποιον να μελετήσει το γενετικό υλικό της ύπαρξης της ζωής στα μικρότερα σωματίδια (μόρια) και τα μικρότερα ποσά. Ο ιός της ηπατίτιδας Β είναι πολύ ανθεκτική, μπορεί να ζήσει για μεγάλο χρονικό διάστημα στο περιβάλλον και καλά ριζώσει στο ανθρώπινο σώμα.

Τι είναι το PCR;

Σήμερα υπάρχουν πολλές ασθένειες. Και όχι λιγότερος αριθμός μεθόδων για τον προσδιορισμό τους. Δεδομένου ότι οι παράγοντες μόλυνσης έχουν μάθει να εύκολα εξοικειώνονται με το περιβάλλον και να εξελίσσονται, οι τελευταίες τεχνολογίες χρησιμοποιούνται για τη διάγνωσή τους. Η αλυσιδωτή αντίδραση πολυμεράσης (PCR) είναι μια ταχύτερη και ακριβέστερη μέθοδος, η οποία στοχεύει στην εύρεση του αιτιολογικού παράγοντα της ασθένειας, αυξάνοντας ουσιαστικά την αναλογία του DNA του ιού της ηπατίτιδας στο δείγμα. Συχνά είναι γραμμένο για: αναζήτηση μιας βελόνας σε ένα άχυρα και στη συνέχεια να χτίσετε μια στοίβα από βελόνες.

Τύποι μεθόδων PCR

Επισημάνετε μια ποιοτική και ποσοτική ανάλυση για την ηπατίτιδα. Για να προσδιορίσετε εάν ο ιός βρίσκεται στο σώμα και εκείνοι που έχουν βρει αντισώματα στην ηπατίτιδα C, πραγματοποιήστε ποιοτικούς ελέγχους. Η ανάλυση της ανάλυσης δίνει το αποτέλεσμα: "θετικά". "Αρνητικό". Αρνητικό νόημα σημαίνει: είτε το άτομο είναι υγιές, είτε οι παράγοντες στο αίμα δεν είναι αρκετοί και δεν μπορούν να βρεθούν. Ως εκ τούτου, αξίζει να διεξαχθεί μια δεύτερη μελέτη μετά από λίγο.

Ένα θετικό αποτέλεσμα υποδεικνύει την ύπαρξη λοίμωξης. Αυτό είναι σχεδόν πάντα μια ακριβής τιμή. Τα λανθασμένα αποτελέσματα συνήθως εξαρτώνται από τον ανθρώπινο παράγοντα (ακατάλληλη αποθήκευση ή μη συμμόρφωση με τους κανόνες της διαδικασίας). Όταν ο κανόνας, το αποτέλεσμα είναι αρνητικό. Πριν από τη δοκιμή, δεν υπάρχουν ειδικοί κανόνες, πάρτε μόνο αίμα από τη φλέβα.

Εάν βρεθεί, πραγματοποιήστε μια ποσοτική ανάλυση (ιικό φορτίο) - δίνει αριθμητικές τιμές: πόσο RNA του ιού της ηπατίτιδας είναι σήμερα στον προδιαγεγραμμένο όγκο του υλικού δοκιμής. Με την ενεργό ανάπτυξη της λοίμωξης, μπορεί να βρεθεί στο μολυσμένο άτομο για 1-2 εβδομάδες. Το αίμα επίσης εξετάζεται συνήθως επειδή οι παράγοντες που κυκλοφορούν ελεύθερα.

Χαρακτηριστικά της ποσοτικής ανάλυσης PCR

Η διαφορά της ποσοτικής ανάλυσης είναι ότι δεν περνούν όλοι. Ποιοτική - καθορίζει την παρουσία και την ποσότητα - βοηθά να επιβεβαιώσει το συμπέρασμα του «ιού της ηπατίτιδας C», την πρόγνωση της νόσου και να καθορίσει την πορεία της θεραπείας. Πόσο αποτελεσματική θεραπεία, ανάλογα με τον αριθμό των RNA πριν και κατά τη διάρκεια της θεραπείας. Επίσης, χρησιμοποιείται για τον προσδιορισμό της δοσολογίας των φαρμάκων.

Ενδείξεις

Κατά κανόνα, παράγεται πριν από την έναρξη της ανάκαμψης. Οι κύριες ενδείξεις μπορούν να είναι:

  • τον ορισμό του ιικού φορτίου και τον έλεγχο της αντιιικής θεραπείας.
  • Ποιοτική PCR έδειξε αντισώματα ηπατίτιδας C.
  • εύρεση οξείας και χρόνιας ηπατίτιδας C.
  • την ύπαρξη μικτής ηπατίτιδας.
  • κατά τον προγραμματισμό της θεραπείας.
  • αν μια ποιοτική μελέτη εξακολουθεί να βρίσκει την παρουσία της νόσου μετά τη δωδέκατη εβδομάδα της θεραπείας.

Δείτε επίσης το είδος του ιικού φορτίου για ηπατίτιδα: η χαμηλή θεραπεία είναι επιτυχής. αυξημένη - η θεραπεία δεν είναι αποτελεσματική και πρέπει να αλλάξει.

Τι γίνεται σε διαφορετικά στάδια της νόσου;

Σε διαφορετικές φάσεις της ασθένειας, η μελέτη διεξάγεται για να ανασκοπήσει τα οφέλη της θεραπείας και να προγραμματίσει τη διάρκεια της περαιτέρω εφαρμογής της. Με καλές απαντήσεις στη θεραπεία, συντομεύεται. Διαφορετικά, με αργή απόσυρση του ιού, η πορεία της θεραπείας παρατείνεται. Η PCR για ηπατίτιδα γίνεται στις 1,4, 12, 24 εβδομάδες θεραπείας. Όταν οι δείκτες δεν πέσουν μετά από 12 εβδομάδες, καταλήγουν στο συμπέρασμα ότι η θεραπεία δεν είναι κατάλληλη για αυτόν τον οργανισμό. Αυτή η ανάλυση χρησιμοποιείται για να καθορίσει πόσο ενεργός είναι η μόλυνση και πόσο πιθανό είναι να μεταδοθεί. Για παράδειγμα, κατά την εγκυμοσύνη, υπάρχει κίνδυνος μόλυνσης ενός μωρού. Μετά τη θεραπεία, εντοπίζεται ο κίνδυνος υποτροπής.

Επεξήγηση

Μετά τη μελέτη, η ανάλυση μπορεί να αποκρυπτογραφηθεί όχι σε αριθμούς, αλλά με τις λέξεις: "κάτω από την περιοχή μέτρησης" και "δεν ανιχνεύεται". Η ποσοτική PCR είναι πιο ευαίσθητη στην ποιότητα. Το συμπέρασμα "δεν βρέθηκε" μπορεί να πει ότι η λοίμωξη δεν βρέθηκε. "Κάτω από το εύρος μέτρησης" - η δοκιμή δεν εντοπίστηκε από τον ιό, αλλά είναι σε μικρή ποσότητα. Σε αυτή την περίπτωση, κάντε μια δεύτερη μελέτη.

Ιογενές φορτίο - προσδιορισμός του αριθμού του μολυσματικού RNA στον καθορισμένο όγκο αίματος (ποσοτικά 1 ml = 1 κυβικό εκατοστό). Διατυπώνεται σε διεθνείς μετρήσεις ME / ml. Τα μεμονωμένα εργαστήρια ορίζουν αντίγραφα / ml. Η αποκρυπτογράφηση της μετάφρασης των συνιστωσών στις διεθνείς αξίες, τα διαφορετικά συστήματα δοκιμών μπορούν με τον δικό τους τρόπο. Πίνακας 1. Αποκωδικοποίηση της ποσοτικής ανάλυσης του RNA του ιού

Ο κανόνας της ποσοτικής ανάλυσης για την ηπατίτιδα C

Όταν ένα άτομο είναι υγιές, ο κανόνας είναι - "δεν βρέθηκε". Πληγέντες κανόνας θα μειωθεί σε δοσολογία των αποτελεσμάτων ιού σε μια λογαριθμική μονάδα, η οποία εκδηλώνεται να μειώσει τον αριθμό των μηδενικών στην ανάλυση από ένα (π.χ., 1 * 106 IU / ml έως 1 * 105 IU / ml). ιός Πλαίσια εύρος συγκέντρωσης που καθορίζει το θερμικό ανακυκλωτή βρίσκονται στα σύνορα 102 1.8 * - 2.4 * 107 IU / ml. Η ερμηνεία του αποτελέσματος:

  • χαμηλή συγκέντρωση - από 600 IU / ml έως 3 * 104 IU / ml.
  • μέσος όρος - από 3 * 104 IU / ml έως 8 * 105 IU / ml.
  • Υψηλότερα από 8 * 105 IU / ml.
Επιστροφή στα περιεχόμενα

Αποκλίσεις

Εάν τα αποτελέσματα των αναλύσεων αλλάξουν εκτός του κανόνα, αυτό μπορεί να υποδεικνύει την επιστροφή της νόσου και την αναπαραγωγή του ιού. Μερικοί παράγοντες μπορούν να επηρεάσουν την παραλαβή ενός αναξιόπιστου αποτελέσματος, για παράδειγμα, τη μόλυνση των δειγμάτων. η παρουσία ηπαρίνης στο αίμα και των ουσιών που επιβραδύνουν τη δράση των συστατικών PCR. εργαστηριακά σφάλματα. μη συμμόρφωση με τη δοκιμή.

Επίσης, το αποτέλεσμα σε διάφορα εργαστήρια μπορεί να ποικίλει, ίσως υπήρξε μια διαφορετική ερευνητική μεθοδολογία. Για να μάθουμε πόσο επηρεάζεται το ήπαρ και ο κίνδυνος της νόσου, δεν αρκεί να ποσοτικοποιήσουμε την PCR της ηπατίτιδας. Επιπλέον, διεξάγονται βιοχημικές διαδικασίες και βιοψία.

Κατά τον προγραμματισμό της θεραπείας, ο ιός είναι γονότυπος. Λόγω του γεγονότος ότι η ηπατίτιδα C είναι σε θέση να αλλάξει, υπάρχουν πολλές ομάδες. Για διαφορετικούς τύπους θεραπείας μπορεί να διαφέρουν. Υπάρχουν περιπτώσεις όπου υπάρχουν πολλά είδη, αλλά η ανάλυση βρίσκει ένα, το οποίο επικρατεί. Στη συνέχεια, η δοκιμή θα επαναληφθεί.

Τα πλεονεκτήματα της μεθόδου

Η τεχνική PCR καθιστά δυνατή τη γνωμοδότηση και τη συνταγογράφηση της σωστής θεραπείας. Πλεονεκτήματα της μεθοδολογίας:

  • Η ταχύτητα των αποτελεσμάτων δεν απαιτεί τη διάκριση και την καλλιέργεια του είδους του παθογόνου. Η αυτοματοποίηση της διαδικασίας σας επιτρέπει να επεξεργαστείτε και να μελετήσετε το υλικό με αποτέλεσμα σε 4-5 ώρες.
  • Η αμεσότητα του προσδιορισμού του παθογόνου - η εξεύρεση ειδικού τμήματος του DNA, δείχνει άμεσα την παρουσία της νόσου. Για παράδειγμα, η ELISA - βρίσκει δείκτες πρωτεϊνών (τα προϊόντα της ζωής των βακτηριδίων), που δεν παρέχουν ακριβή επιβεβαίωση της παρουσίας της νόσου.
  • Ειδικότητα - εξετάζεται μια ουσία που είναι ειδική για ένα συγκεκριμένο παθογόνο, η οποία αποκλείει την αντίδραση σε ψευδείς συν-αντιδραστικούς παράγοντες.
  • Ευαισθησία - μπορεί να εντοπίσει τον μικρότερο αριθμό ιών.
  • Η καθολικότητα - βασίζεται στην εύρεση θραυσμάτων DNA ή RNA συγκεκριμένων οργανισμών. Αυτό καθιστά δυνατή τη διεξαγωγή διαγνωστικών για όλους τους παράγοντες από ένα βιοϋλικό, αν άλλες μέθοδοι είναι ανίσχυρες.
  • Αποκαλύπτει όχι μόνο προφανείς, αλλά και κρυμμένες λοιμώξεις - είναι αποτελεσματική για τη μελέτη παραγόντων που είναι δύσκολα καλλιεργημένοι, δεν καλλιεργούνται, είναι επίμονοι.
  • https://www.youtube.com/watch?v=lBi-d6jAKxQ

Μέσω αυτής της έρευνας, κάθε άτομο μπορεί να διαγνωστεί με μια διάγνωση της απουσίας της νόσου. Αλλά για αξιόπιστα γεγονότα πρέπει να ακολουθήσετε τις οδηγίες. PCR χρησιμοποιείται σε διάφορους τομείς: εγκληματολογία, πατρότητας, για τη διάγνωση διαφόρων ιών, για την ανίχνευση αλλεργιών σε φάρμακα, γονιδιακή κλωνοποίηση, μεταλλαξογένεση, καθορισμό αλληλουχίας DNA.

Ποιοι είναι οι κανόνες στην ποσοτική ανάλυση για την ηπατίτιδα C;

Ο ιός της ηπατίτιδας C είναι ικανός να αναπαράγεται στα κύτταρα του αίματος και να προκαλεί λεμφοϋπερπλαστικές ασθένειες. Χάρη στις πολλαπλές μεταλλάξεις, οι ανοσοποιητικές άμυνες του οργανισμού εξασθενούν, εμφανίζονται οι γονότυποι και οι υποτύποι του ιού. Με τη σωστή και έγκαιρη αναγνώριση ενός συγκεκριμένου τύπου εξαρτάται από την αποτελεσματικότητα της αντιιικής θεραπείας. Ο κίνδυνος μόλυνσης είναι ότι η ασθένεια είναι ασυμπτωματική. Συνολικά, το 15% των 100 μπορεί να παρουσιάσουν ναυτία και έμετο, απώλεια βάρους και πυρετό.

Ορισμός του ιού της ηπατίτιδας C

Ο πρότυπος κανόνας της ηπατίτιδας C είναι τα μεγέθη από 40 έως 60 nm, με την πλειονότητα των λιπιδίων, ηπατική βλάβη ως αποτέλεσμα της οξείας ή χρόνιας πορείας της νόσου. Η ηπατίτιδα C, δηλαδή ο ιός RNA της οικογένειας Togaviridae, είναι εξαιρετικά ανθεκτικός, μεταδίδεται με μετάγγιση αίματος ή τη χρήση μη αποστειρωμένων αντικειμένων, ακατάλληλη υγιεινή των αξεσουάρ μπάνιου, Η ποσοτική ανάλυση σας επιτρέπει να εξετάσετε το αίμα και να προσδιορίσετε τη γενετική δομή του μολυσμένου ιού.

Για την εκτίμηση της ηπατίτιδας C και των γενότυπων της, πραγματοποιείται ποσοτική ανάλυση. Ανάλογα με τον αναλυτή, μπορούν να προσδιοριστούν τρία επίπεδα επίπτωσης του ιού RNA.

Οι υποτύποι μπορούν να παράγουν διάφορες τροποποιήσεις, οπότε η ειδικότητα και η ευαισθησία του αναλυτή πρέπει να είναι εκατό τοις εκατό. Εκτός από την ανίχνευση μιας νόσου σε έναν ασθενή, είναι απαραίτητο να προσδιοριστεί ο βαθμός της σοβαρότητάς του. Ορισμένα εργαστήρια δεν διαθέτουν όλα τα δεδομένα σχετικά με τους ορισμούς του ιού RNA, υπάρχει η πιθανότητα μιας ψευδώς θετικής αντίδρασης.

Η μελέτη για την ηπατίτιδα C θα είναι πιο ακριβής κατά τη μελέτη τέτοιων δεικτών:

Δίνοντας έμφαση στα αποτελέσματα αυτών των δεικτών και στη γενική κατάσταση του σώματος, εμφανίζεται ένα αποτέλεσμα που δείχνει το βαθμό μόλυνσης, τη μορφή και τον αριθμό των κυττάρων ηπατίτιδας C στο αίμα. Αυτό συμβάλλει στη διαδικασία επούλωσης και στην αποτελεσματικότητα της αντιιικής θεραπείας.

Τύποι ανάλυσης για την ηπατίτιδα C

Η αντίδραση πολυδιάστατης αλύσου (PCR) δίνει μια ιδέα για την ποσότητα σωματιδίων DNA στις αναλύσεις του ασθενούς και προσδιορίζει σωστά τον αιτιολογικό παράγοντα της λοίμωξης.

Οι μολυσματικοί παράγοντες μπορούν να εκδηλωθούν. Μια τέτοια μολυσματική νόσος του ήπατος, όπως η ηπατίτιδα C, είναι σήμερα θεραπεύσιμη όταν ανιχνεύεται εγκαίρως. Εάν υπάρχει υποψία για ιό, η ανάλυση PCR γίνεται.

Ενώ τα συμπτώματα του ιού μπορεί να καλυφθούν για μεγάλο χρονικό διάστημα, ένα άτομο μπορεί να μην αισθάνεται την εμφάνιση της πορείας της νόσου. Αλλά με προσεκτική εξέταση στο 60-70% των περιπτώσεων, η ηπατίτιδα C ανιχνεύεται, μια πρωταρχική ανάλυση στην οποία είναι η ELISA, ακολουθεί η διάγνωση PCR. Η ανάλυση πραγματοποιείται σε ορισμένες περιόδους για να προσδιοριστεί το στάδιο της ασθένειας και να συνταγογραφηθεί η κατάλληλη θεραπεία. Κάνετε χωρίς αυτό, χωρίς να εφαρμόσετε όλες αυτές τις διαδικασίες, μπορείτε να εμβολιάσετε από ηπατίτιδα.

Ποιοτική και ποσοτική ανάλυση

Υπάρχουν ποιοτικές και ποσοτικές αναλύσεις. Η ουσία του πρώτου είναι ότι καθορίζει την παρουσία λοίμωξης στο αίμα. Και αυτό σημαίνει ότι ο ιός επηρεάζει υγιή ηπατικά κύτταρα. Όταν ένας ασθενής έχει αντισώματα έναντι της ηπατίτιδας C, πραγματοποιείται αμέσως ποιοτική δοκιμή. Ο κανόνας που πρέπει να παράγει το αποτέλεσμα είναι "δεν ανιχνεύεται στο αίμα". Κατά τον προσδιορισμό της συγκέντρωσης του ιού, υπάρχει ανάγκη γνώσης της ευαισθησίας του διαγνωστικού συστήματος, καθώς η ανάλυση μπορεί να γίνει από άτομα που υποβάλλονται σε αντιιική θεραπεία. Η ευαισθησία του αναλυτή δεν πρέπει να είναι μικρότερη από 50 IU / ml.

Όταν ανιχνεύεται ένας ιός, γίνεται ποσοτική ανάλυση, με άλλα λόγια ένα ιικό φορτίο που καθορίζει τη συγκέντρωση του ιού στο αίμα και τη σοβαρότητα της νόσου.

Το ιογενές RNA, το οποίο είναι σε μια ορισμένη ποσότητα αίματος, ορίζεται ως ο κανόνας με ρυθμό 1 ml ανά 1 κυβικό εκατοστό. Μετά την ποσοτικοποίηση του ιικού φορτίου, είναι δυνατόν να κρίνουμε τον βαθμό μόλυνσης του μη μολυσμένου περιβάλλοντος. Μόλις η συγκέντρωση της ηπατίτιδας C αυξηθεί στο αίμα, το περιβάλλον πρέπει να απομονωθεί.

Είναι σημαντικό στα πρώτα στάδια να ανιχνευθεί ο βαθμός συγκέντρωσης της ηπατίτιδας προκειμένου να καθοριστεί ο ρυθμός αποκατάστασης. Εάν η συχνότητα της ηπατίτιδας C υπερβεί κατά περισσότερο από 800 χιλιάδες IU / ml, θεωρείται υπερβολικά υψηλή, με αύξηση σε ένα εκατομμύριο - κρίσιμη. Εάν η ποσοτική περιοχή είναι μικρότερη από 400 χιλιάδες IU / ml, θεωρείται ότι η μόλυνση των άλλων θα συμβεί με λιγότερες πιθανότητες. Αυτός ο αριθμός καθιστά σαφές ότι η ηπατίτιδα C στο σώμα είναι παρούσα σε πολύ μικρές δόσεις. Η ανάλυση δεν μπόρεσε να προσδιορίσει την ποσοτική τιμή του RNA των σωματιδίων του ιού, έτσι επανατοποθετείται αρκετές φορές για την ακρίβεια της διάγνωσης.

Αποτελέσματα ποσοτικής ανάλυσης

Το καθήκον του προσδιορισμού της ποσότητας του ιικού φορτίου στο αίμα του ασθενούς είναι να προσδιοριστεί η έκταση της λοίμωξης για τους άλλους.

Αποτελέσματα ανάλυσης PCR:

  1. Μια θετική απάντηση σημαίνει ότι υπάρχει μια μόλυνση στο βιολογικό υλικό. Η ανάλυση σας επιτρέπει να προσδιορίσετε τον ακριβή αριθμό των μολυσμένων κυττάρων.
  2. Μια αρνητική απάντηση δείχνει την απουσία μόλυνσης, η οποία αναζητήθηκε προσεκτικά στο σώμα.

Η ποσοτική μέθοδος για την ηπατίτιδα C είναι ακριβής και ενημερωτική, διεξάγεται σε εξοπλισμό με υψηλή ευαισθησία. Η αποκρυπτογράφηση των αποτελεσμάτων της ανάλυσης σας επιτρέπει να γνωρίζετε αν υπάρχει μόλυνση και η ειδικότητά της, για να δείτε τον μικρότερο αριθμό μολυσμένων κυττάρων σε αναλυτές υψηλής ευαισθησίας.

Τα ψευδώς θετικά ή αντίθετα αποτελέσματα της ανάλυσης σπάνια δίνουν, συχνότερα συμβαίνει σε μελέτες ανοσοδοκιμασίας.

Χρησιμοποιώντας διαγνωστικά PCR

Η αλυσιδωτή αντίδραση πολυμεράσης (PCR) στη μοριακή βιολογία ονομάζεται πειραματική μέθοδος ανίχνευσης ιού. Επιτρέπει τη σημαντική αύξηση της συγκέντρωσης ορισμένων θραυσμάτων νουκλεϊκού οξέος (DNA) σε δείγματα βιολογικού υλικού, γεγονός που καθιστά δυνατό τον προσδιορισμό (αναγνώριση) και τον υπολογισμό τους.

Η ανάλυση πραγματοποιείται ως εξής. Γενετικό υλικό (δείγμα αίματος), το οποίο μπορεί να περιέχει το επιθυμητό γονίδιο, εισάγεται σε δοκιμαστικό σωλήνα. Εκεί επίσης τοποθετούνται εναρκτήρια-μικρά μήκη χημικά συντιθέμενα από το επιθυμητό γονίδιο.

Η πολυμεράση ϋΝΑ ή RNA προστίθεται επίσης στο δοχείο, είναι ικανή να δημιουργήσει μία αλυσίδα νουκλεϊνικού οξέος η οποία είναι εντελώς ταυτόσημη με την αρχική. Ένα σύνολο τεσσάρων ελεύθερων νουκλεοτιδίων, ένα ειδικό δομικό υλικό για RNA ή DNA, το ένα εκ των οποίων περιέχει ραδιενεργά σωματίδια φωσφόρου, εισάγεται επίσης στην προκύπτουσα σύνθεση.

Το προκύπτον μίγμα θερμαίνεται στους 95-96 ° C, εξαιτίας του οποίου οι δύο έλικες ϋΝΑ, οι οποίες είναι συνυφασμένες με τη συνήθη κατάσταση, ξετυλίγονται. Στη συνέχεια, το παρασκεύασμα ψύχεται, αυτή τη στιγμή οι εκκινητές προσκολλώνται στην επιθυμητή περιοχή του γονιδιώματος του ιού, χωρίς να επιτρέπεται πάλι στο RNA (ή το DNA) να σχηματίσει διπλή έλικα.

Κατά τη διάρκεια της ψύξης, η πολυμεράση αναζητά μια ελεύθερη αλυσίδα νουκλεοτιδίων. Για τη λειτουργία αυτού του ενζύμου, απαιτείται μια μονή αλυσίδα νουκλεοτιδίων. Επειδή η πολυμεράση γλιστράει κατά μήκος του κλώνου DNA (όπως ένας δακτύλιος από ένα σχοινί), δεν μπορεί να λειτουργήσει σε διπλή έλικα.

Μετά από αυτό, πραγματοποιείται ένας επαναλαμβανόμενος κύκλος θέρμανσης, εξαιτίας του οποίου διαχωρίζονται οι νουκλεοτιδικές αλυσίδες. Για κάθε έναν από αυτούς τους κύκλους PCR, η ποσότητα του επιθυμητού γονιδίου ηπατίτιδας στο δείγμα αυξάνεται σε μία γεωμετρική εξέλιξη και το υπόλοιπο γενετικό υλικό παράγεται γραμμικά.

Μετά τον καθαρισμό του διαλύματος των υπολειμμάτων νουκλεοτιδίων και τον διαχωρισμό των κλώνων ϋΝΑ από την παράμετρο μοριακού βάρους από την ηλεκτροφόρηση, είναι εύκολο να προσδιοριστεί αν υπάρχει το επιθυμητό γονίδιο στο δοκιμαστικό δείγμα ή όχι.

Πλεονεκτήματα της PCR

Μια εργαστηριακή μελέτη που χρησιμοποιεί τη μέθοδο PCR επιτρέπει την απόκτηση ακόμη περισσότερων πληροφοριών από απλώς την παρουσία του ιού RNA. Κατά τον προσδιορισμό της παραμέτρου του επιπέδου της ραδιενεργού ακτινοβολίας, είναι δυνατόν να προσδιοριστεί ποια ποσότητα γενετικού υλικού περιελήφθη αρχικά στο υπό εξέταση δείγμα. Στην περίπτωση της ηπατίτιδας, καθορίστε το επίπεδο του ιικού φορτίου.

Ένα άλλο πλεονέκτημα αυτής της μεθόδου είναι η πολύ υψηλή ευαισθησία της αντίδρασης CR. Είναι πολύ υψηλότερο από τις κλασικές μεθόδους ανίχνευσης ιών. Στην ιδανική περίπτωση, προκειμένου να εντοπιστεί το επιθυμητό γονίδιο, μόνο ένας ιός στο δείγμα είναι επαρκής για PCR.

Επιπλέον, η PCR είναι εξ ολοκλήρου συγκεκριμένη. Οι εκκινητές του δημιουργούνται με τέτοιο τρόπο ώστε να αντιστοιχούν πλήρως στα μοναδικά τμήματα των επιθυμητών γονιδίων, τα οποία δεν έχει άλλη αλληλουχία. Και τα δύο δακτυλικά αποτυπώματα είναι μοναδικά και σε κάθε γονίδιο υπάρχουν μοναδικές αλληλουχίες νουκλεοτιδίων.

Ποιοτική ανάλυση PCR

Η ποιοτική ανάλυση αποκαλύπτει μόνο την παρουσία ενός ιού στο αίμα. Αυτή η δοκιμή πρέπει να διεξάγεται για όλους τους ασθενείς στους οποίους έχει βρεθεί ότι έχουν αντισώματα στην ηπατίτιδα C. Το αποτέλεσμα μπορεί να είναι μόνο μία από δύο τιμές: "ανίχνευση" ή "ανίχνευση". Σε ένα υγιές άτομο, ο κανόνας (τιμή αναφοράς) πρέπει να "δεν ανιχνεύεται".

Υπάρχει επίσης μια ειδική ερμηνεία τέτοιων αποτελεσμάτων της διεξαχθείσας ποιοτικής έρευνας:

  • Το αποτέλεσμα είναι "ανακαλυφθεί". Αυτό σημαίνει ότι στο δείγμα βιολογικού υλικού που λαμβάνεται βρέθηκε από ένα θραύσμα RNA που είναι ειδικό για τον ιό της ηπατίτιδας C Συνεπώς, υπάρχει το γεγονός του ασθενούς με λοίμωξη από τον ιό της ηπατίτιδας Β με C. Εάν το αποτέλεσμα της ποιοτικής PCR είναι «ανακαλυφθεί», αυτό υποδεικνύει ότι τα αντίγραφα του ιού και αυτή τη στιγμή μολύνει νέα κύτταρα του ήπατος στο σώμα.
  • Το αποτέλεσμα δεν ανιχνεύεται. Τέτοια ετυμηγορία υποδεικνύει ότι στο δείγμα βιολογικού υλικού θραύσματος λαμβανόμενου RNA δεν ανιχνεύεται στο εργαστήριο, το οποίο είναι ειδικό για HCV RNA είτε ίδια συγκέντρωση της λοίμωξης παθογόνου στο δείγμα ήταν κάτω από το όριο ευαισθησίας της δοκιμής.

Στην οξεία φάση του RNA του ιού της ηπατίτιδας C, ποιοτικές μελέτες που χρησιμοποιούν την τεχνική PCR μπορούν να αποκαλυφθούν μετά από 1-2 εβδομάδες αμέσως μετά τη μόλυνση του σώματος, δηλαδή πολύ πριν την εμφάνιση αντισωμάτων στην ίδια την ηπατίτιδα.

Αναξιόπιστα αποτελέσματα αναλύσεων μιας τέτοιας έρευνας μπορούν να ληφθούν με:

  • μολυσμένο βιολογικό υλικό ·
  • παρουσία ηπαρίνης στο αίμα του ασθενούς.
  • παρουσία στο δείγμα χημικών ή πρωτεϊνικών ουσιών (αναστολέων) που επηρεάζουν διάφορα συστατικά της PCR.

Για την ποιοτική ανάλυση της PCR, δεν απαιτείται ειδική προετοιμασία του ασθενούς για τη μελέτη. Το φλεβικό αίμα χρησιμοποιείται ως υλικό.

Αξιολόγηση των αποτελεσμάτων

Οι ποιοτικές δοκιμές PCR έχουν έναν ορισμένο βαθμό ευαισθησίας και ανάλογα με την ακρίβεια της έρευνας και το επίπεδο του εξοπλισμού στο εργαστήριο μπορεί να κυμαίνεται μεταξύ 10 και 500 IU / ml.

Αυτό σημαίνει ότι εάν ο ιός στο δείγμα αίματος είναι παρόν σε πολύ χαμηλή συγκέντρωση (μικρότερη από το όριο ευαισθησίας του δεδομένου εργαστηρίου), ο ασθενής ασθενής μπορεί να προσδιοριστεί ως "μη ανιχνευόμενος". Εξαιτίας αυτού, όταν διεξάγεται η ποιοτική ανάλυση των PCR με χαμηλά επίπεδα ιαιμίας (ιός χαμηλή συγκέντρωση), για παράδειγμα, για ασθενείς που υποβάλλονται σε θεραπευτική αγωγή αντι-ιική θεραπεία, είναι σημαντικό να γνωρίζουμε, και το όριο ευαισθησίας του διαγνωστικού συστήματος.

Παραλλαγές διαγνωστικών συστημάτων

Για τον έλεγχο της ιολογικής ανταπόκρισης, συνιστάται η αντιική θεραπεία για τη χρήση διαγνωστικών συστημάτων με κατώφλι ευαισθησίας τουλάχιστον 50 IU / ml. Αυτά τα κριτήρια πληρούνται, για παράδειγμα: Αναλυτές Cobas Ampicolor HCV Test (γ ακρίβεια των 50 IU / ml) και RealBest HCV RNA (με ευαισθησία 15 IU / ml).

Σύμφωνα με τις συστάσεις του ΠΟΥ για τη δημιουργία ενός οριστική διάγνωση της ηπατίτιδας C, θα πρέπει να βασίζεται αποκλειστικά βάσει της τριπλής ανίχνευση του ιού RNA σε δείγματα ορού από έναν ασθενή με κανένα άλλο είδος δείκτη ηπατίτιδας.

Εκτός από τις μεθόδους PCR, μια μελέτη TMA (μέθοδος μεταγραφικού πολλαπλασιασμού) χρησιμοποιείται επίσης για την ανίχνευση του HCV RNA σε ασθενείς. Έχει το καλύτερο όριο ευαισθησίας (5-10 IU / ml), αλλά στη χώρα μας αυτή η μέθοδος δοκιμών δεν είναι ακόμη πολύ συνηθισμένη.

Το φάσμα των εντοπισμένων τροποποιήσεων των ιών

Αυτός ο ποιοτικός προσδιορισμός στον ορό της παρουσίας του RNA του ιού της ηπατίτιδας C καθιστά δυνατό τον προσδιορισμό διαφόρων γενότυπων αυτού του ιού. Επί του παρόντος, η επιστήμη γνωρίζει περισσότερους από έξι γονότυπους αυτού του ιού, καθώς και περίπου 10 υποτύπους της νόσου.

Οι ιοί 1, 2, 3 γονότυπων είναι συνηθισμένοι στη χώρα μας. Τα εργαστήρια μπορούν να αναγνωρίσουν τους ακόλουθους γονότυπους: 1α και 1β, 2α, 2β και 2γ και 3, 4, 5α και 6, ανεξάρτητα από τους υποτύπους. Για όλες τις τροποποιήσεις του ιού, η ειδικότητα της ανίχνευσης είναι 100%.

Ποσοτική ανάλυση της PCR

Χρησιμοποιώντας μια ποσοτική δοκιμή PCR, προσδιορίζεται το επίπεδο συγκέντρωσης του ιού της ηπατίτιδας σε δείγματα αίματος (ιικό φορτίο). Αυτή η δοκιμή για την ιαιμία (η συγκέντρωση του ιού) σας επιτρέπει να προσδιορίσετε τον αριθμό των μονάδων ενός συγκεκριμένου γενετικού υλικού (το πλέον ιικό RNA), το οποίο ανιχνεύεται σε μια ορισμένη ποσότητα. Σε αυτή την περίπτωση, προσδιορίστε τη συγκέντρωσή του σε 1 ml, που αντιστοιχεί σε 1 cu. δείτε

Οι ποσοτικές παράμετροι της ανάλυσης εκφράζονται σε αριθμούς, για τη χρήση αυτή ως μονάδες μέτρησης διεθνών μονάδων (IU) ανά χιλιοστόλιτρο (ml), που αναφέρονται ως ME / ml. Τώρα σε ορισμένα εργαστήρια η ποσότητα του ιού μπορεί να προσδιοριστεί σε άλλες μονάδες: ο αριθμός των αντιγράφων ανά ml, σημειώνεται ως αντίγραφα / ml.

  • Για την ηπατίτιδα C, μια τέτοια ποσοτική ανάλυση της PCR γίνεται λίγο πριν την έναρξη της θεραπείας. Στη συνέχεια, την 1η, 4η, 12η και 24η εβδομάδα. Η αξιολόγηση στη 12η εβδομάδα είναι ενδεικτική, επιτρέπει τον προσδιορισμό της αποτελεσματικότητας της θεραπείας.
  • Προετοιμασία για ανάλυση. Για την ποσοτική ανάλυση της PCR, δεν απαιτείται ειδική προετοιμασία του ασθενούς για τη μελέτη. Μισή ώρα πριν από τη δειγματοληψία, δεν πρέπει να καπνίζετε. Το φλεβικό αίμα χρησιμοποιείται ως εργαστηριακό υλικό.

Αξιολόγηση των αποτελεσμάτων

Για διαφορετικά συστήματα εργαστηριακών δοκιμών, υπάρχουν διάφοροι συντελεστές μετατροπής για αυτόν τον δείκτη σε IU / ml. Κατά μέσο όρο χρησιμοποιείται μια παράμετρος μετατροπής, στην οποία 4 αντίγραφα / ml = 1 IU / ml. Δηλαδή, εάν το εργαστήριο δώσει το αποτέλεσμα της ανάλυσης PCR 2,4 * 10 6 αντίγραφα / ml, τότε αυτή η παράμετρος πρέπει να διαιρείται με 4 και λαμβάνουμε 6 * 10 5 IU / ml.

Ένα υψηλό επίπεδο φορτίου 800.000 IU / ml θεωρείται υψηλό, το οποίο είναι περίπου ισοδύναμο με δείκτη 3.000.000 αντιγράφων / ml. Η χαμηλή ιαιμία, σύμφωνα με ορισμένους συγγραφείς, αντιστοιχεί στις παραμέτρους ποσοτικής PCR κάτω από 400.000 IU / ml.

Ως αποτέλεσμα της ποσοτικής δοκιμής, τα τελικά αποτελέσματα μπορούν να παραδοθούν όχι με τη μορφή ψηφιακής τιμής, αλλά: "κάτω από την περιοχή μέτρησης" ή "δεν ανιχνεύεται".

  • Αξιολόγηση: "κάτω από την περιοχή μέτρησης". Αυτό δείχνει ότι η ποσοτική δοκιμή απέτυχε να ανιχνεύσει ιικό RNA της ηπατίτιδας C, αλλά ο ίδιος ο ιός υπάρχει στον οργανισμό σε πολύ μικρές συγκεντρώσεις. Αυτό υποδεικνύεται από μια πρόσθετη ποιοτική δοκιμή, η οποία επιβεβαιώνει το γεγονός της παρουσίας του ιού.
  • Αξιολόγηση: "δεν ανιχνεύθηκε". Αυτό το αποτέλεσμα υποδεικνύει ότι η ποσοτική δοκιμή δεν ανίχνευσε ιό στο δείγμα RNA.

Η παράμετρος του ιικού φορτίου καθορίζει πρώτα απ 'όλα τον βαθμό της μολυσματικότητας της νόσου, το επίπεδο της "μολυσματικότητας" του ασθενούς. Όσο μεγαλύτερη είναι η συγκέντρωση του ιού στον ασθενή, τόσο μεγαλύτερη είναι η πιθανότητα να μεταφερθεί σε άλλους. Για παράδειγμα, όταν κάνετε σεξ με ένα άρρωστο άτομο ή μια κάθετη διαδρομή. Ένας τέτοιος ποσοτικός δείκτης βοηθά επίσης να προσδιοριστεί η αποτελεσματικότητα της θεραπείας του ασθενούς.

Η διεξαγωγή ποσοτικής ανάλυσης του PCC είναι σημαντική για την αντιική θεραπεία, αξιολογώντας την επιτυχία της και προγραμματίζοντας τη διάρκεια της πορείας. Έτσι, με την ταχεία απόκριση του σώματος στη θεραπεία και με χαμηλό βαθμό ιαιμίας, η διάρκεια της θεραπείας μπορεί να μειωθεί.

Με μια αργή μείωση της ποσοτικής παραμέτρου PCR, η αντιιική θεραπεία πρέπει να επεκταθεί ή να τροποποιηθεί. Αν το επίπεδο του ιϊκού φορτίου είναι χαμηλό, τότε αυτός είναι ένας ευνοϊκός παράγοντας της θεραπείας, εάν είναι υψηλός, τότε η εφαρμοζόμενη μέθοδος θεραπείας είναι αναποτελεσματική και τα φάρμακα ή οι μέθοδοι χρήσης τους πρέπει να αλλάξουν.

Ιογενές φορτίο με ηπατίτιδα C: αποκωδικοποίηση

✓ Το άρθρο ελέγχεται από γιατρό

Το ιικό φορτίο είναι η ποσότητα ή το περιεχόμενο στο αίμα ενός ασθενούς ιικών ριβονουκλεϊνικών οξέων (γενετικό υλικό). Με βάση τον αριθμό των κυττάρων RNA που βρέθηκαν, είναι δυνατόν να αναπτυχθεί ο ιός και αν δεν μολύνει νέα κύτταρα. Η δοκιμή αυτή πρέπει να διεξάγεται εάν ο ασθενής έχει αντισώματα έναντι του HCV. Ο αριθμός των κυττάρων με γενετικό υλικό μετράται με ένα χιλιοστόλιτρο αίματος. Μετά τη διεξαγωγή αυτού του τεστ θα μάθετε να μαθαίνετε για τη δική σας διάγνωση "ηπατίτιδας C" ή την απουσία αυτής.

Ανάλυση αποκωδικοποίησης της ηπατίτιδας C

Διάγνωση

Ο ιός της ηπατίτιδας C

Χρησιμοποιούνται οι ακόλουθοι τύποι δοκιμών:

  • ποιότητας στοχεύει στην ανίχνευση της παρουσίας ηπατίτιδας C, δηλαδή του RNA του ιού. Μια τέτοια δοκιμή καθιστά δυνατή την επιβεβαίωση ή την άρνηση του γεγονότος της νόσου. Στην έξοδο λαμβάνετε μια θετική απάντηση (ο ιός ανιχνεύεται) ή αρνητικός (τα αποτελέσματα δεν υπερβαίνουν τον κανόνα).
  • ποσοτικά, που αναφέρθηκε προηγουμένως, χρησιμοποιείται συχνά για τη διάγνωση της κατάστασης των ασθενών που βρίσκονται στα μεταγενέστερα στάδια της ηπατίτιδας. Τα αποτελέσματα των δοκιμών συμβάλλουν στην αλλαγή της θεραπείας σύμφωνα με την τρέχουσα κατάσταση του ασθενούς, για την πρόβλεψη των αποτελεσμάτων της θεραπείας με ένα συγκεκριμένο φάρμακο. Η δοκιμή αυτή δίνει επίσης μια σαφή ιδέα των περιόδων επιδείνωσης και ύφεσης της ηπατίτιδας.

Η δοκιμή για την παρουσία αντισωμάτων στον ιό της ηπατίτιδας C (HCV)

Η δοκιμασία OraQuick HCV-express για την ηπατίτιδα C

Η χρήση τέτοιων μεθόδων διάγνωσης ξεκίνησε σχετικά πρόσφατα, αλλά η υψηλή ακρίβεια και η ποιότητα της έρευνας έχουν ήδη αποδειχθεί.

Βιοχημική εξέταση αίματος

Δοκιμές

Η ποσότητα του γενετικού υλικού που περιέχεται στο αίμα είναι ένα ιικό φορτίο. Στην περίπτωση που ο καθορισμένος αριθμός των ιικών κυττάρων είναι μεγάλος, μπορούμε να κρίνουμε τη συνεχιζόμενη διαδικασία βλάβης σε υγιή κύτταρα. Κατά συνέπεια, ο ασθενής θα πρέπει να αντιμετωπίζεται με τέτοιο τρόπο ώστε να επιτυγχάνεται γρήγορα μια περίοδο ύφεσης και να σταματήσει η μόλυνση.

Στην ιατρική πρακτική, η αξιολόγηση του ιικού φορτίου συνήθως εκτελείται αν ο ασθενής έχει ανιχνεύσει ποσότητα αντισωμάτων που υπερβαίνει τον κανόνα. Προκειμένου να προσδιοριστεί η ποσότητα του RNA, χρησιμοποιούνται τρεις μέθοδοι.

1. PCR ή αλυσιδωτή αντίδραση πολυμεράσης είναι σε θέση να ανιχνεύσει ακόμη και μια πολύ μικρή παρουσία του ιού της ηπατίτιδας.

Η PCR επιτρέπει τον πολλαπλασιασμό της ποσότητας του DNA μικροβιακών κυττάρων

Η ιδιαίτερα ευαίσθητη μέθοδος έχει γίνει η πιο δημοφιλής και περιζήτητη μέθοδος σε άτομα που έχουν διαγνωστεί με υποψία ηπατίτιδας C. Η PCR θα παρουσιάσει αντισώματα που αναπτύσσονται από τον οργανισμό ως απάντηση σε λοίμωξη, ακόμη και αν είναι πολύ λίγα. Ένα μη μολυσμένο άτομο θα έχει αρνητικό αποτέλεσμα, επειδή ούτε αντισώματα ούτε γενετικό υλικό θα ανιχνεύσουν PCR.

Όταν ο ασθενής έχει RNA, τότε ο γιατρός συνταγογραφεί κατάλληλες θεραπευτικές διαδικασίες και φάρμακα για να θεραπεύσει τον παρόντα ιό, διεξάγει επιπλέον διαγνωστικά (τουλάχιστον υπερηχογράφημα του ήπατος και λήψη βιολογικού δείγματος ηπατικού ιστού).

Διάγνωση της ηπατίτιδας C

2. Διακλαδισμένη μέθοδος DNA. Είναι μια τάξη μεγέθους φθηνότερη σε σχέση με την προηγούμενη δοκιμή, επομένως εφαρμόζεται στα κρατικά πανεπιστήμια για να καθορίσει τη διάγνωση. Είναι βολικό, καθόσον επιτρέπει να διαπιστωθεί αν το RNA του ιού υπάρχει στο αίμα αμέσως σε μεγάλο αριθμό ασθενών. Φυσικά, η μέθοδος έχει τα μειονεκτήματά της, η κύρια είναι μικρότερη ευαισθησία από την PCR. Όταν η PCR ανιχνεύει την παρουσία του ιού, αυτή η μέθοδος μπορεί να δώσει αρνητικό αποτέλεσμα. Ως εκ τούτου, χρησιμοποιείται από γιατρούς συχνά σε περιπτώσεις που δεν υπάρχει αμφιβολία για την παρουσία του ιού, αλλά υπάρχει ανάγκη να διασφαλιστεί η διάγνωση.

Η μέθοδος διακλαδισμένου ϋΝΑ (bDNA)

3. Η μέθοδος TMA (μεταγραφική ενίσχυση) έχει τον ίδιο μηχανισμό με τις δύο προηγούμενες μεθόδους, αποκαλύπτει RNA της ηπατίτιδας C στο αίμα. Αυτός είναι ο πιο φθηνός και οικονομικός τρόπος για να μάθετε για την παρουσία της νόσου. Είναι σε θέση να ανιχνεύει ακόμη και μικρές συγκεντρώσεις RNA, έτσι χρησιμοποιείται ενεργά στη διάγνωση της ηπατίτιδας.

Όρια ιικού φορτίου στην ηπατίτιδα

Επικίνδυνο ιικό φορτίο

Πόσο ένα άρρωστο άτομο είναι επικίνδυνο για τους άλλους καθορίζει τη συγκέντρωση του ιικού RNA στο σώμα. Αυτός ο δείκτης δίνει επίσης μια απάντηση στο ερώτημα του πόσο αποτελεσματική ιατρική θεραπεία θα είναι. Επομένως, αν εντοπιστεί πολύ μικρός αριθμός RNA, είναι δυνατόν να κρίνουμε την ταχύτερη ανάκτηση ενός ατόμου.

Ο ιός της ηπατίτιδας C (HCV, HCV)

Επιστρέφοντας στα αποτελέσματα με υψηλό ιικό φορτίο, σημειώνουμε - αυτός ο δείκτης μπορεί να οδηγήσει σε επιπλοκές που επηρεάζουν όλα τα εσωτερικά όργανα και όχι μόνο το ήπαρ. Για την καταπολέμηση του ιού στην ενεργή φάση, όταν η λοίμωξη των υγιεινών κυττάρων συνεχίζεται, ο ασθενής έχει συνταγογραφήσει μακρά πορεία σύνθετης θεραπείας. Κατά τη διάρκεια της θεραπείας, ο ασθενής θα πρέπει να υποβληθεί περιοδικά σε δοκιμασία για τον προσδιορισμό του ιικού φορτίου, έτσι ώστε οι γιατροί να γνωρίζουν την αποτελεσματικότητα ορισμένων φαρμάκων και την ανικανότητα να αντισταθούν στην ασθένεια άλλων. Σύμφωνα με το αποτέλεσμα της δοκιμής, η θεραπεία πρέπει να προσαρμοστεί. Αν η δοκιμή έδειξε θετική δυναμική και μειώθηκε η ποσότητα του RNA, η θεραπεία μειώνεται ή ο ασθενής μεταφέρεται σε θεραπεία συντήρησης. Φυσικά, η δοκιμή για ιικό φορτίο δεν μπορεί να δώσει μια αντικειμενική εικόνα της κατάστασης του ασθενούς, οπότε θα πρέπει να πραγματοποιείται σε συνδυασμό με άλλες αναλύσεις και διαγνωστικά μέτρα.

Η δομή του ιού της ηπατίτιδας C

Ο κύκλος ζωής του ιού της ηπατίτιδας C

Ώρα ανάλυσης

Μέχρι μία εβδομάδα αργότερα ο ασθενής θα έχει τα αποτελέσματα της δοκιμής του για ιικό φορτίο. Εάν πρόκειται για ασθενή που αντιμετωπίζεται για ηπατίτιδα C, τότε η επόμενη δοκιμασία πρέπει να γίνει σε ένα μήνα. Μια εφάπαξ εργαστηριακή ανάλυση αυτού του τύπου διεξάγεται από άτομα με αντισώματα στο αίμα τους. και μία φορά το χρόνο παρουσία μίας σταθερής ιογενούς απάντησης. Βάσει των αποτελεσμάτων των διαφόρων αναλύσεων, το αποτέλεσμα μπορεί να δοθεί σε μορφή αρνητικής ή θετικής απόκρισης ή με ένδειξη συγκεκριμένης ποσότητας RNA του ιού.

Αναλύσεις για ηπατίτιδα

Επίσης, ο γιατρός μπορεί να αφήσει ένα αρχείο "RNA βρέθηκε κάτω από την περιοχή μέτρησης." Αυτό σημαίνει ότι υπάρχει RNA στον ασθενή, αλλά υπάρχουν λίγες από αυτές που η μέθοδος που χρησιμοποιήθηκε δεν μπορούσε να δείξει συγκεκριμένη ποσότητα (απαιτούνται επιπλέον διαγνωστικά).

Οι ποσοτικές δοκιμές είναι καλές επειδή βοηθούν τους γιατρούς να καθορίσουν την έκταση της ανάγκης να μετακινηθούν στο επόμενο στάδιο της θεραπείας ή την ανάγκη να αλλάξουν κάτι σε αυτό. Επίσης, είναι δυνατό να ανιχνευθούν άνθρωποι οι οποίοι, λόγω των υψηλών επιπέδων RNA στο αίμα, ενδέχεται να αποτελέσουν κίνδυνο για τους άλλους.

Η ανάλυση δίνεται με άδειο στομάχι, το πιο ενημερωτικό είναι το φλεβικό αίμα.

Εργαστηριακή διάγνωση ηπατίτιδας C

Επεξήγηση

Κανονικά, το RNA θα πρέπει να απουσιάζει στο αίμα. Μονάδα ME / ml (ποσότητα RNA ανά χιλιοστόλιτρο αίματος). Όσον αφορά την αποκωδικοποίηση των αποτελεσμάτων, η περιεκτικότητα RNA πάνω από τον κανόνα θεωρείται ότι είναι από 800.000 IU / ml.

Μερικά εργαστήρια παρέχουν τα αποτελέσματα με την ακόλουθη μορφή 4x110 IU / ml. Σε αυτήν την περίπτωση, χαμηλή ιαιμία (περιεκτικότητα ιού στο αίμα) θεωρείται ότι προκύπτει από 600 IU / ml έως 3h104 IU / ml, μέσος όρος 3h104 από IU / ml έως 8h105 IU / ml. Και εκτός του κανόνα αναγνωρίζεται δείκτης άνω των 8x105 IU / ml (800.000 IU / ml σε άλλη ταξινόμηση).

Έτοιμη ανάλυση για την ηπατίτιδα

Ιογενές φορτίο στην ηπατίτιδα C

Σφάλματα αναλύσεων

Μερικές φορές τα καθιερωμένα αποτελέσματα αλλάζουν σύμφωνα με τον τρόπο αποθήκευσης και επεξεργασίας του αίματος που συλλέχθηκε και αναλύθηκε. Αξίζει ιδιαίτερα να σημειωθεί ότι το ίδιο αίμα μπορεί να δώσει διαφορετικά αποτελέσματα σε δύο εργαστήρια.

Δοκιμή αίματος για ιικό φορτίο

Στην περίπτωση που το αίμα μολύνθηκε με χημικές ή πρωτεϊνικές ενώσεις, η ηπαρίνη, αποθηκεύτηκε ακατάλληλα, η ανάλυση θα ήταν ανακριβής ή εσφαλμένη.

Για να διασφαλιστεί ότι η θεραπεία για το ιικό φορτίο έχει διορθωθεί σωστά, είναι απαραίτητο να επισκέπτεστε περιοδικά το εργαστήριο και να δώσετε αίμα. Πράγματι, η μείωση του δείκτη κατά τη διάρκεια της θεραπείας δείχνει την επιτυχή χρήση του φαρμάκου. Σε αυτή την περίπτωση, οι γιατροί λένε ότι το θεραπευτικό αποτέλεσμα έχει οδηγήσει σε μια ιογενή απόκριση.

Το RNA μπορεί να αρχίσει να μειώνεται ήδη από την τρίτη ημέρα της θεραπείας, η οποία θα δοκιμάσει γρήγορα τη δοκιμή.

Λαμβάνοντας αίμα για ανάλυση - φωτογραφία

Πιστεύεται ότι η θεραπεία είναι επιτυχής, εάν κατά τη διάρκεια της θεραπείας το ιικό φορτίο μειώθηκε κατά τουλάχιστον δύο μονάδες. Εάν το επίπεδο του RNA παρέμεινε στο ίδιο επίπεδο ή ακόμα και αυξήθηκε, πιθανότατα το φάρμακο που χρησιμοποιείται δεν θα βοηθήσει να απαλλαγούμε από τη ιογενή ηπατίτιδα C. Εάν το ιικό φορτίο αυξηθεί μετά την πορεία της θεραπείας, τότε πιθανότατα πρόκειται για υποτροπή. Αυτός είναι ο λόγος για τον οποίο οι άνθρωποι που επιτυχώς θα ξεπεράσουν την ηπατίτιδα θα πρέπει στο μέλλον να λαμβάνουν περιοδικά μια ανάλυση του ιϊκού φορτίου, προκειμένου να παρακολουθούν την κατάσταση του σώματος.

Βίντεο - Αναλύσεις για ηπατίτιδα: τι πρέπει να ξέρετε;

Σας αρέσει το άρθρο;
Αποθηκεύστε για να μην χάσετε!

Ανάλυση της PCR για την ηπατίτιδα C

Η διάγνωση της ηπατίτιδας περιλαμβάνει ένα πλήρες σύνολο εξετάσεων για τον προσδιορισμό της παρουσίας του ιού στο αίμα. Ένας τρόπος για την ανίχνευση μιας νόσου είναι η χρήση μιας μεθόδου όπως η PCR για την ηπατίτιδα C. Γιατί είναι τόσο σημαντική η ανάλυση της ηπατίτιδας PCR, πώς γίνεται και αποκωδικοποιείται;

Τι είναι αυτό;

Η αλυσιδωτή αντίδραση πολυμεράσης, ή PCR, χρησιμοποιείται για τη διάγνωση των ελκών του στομάχου, της κολίτιδας, της εντερίτιδας. Αλλά το κύριο πλεονέκτημά του είναι ότι βοηθά στην ανίχνευση στο σώμα τόσο του ίδιου του ιού της ηπατίτιδας C όσο και αντισωμάτων σε αυτό, τα οποία έχουν την ικανότητα να μην προκαλούν το ανοσοποιητικό σύστημα να αντιδράσει λόγω της ικανότητάς τους να μεταλλάσσονται.

Η μελέτη και η ουσία της είναι να δημιουργηθούν ορισμένες συνθήκες κάτω από τις οποίες συμβαίνει μια αλυσιδωτή αντίδραση RNA ηπατίτιδας. Εάν, σε σύγκριση με την αλληλουχία νουκλεοτιδίων του ιού της ηπατίτιδας C, συναντάται σύμπτωση, αυτό δείχνει ότι υπάρχουν ιικά σωματίδια στο αίμα και η αποσύνθεση συμβαίνει στο ήπαρ. Εάν η ποσότητα του ιού είναι κάτω από ένα ορισμένο επίπεδο, γίνεται αρνητική διάγνωση, εάν είναι υψηλότερη - θετική.

Υπάρχουν δύο τύποι εξετάσεων αίματος που χρησιμοποιούν τη μέθοδο PCR για ηπατίτιδα: ποσοτική ανάλυση και ποιοτική ανάλυση.

Η ποσοτική PCR, όπως αναφέρθηκε παραπάνω, καθορίζει τη συγκέντρωση του RNA του ιού της ηπατίτιδας. Επιπλέον, είναι σε θέση να παρέχει πληροφορίες σχετικά με την ένταση με την οποία αναπτύσσεται η παθολογία και την αποτελεσματικότητα της συνταγογραφούμενης θεραπείας. Η ποσοτική ανάλυση για την ηπατίτιδα C είναι εξαιρετικά σημαντική, καθώς καθορίζει την αντίσταση στη δράση των αντιιικών φαρμάκων και επιτρέπει την προσαρμογή της θεραπείας.

Αφού ο ασθενής έχει υποβληθεί σε μια πορεία θεραπείας, η PCR βοηθά στον προσδιορισμό της περαιτέρω σειράς συνταγών. Σε ορισμένες περιπτώσεις, απαιτούνται πρόσθετες έρευνες. Για παράδειγμα, εάν το επίπεδο της ALP είναι αυξημένο (αλλά όχι περισσότερο από 2 φορές σε μισό χρόνο) και η ανάλυση υποδεικνύει ιικό φορτίο άνω των 105 IU / ml, ο ασθενής λαμβάνει βιοψία. Εάν η ποσοτική ανάλυση στην PCR αποκαλύψει ισχυρή φλεγμονή και ίνωση, ο ασθενής έχει συνταγογραφηθεί μια πορεία θεραπείας με αντιιικά φάρμακα.

Σε περιπτώσεις όπου ένας μεγάλος αριθμός σωματιδίων του ιού συνδυάζονται με υψηλή ALT, ο ασθενής πρέπει να αντιμετωπιστεί αμέσως χωρίς πρόσθετα διαγνωστικά μέτρα.

Πάρτε αυτό το τεστ και μάθετε εάν έχετε προβλήματα με το ήπαρ.

Η ποιοτική ερμηνεία των δεικτών για την ποσοτική ανάλυση του αίματος για την ηπατίτιδα μπορεί να γίνει μόνο από ειδικευμένους και πεπειραμένους επαγγελματίες και η σύγχρονη τεχνολογία βοηθά να γίνει αυτό σε χαμηλές συγκεντρώσεις του ιού στο αίμα.

Η ποιοτική ανάλυση PCR στοχεύει στον προσδιορισμό και την επιβεβαίωση της πραγματικής παρουσίας του ιού στον οργανισμό. Διεξάγεται με την ανίχνευση αντισωμάτων κατά της ηπατίτιδας στο αίμα. Πρόκειται για ένα ποιοτικό τεστ για την ηπατίτιδα εγγυάται την ακρίβεια του αποτελέσματος κατά 100% και σας δίνει τη δυνατότητα να διαγνώσει στα αρχικά στάδια της νόσου, η οποία καθιστά δυνατή την καταπολέμηση της ηπατίτιδας Β μέσα στις πρώτες εβδομάδες μετά τη μόλυνση και αυξάνει τις πιθανότητες πλήρους αποκατάστασης (στην περίπτωση της νόσου τύπου Β).

Πλεονεκτήματα της PCR

Όταν διερευνάται η μέθοδος PCR και αποκρυπτογραφείται η εξέταση αίματος για ηπατίτιδα, είναι επίσης δυνατό να προσδιοριστεί ο γονότυπος του αιτιολογικού παράγοντα της νόσου. Υπάρχουν 6 γονότυποι του ιού και ένας μεγάλος αριθμός υποτύπων, αλλά στην περιοχή μας, η κατανομή των 1, 2 και 3 γονότυπων.

Άλλα πλεονεκτήματα αυτού του τύπου διάγνωσης είναι:

  • Υψηλή ακρίβεια των ληφθέντων δεικτών και χαμηλή πιθανότητα σφαλμάτων σε αυτά.
  • υψηλό επίπεδο ευαισθησίας στα ιικά σωματίδια στο αίμα.
  • τη δυνατότητα ανίχνευσης διαφόρων παθογόνων παραγόντων ·
  • διάγνωση παθογόνων ενδοκυτταρικών μικροοργανισμών που έχουν υψηλή αντιγονική μεταβλητότητα.
  • η εργασία με την αποκωδικοποίηση της ανάλυσης για την ηπατίτιδα επιτρέπει να εντοπιστούν λανθάνουσες ρευματικές λοιμώξεις.

Σε ποιον διορίζεται

Η ανάλυση της PCR για την ηπατίτιδα αναγκαστικά λαμβάνει τις ακόλουθες κατηγορίες ανθρώπων:

  • έγκυες γυναίκες ·
  • οι υπάλληλοι των ιδρυμάτων υγείας ·
  • δυνητικοί δότες αίματος και οργάνων ·
  • εκείνοι που έχουν τα χαρακτηριστικά σημεία της νόσου.
  • HIV-μολυσμένα άτομα.
  • οι τοξικομανείς ·
  • τα πρόσωπα που οδηγούν σε ατρόμητη σεξουαλική ζωή.

Πώς γίνεται η ανάλυση και απαιτείται εκπαίδευση;

Η δειγματοληψία αίματος για PCR διεξάγεται από τη φλέβα. Συνήθως, αυτό συμβαίνει το πρωί πριν το άτομο φάει, επειδή μετά το φαγητό πρέπει να περάσει τουλάχιστον 8 ώρες. Σε ακραίες περιπτώσεις, μπορεί να ληφθεί αίμα για εξέταση την ημέρα ή το βράδυ, αλλά το χρονικό χάσμα μεταξύ ανάλυσης και πρόσληψης τροφής πρέπει να είναι τουλάχιστον 5 ώρες.

Ο ανθρώπινος παράγοντας μπορεί να επηρεάσει ποσοτικά τα αποτελέσματα: ακρίβειά τους σε ορισμένες περιπτώσεις μειώνεται από 100% έως 95%, έτσι, ένα αιμοδοσία είναι αναγκαία για την προετοιμασία εκ των προτέρων. Η ποιότητα του βιοϋλικού για ανάλυση θα είναι κατάλληλη όταν ο ασθενής ακολουθεί τους ακόλουθους κανόνες:

  • Πριν δώσετε αίμα, μπορείτε να πίνετε μόνο καθαρό νερό.
  • για δύο ημέρες πριν από τη μελέτη πρέπει να απορριφθεί από την πρόσληψη των τηγανισμένων και λιπαρών τροφίμων, καθώς και αλκοολούχα ποτά?
  • μια ημέρα πριν από την επίσκεψη στο εργαστήριο πρέπει να σταματήσουν να παίρνουν φάρμακα. Σε περίπτωση που αυτό δεν είναι δυνατό, είναι απολύτως απαραίτητο να προειδοποιήσετε γι 'αυτό τον βοηθό του εργαστηρίου και τον θεράποντα ιατρό.
  • την παραμονή των αγχωτικών καταστάσεων και της σωματικής άσκησης.
  • Μην περάσετε από μελέτες υπερήχων, ακτινολογίας και οργάνων λίγο πριν τη δωρεά αίματος.
  • μία ώρα πριν από την ανάλυση πρέπει να αποφύγει το κάπνισμα.
  • 20 λεπτά πριν από την παράδοση του αίματος θα πρέπει να αποσπάται η προσοχή, να ηρεμήσει και ακόμη και να αναπνεύσει.

Εάν η δοκιμή εκτελείται από παιδί κάτω των 5 ετών, οι γονείς πρέπει να εξασφαλίζουν ότι πίνουν βραστό νερό κάθε 10 λεπτά για μισή ώρα πριν από τη δειγματοληψία του βιοϋλικού.

Επεξήγηση των ληφθέντων δεδομένων

Η ανάλυση μπορεί να παρουσιαστεί με λέξεις (σε περίπτωση ποιοτικής έρευνας), για παράδειγμα, "δεν βρέθηκε" ή "κάτω από το εύρος των αλλαγών". Στην πρώτη περίπτωση, αυτό δείχνει ότι η μόλυνση δεν εντοπίστηκε. Στο δεύτερο - ότι ο ιός είναι παρών, αλλά σε μια μικρή ποσότητα. Η κατάσταση αυτή απαιτεί επανεξέταση.

Το ιικό φορτίο προσδιορίζεται από την ποσότητα μολυσματικού RNA και δηλώνεται ως ΜΕ / ml ή αντίγραφα / ml.

Ο κανονικός δείκτης (κανόνας) της ποσοτικής ανάλυσης για την ηπατίτιδα C είναι το εύρος από 1,8x102 έως 2,4x107 IU / ml.

Η συγκέντρωση του ιού στο αίμα μπορεί να είναι:

  • χαμηλή: από 600 IU / ml έως 3x104 / ml.
  • μέσος όρος: από 3x10 4 IU / ml έως 8x105 IU / ml.
  • υψηλή: περισσότερο από 8x10 5 IU / ml.

Ποσοτική και ποιοτική ανάλυση της PCR για ηπατίτιδα επιτρέπει τον προσδιορισμό της παρουσίας του ιού στο σώμα και του επιπέδου συγκέντρωσης του. αλυσιδωτή αντίδραση Polirazmernaya σε θέση να διαγνώσει τη νόσο στα πρώιμα στάδιά της, αλλά είναι απαραίτητο για τους ασθενείς το συντομότερο δυνατόν αντιμετωπίζονται ιατρικά ιδρύματα για βοήθεια και αυστηρά ακολούθησε τις συστάσεις του θεράποντα ιατρού.

Οι δείκτες της ηπατίτιδας C και η ερμηνεία των αποτελεσμάτων της ποσοτικής ανάλυσης του HCV RNA

Πρόσφατα, στις μηχανές αναζήτησης των πόρων Διαδικτύου, το ερώτημα "ποσοτική ανάλυση για την ηπατίτιδα με αποκωδικοποίηση" εμφανίζεται όλο και περισσότερο.

Πράγματι, ο ιός της ηπατίτιδας είναι κοινός και επικίνδυνος, η νόσος επηρεάζει το ήπαρ. Το όνομά της ήρθε από το lat. ηπατίτιδα - φλεγμονή του ήπατος. Η μόλυνση εμφανίζεται μέσω του αίματος ή μέσω σεξουαλικής επαφής, οι ενήλικες είναι πιο πιθανό να αρρωσταίνουν σε ηλικία 25 έως 50 ετών.

Υπάρχουν διάφοροι τύποι αυτής της ασθένειας. Η ηπατίτιδα C δεν έχει έντονη έκφραση, αλλά σε 40-70% των περιπτώσεων περνάει σε μια χρόνια μορφή, μπορεί να προκαλέσει κίρρωση του ήπατος και καρκίνο. Αυτή η ασθένεια απαιτεί ακριβή διάγνωση και ερμηνεία των αποκτηθέντων δεδομένων, για τα οποία αναπτύσσονται οι μέθοδοι. Το ένα είναι ανάλυση RNA του HCV RNA με PCR.

Ανάλυση RNA του HCV RNA με PCR

Το RNA (ριβονουκλεϊνικό οξύ) είναι ένα είδος μακρομορίου, ένα από τα συστατικά ενός ζωντανού κυττάρου. Το RNA είναι υπεύθυνο για την κωδικοποίηση των γενετικών πληροφοριών. Ο ιός της ηπατίτιδας C περιέχει ένα μόριο RNA και έχει τη συνήθεια να μεταλλάσσεται. Υπάρχουν έξι από τους υποτύπους της, καθώς και πολλοί υποτύποι.

Η ασθένεια στο χρόνιο της στάδιο οδηγεί σε ίνωση του ήπατος - οι συνδετικοί ιστοί μεγαλώνουν, η δομή του οργάνου σταδιακά σπάει. Η ίνωση μπορεί να υποβληθεί σε έγκαιρη θεραπεία, καθώς το ήπαρ δεν έχει υποστεί ακόμα καταστροφικές διεργασίες. Σε αντίθεση με την κίρρωση, μια σοβαρή μη αναστρέψιμη ασθένεια του ήπατος, στην οποία η ίνωση μπορεί να αναπτυχθεί χωρίς την έγκαιρη λήψη των απαραίτητων μέτρων.

Ένα άτομο με υποψία ότι έχει ιό ηπατίτιδας προσδιορίζει αντισώματα σε αυτό. Εάν δεν υπάρχουν - η ασθένεια αποκλείεται, στην παρουσία τους καταφεύγουν σε μια μέθοδο PTSR (αλυσιδωτή αντίδραση polimeraznoj). Στη μοριακή βιολογία, είναι πειραματικό, αλλά διαδραματίζει ηγετικό ρόλο στις μεθόδους διάγνωσης μολυσματικών ασθενειών. Με τη βοήθεια αυτού, μπορεί να αυξηθεί σημαντικά η συγκέντρωση θραυσμάτων μορίων στο δείγμα. 10 ημέρες μετά τη μόλυνση, το RNA είναι ήδη δυνατό να ανιχνευθεί στο αίμα.

Αυτή η μέθοδος είναι η μόνη που επιτρέπει την ταυτοποίηση της νόσου στα αρχικά στάδια. Με άλλους τρόπους (π.χ. βιοχημική εξέταση αίματος) αυτό δεν μπορεί να γίνει, δεδομένου ότι το ήπαρ δεν έχει επηρεαστεί ακόμη.

Η μέθοδος ανακαλύφθηκε το 1993 από τον βιοχημικό Carrie Mullis, για τον οποίο έλαβε το βραβείο Νόμπελ. Η PCR ήταν μια σημαντική ανακάλυψη στην ιατρική και την επιστήμη, καθώς επέτρεψε την ταχεία και ακριβή αναγνώριση των λοιμώξεων στο αίμα και σε άλλα βιολογικά υλικά ενός ατόμου. Με άλλα λόγια, η μέθοδος επιτάχυνε την ανάπτυξη της διάγνωσης των μολυσματικών ασθενειών.

Η ανάλυση RNA του HCV RNA με PCR είναι αποτελεσματική για τους ακόλουθους λόγους:

  • Έχει καλή ευαισθησία - ανιχνεύεται ακόμη και μια μικρή ποσότητα του ιού στο αίμα.
  • ο ίδιος ο ιός καθορίζεται και όχι τα παραπροϊόντα που δημιουργούνται από αυτόν.
  • προσδιορίζεται ο τύπος του παθογόνου παράγοντα.

Διαφορές στην ποσοτική ανάλυση του HCV RNA από ποιοτικό

Η μέθοδος PCR περιλαμβάνει δύο βασικές μεθόδους για τη μελέτη βιολογικού υλικού για την αναζήτηση του ιού της ηπατίτιδας C:

Αυτές οι μελέτες έχουν διαφορετικά καθήκοντα.

Η ποιοτική ανάλυση για την ηπατίτιδα με αποκωδικοποίηση επιβεβαιώνει την παρουσία του ιού μετά την ανεύρεση των αντισωμάτων της νόσου στο αίμα. Εάν η μελέτη έδωσε ένα θετικό αποτέλεσμα, τότε η ασθένεια βρέθηκε. Με άλλα λόγια, ένα άτομο είναι μολυσμένο. Αν προκύψει αρνητικό αποτέλεσμα, αυτό σημαίνει ότι το άτομο δεν έχει μολυνθεί ή υπάρχει πολύ μικρή συγκέντρωση του ιού. Αυτή η συγκέντρωση δεν ανιχνεύεται με αυτόν τον τρόπο.

Επιπλέον, η κλινική εικόνα της νόσου βασίζεται σε δείκτες ηπατίτιδας C και ερμηνεία της ανάλυσης. Οι κύριοι δείκτες είναι οι ανοσοσφαιρίνες (αντισώματα) Μ και G. Η παρουσία τους στο αίμα του ασθενούς υποδηλώνει μια μη χαρακτηριστική διαδικασία για έναν υγιή οργανισμό. Με βάση την παρουσία αυτών των αντισωμάτων, ο ασθενής συνήθως διαγιγνώσκεται με μια κύρια διάγνωση.

Προβλέπεται ποσοτική ανάλυση για την αρχική ανίχνευση αντισωμάτων και, εάν είναι απαραίτητο, για θεραπεία.

Επίσης, μια ποσοτική ανάλυση για την ηπατίτιδα C συνταγογραφείται για την ανίχνευση μικτής ηπατίτιδας (μόλυνση με αρκετούς ιούς).

Η ποσοτική ανάλυση με αποκωδικοποίηση εκτελείται με σκοπό:

  • διευκρίνιση της τελικής διάγνωσης ·
  • ευθυγράμμιση των προβλέψεων σχετικά με την πορεία της νόσου και τη θεραπεία της - παράταση, μείωση της θεραπείας ή αλλαγή τακτικής.
  • παρακολούθηση της θεραπείας.

Για να βεβαιωθείτε ότι τα αποτελέσματα είναι σωστά, πρέπει να ακολουθήσετε το συνταγογραφούμενο σχήμα πριν κάνετε δωρεά αίματος:

  • έρχονται στο εργαστήριο με άδειο στομάχι, η τελευταία φορά που μπορείτε να πάρετε τα τρόφιμα μπορεί να είναι 8 ώρες πριν από τη διαδικασία?
  • δύο ημέρες πριν από τη μελέτη, απαγορεύεται το οινόπνευμα, τα λιπαρά και τα τηγανητά τρόφιμα.
  • υπερηχογράφημα, μασάζ, φυσιοθεραπεία πριν από τη μελέτη δεν μπορεί να διεξαχθεί?
  • για την ημέρα, η λήψη φαρμάκων απαγορεύεται, εάν η λήψη των μεμονωμένων φαρμάκων δεν μπορεί να ακυρωθεί, αυτό αναφέρεται πριν από τη δειγματοληψία αίματος.
  • πριν από τη διαδικασία συνιστάται η μείωση των σωματικών και νευρικών φορτίων όσο το δυνατόν περισσότερο.

Η εκπλήρωση αυτών των απαιτήσεων θα είναι το κλειδί για την επίτευξη των σωστών αποτελεσμάτων της ποσοτικής ανάλυσης για την ηπατίτιδα C.

Αποκωδικοποίηση της ποσοτικής ανάλυσης

Αφού λάβουμε τους δείκτες ποσοτικής ανάλυσης, είναι απαραίτητο να αποκρυπτογραφήσουμε τα αποτελέσματα των δοκιμών για την ηπατίτιδα C. Τα αποτελέσματα υπολογίζονται τόσο σε μονάδες ME / ml όσο και σε αντίγραφα ανά ml. Για να λάβετε τα αποτελέσματα που αναφέρθηκαν στο αντίγραφο, χρησιμοποιούνται διάφορες μέθοδοι.

  • Παρακολούθηση HCV (συντελεστής μετατροπής σε ME - 2,7).
  • LCX HCV RNA (ο συντελεστής μετατροπής για ME είναι 3.8).

Πίνακας. Αποκωδικοποίηση της ποσοτικής ανάλυσης του HCV RNA με PCR.

Ποσοτική ανάλυση της PCR για την ηπατίτιδα C

Υπάρχουν πολλοί υποτύποι του HCV, γι 'αυτό δεν είναι πάντοτε δυνατό να επιλέγονται αποτελεσματικά αντιιικά φάρμακα και να επιτυγχάνονται τα επιθυμητά αποτελέσματα στη θεραπεία. Η ποικιλία των παθογόνων οφείλεται στην ικανότητά τους να αλλάζουν τη δομή τους, δηλαδή να μεταλλάσσονται. Ως αποτέλεσμα, η ανοσία δεν έχει χρόνο για να σχηματίσει ισχυρή απόκριση έναντι παθογόνου παράγοντα και τα φάρμακα είναι αναποτελεσματικά.

Συχνά, η ηπατίτιδα διαγιγνώσκεται στο στάδιο της κίρρωσης, η οποία προδιαθέτει αργότερα την ανίχνευση της νόσου λόγω έλλειψης κλινικών συμπτωμάτων. Μόνο μέσω εργαστηριακών εξετάσεων μπορεί να ανιχνευθεί HCV κατά την περίοδο επώασης.

Η ποσοτική ανάλυση για την ηπατίτιδα C καθιστά εφικτό όχι μόνο να διαπιστωθεί η παρουσία του παθογόνου στο αίμα, αλλά και να υπολογιστεί η συγκέντρωσή του.

Συστάσεις για την προετοιμασία της ανάλυσης

Δεν απαιτείται ειδική προετοιμασία για εργαστηριακή διάγνωση. Αρκεί να τηρήσετε τις ακόλουθες συστάσεις:

  1. η ποσοτική ανάλυση πραγματοποιείται με άδειο στομάχι, με το τελευταίο γεύμα - 8 ώρες πριν από το δείγμα αίματος.
  2. για δύο ημέρες πρέπει να εγκαταλειφθεί αλκοόλ και "βαριά" πιάτα?
  3. Τα φάρμακα που λαμβάνει ο ασθενής έχουν ιδιαίτερη σημασία. Μπορούν να επηρεάσουν το αποτέλεσμα της μελέτης, οπότε ο γιατρός θα πρέπει να το γνωρίζει.

Επίσης, οι βαρειές σωματικές προσπάθειες και οι φυσιοθεραπευτικές διαδικασίες την παραμονή της δειγματοληψίας αίματος δεν είναι επιθυμητές. Για να αποκρυπτογραφήσετε την ποσοτική ανάλυση για την ηπατίτιδα C αποδείχθηκε αξιόπιστη, μην παραμελούν τις παραπάνω συστάσεις.

Συχνά ο ασθενής λαμβάνει το αποτέλεσμα της ανάλυσης σε μια μέρα. Η τιμή της δοκιμής για τον προσδιορισμό της συγκέντρωσης του παθογόνου στο αίμα εξαρτάται από το εργαστήριο και την ποιότητα των αντιδραστηρίων και μπορεί να φτάσει τα 4.000 ρούβλια.

Εργαστηριακή διάγνωση ηπατίτιδας C

Μεταξύ των κύριων διαγνωστικών μεθόδων είναι η ELISA, ή με άλλο τρόπο μια ενζυμική ανοσοπροσροφητική δοκιμασία. Αποδίδεται για την ανίχνευση ειδικών αντισωμάτων έναντι του HCV. Η αποτελεσματικότητά του φθάνει το 95%. Εάν το αντίγραφο της μελέτης δίνει ένα θετικό αποτέλεσμα, αξίζει να υποψιάζεστε την παρουσία ενός παράγοντα στο αίμα.

Θα πρέπει να σημειωθεί ότι τα μισά από τα άτομα που εξετάστηκαν με μια δοκιμασία "+" κατά τη διάρκεια της περαιτέρω διάγνωσης δεν ανιχνεύουν έναν ιικό παράγοντα στο αίμα. Η ELISA σε αυτή την περίπτωση υποδεικνύει προηγούμενη επαφή με HCV στο παρελθόν, η οποία επιβεβαιώνεται από κυκλοφορούντα αντισώματα.

Μια ακριβέστερη μελέτη είναι μια αλυσιδωτή αντίδραση πολυμεράσης, ή αλλιώς PCR. Επιτρέπει τον προσδιορισμό της συγκέντρωσης του RNA του παθογόνου στο αίμα. Έχοντας ανακαλύψει το γενετικό σύνολο του ιού σε βιολογικό υλικό, ο γιατρός επιβεβαιώνει την ηπατίτιδα C.

Η PCR αποδίδεται στον ασθενή για να επαληθεύσει τη διάγνωση. Αυτό καθιστά δυνατή την ταυτοποίηση του RNA σε ένα στάδιο όπου τα αντισώματα δεν είναι ακόμη διαθέσιμα. Υπάρχουν διάφοροι τύποι γενετικών μελετών:

  1. μια ποσοτική ανάλυση της PCR για την ηπατίτιδα C, η οποία όχι μόνο καθιερώνει την παρουσία του παθογόνου στο αίμα αλλά παρέχει επίσης πληροφορίες για τη συγκέντρωσή της.
  2. ποιότητα - επιβεβαιώνει τη μόλυνση.
  3. ο γονότυπος - επιτρέπει τον προσδιορισμό του γονότυπου ενός παθογόνου παράγοντα και την επιλογή των πλέον αποτελεσματικών φαρμάκων εναντίον του.

Αλυσιδωτή αντίδραση πολυμεράσης

Όπως ήδη αναφέρθηκε, υπάρχουν διάφοροι τύποι εργαστηριακής έρευνας:

  • ποιοτική ανάλυση - υποδεικνύει την παρουσία παθογόνου παράγοντα στο αίμα. Αυτός ο τύπος διάγνωσης έχει ένα ορισμένο "επίπεδο απόκρισης", οπότε δεν είναι πάντα αξιόπιστο. Προκειμένου να αποκρυπτογραφηθούν σωστά τα αποτελέσματα και να ληφθούν πραγματικοί δείκτες, συνιστάται η χρήση ενός συστήματος δοκιμών με ευαισθησία τουλάχιστον 50 IU / ml για τη μελέτη. Ο κανόνας της ανάλυσης είναι μια "αρνητική απάντηση" ή "ο ιός δεν ανιχνεύεται". Αυτό δείχνει την έλλειψη ενός γενετικού συνόλου παθογόνων στο υλικό δοκιμής. Αν το αποτέλεσμα ήταν θετικό, απαιτείται περαιτέρω εξέταση του ασθενούς.
  • η ποσοτική ανάλυση της PCR για την ηπατίτιδα C καθορίζει το ιικό φορτίο, δηλαδή τη συγκέντρωση του παθογόνου παράγοντα στο αίμα. Το αποτέλεσμα της μελέτης δείχνει τον αριθμό μονάδων RNA σε σταθερό όγκο του βιολογικού υγρού.

Το ιικό φορτίο είναι η καταμέτρηση του μολυσματικού RNA σε ένα χιλιοστόλιτρο αίματος του ερευνητή. Οι μονάδες μέτρησης είναι ME / ml, αλλά ορισμένα εργαστήρια προσδιορίζουν "αντίγραφα / ml", ενώ δείχνουν το κενό του προτύπου ανάλυσης για σύγκριση και αξιολόγηση των αποτελεσμάτων.

  • γονοτυπία. Λόγω της ικανότητας του παθογόνου να αλλάξει την επιλογή των αποτελεσματικών αντιιικών φαρμάκων για τη θεραπεία θα πρέπει να βασίζεται στον γονοτύπο του. Εξαρτάται όχι μόνο από το αποτέλεσμα, αλλά και από τη διάρκεια της θεραπείας. Έτσι, η ηπατίτιδα HCV 1 απαιτεί φάρμακα για ένα χρόνο, αλλά μόνο το 60% των περιπτώσεων παρουσιάζει θετική δυναμική. Όσον αφορά τον δεύτερο και τον τρίτο γονότυπο, είναι λιγότερο ανθεκτικοί στη δράση αντιιικών παραγόντων, γι 'αυτό και η αποτελεσματικότητα της θεραπείας υπερβαίνει το 85%. Όταν αποκτάται ένα τέτοιο αποτέλεσμα της έρευνας - "ο ιός δεν πληκτρολογείται", αξίζει να υποψιαστεί την παρουσία ενός παράγοντα που δεν αναγνωρίζεται από τα τυποποιημένα συστήματα δοκιμών.

Ενδείξεις για ανάλυση

Η ερμηνεία της ποσοτικής ανάλυσης για την ηπατίτιδα C είναι απαραίτητη για:

  1. περαιτέρω εξέταση του ασθενούς, όταν ανιχνεύθηκαν αντισώματα κατά του HCV με ELISA.
  2. επιβεβαίωση διάγνωσης ·
  3. καθιέρωση του ιικού φορτίου σε περίπτωση μικτής μόλυνσης, όταν ένα άτομο έχει μολυνθεί με διάφορους τύπους παθογόνων παραγόντων ·
  4. καθορισμός τακτικών θεραπείας (επιλογή αντιιικών φαρμάκων, αντικατάσταση ή ολοκλήρωση της θεραπείας).
  5. αξιολογεί τη δυναμική της εξέλιξης της νόσου, καθώς και την αποτελεσματικότητα των ναρκωτικών ·
  6. προσδιορισμός του σταδίου της παθολογίας (οξεία, χρόνια).

Η PCR έχει τα ακόλουθα πλεονεκτήματα:

  1. καλή ευαισθησία, χάρη στην οποία είναι δυνατή η μέτρηση ακόμη και μιας μικρής ποσότητας του ιού.
  2. τον προσδιορισμό του ίδιου του παθογόνου (RNA), όχι αντιγόνων,
  3. ειδικότητα της τεχνικής - δημιουργία συγκεκριμένου τύπου παθογόνου παράγοντα ·
  4. η ταχύτητα απόκτησης των αποτελεσμάτων, επειδή για την ανάλυση δεν απαιτείται καλλιέργεια των καλλιεργειών σε ένα θρεπτικό μέσο. Η απάντηση είναι έτοιμη σε 5 ώρες.
  5. καθολικότητα - επιτρέπει τον εντοπισμό ενός γενετικού συνόλου διαφόρων παθογόνων, τόσο RNA όσο και DNA που περιέχει (ηπατίτιδα Β).
  6. ανίχνευση λανθάνουσας μόλυνσης.

Ένας εργαστηριακός έλεγχος βοηθά στην επιβεβαίωση της διάγνωσης και αποτελεί αναπόσπαστο μέρος μιας περιεκτικής εξέτασης (ανάλυση κλινικών συμπτωμάτων, αποτελέσματα ELISA και βιοχημείας).

Επιπλέον, η PCR χρησιμοποιείται ευρέως στην αλλεργιολογία, τη γενετική, καθώς και για να διαπιστώσει το γεγονός της πατρότητας.

Αποκωδικοποίηση της ποσοτικής ανάλυσης για τον ιό της ηπατίτιδας C

Η αξιολόγηση των αποτελεσμάτων της εργαστηριακής διάγνωσης εκτελείται από ιατρό, συγκρίνοντας τα δεδομένα που λαμβάνονται με τον κανόνα.


Σχετικά Άρθρα Ηπατίτιδα